实验一果蝇的生活史及遗传性状的观察一、实验目的1.掌握果蝇常见突变类型和性别的鉴定方法;2.了解果蝇的生活史和饲养。二、实验原理:•果蝇(Drosophila)属于昆虫纲,双翅目。•特点:生活史短,易饲养,繁殖快,染色体少,突变型多,个体小。生活史:(最适温度20~25℃)♀♂大小大小腹端腹部末端稍尖腹部末端呈钝圆形腹片6个腹片4个腹片背纹腹部末端色浅,腹部背面呈5条黑色条纹腹部末端黑色,腹背3条条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面,呈一明显黑斑性梳无第一对足跗节基部有性梳生殖器外生殖器较简单,有阴道板和肛上板等结构外生殖器较复杂,有生殖弧、肛上板、阴茎等结构雌雄果蝇的辨别要点:性梳雌果蝇6节腹片,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出雄果蝇4节腹片,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。果蝇的野生型性状:红眼:眼睛颜色为砖红色,饱满圆形灰体:体色灰黄长翅:翅膀圆卵,静止时交叉重叠,约为腹部长度的两倍直刚毛:头胸部以及复眼的周围具有平直、先端略弯的长型粗黑硬毛常见突变性状:突变型:黑檀体(e)突变型:卷刚毛(sn3)实验二~实验五果蝇的系列杂交实验1.掌握果蝇的基本实验操作2.掌握果蝇杂交实验的原理果蝇的麻醉转入麻醉瓶:轻拍培养瓶,震落果蝇,将麻醉瓶和培养瓶两口相对,将果蝇引入麻醉瓶。麻醉:在麻醉瓶的棉花塞里侧加1~2滴乙醚,麻醉几分钟,直至果蝇不动为止。观察:将果蝇倒在白瓷板上,用毛笔小心拨动观察。补救麻醉:如果蝇在观察中苏醒过来,可用一平皿,内贴一带乙醚的滤纸条,罩住果蝇进行麻醉补救;适度麻醉过度麻醉处女蝇的收集•处女蝇:果蝇羽化后12h开始交配,之前不具生殖能力的雌果蝇,称为处女蝇。因雌果蝇能贮存精子,品系间杂交必须用处女蝇。•选择收集:将培养瓶内羽化的果蝇全部处死,此后8-12h内收集的羽化雌蝇,即是处女蝇。果蝇计数取一白纸,沿对角线对折然后展平,平置于桌面,将麻醉之果蝇倒于对角线折痕上,以毛笔拨弄果蝇使其均匀分散于对角线折痕上,然后沿对角线将雌雄果蝇分类拨入各侧计数。杂交试验基本步骤:1、收集处女蝇:每组做正、反交各1瓶,将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死,在8-12h内收集处女蝇5只,和5只父本雄蝇转移到新的培养瓶中,贴好标签,于25℃培养。2、7d后,F1幼虫出现,处死杂交亲本。3、再过4-5天,F1成蝇出现。在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型和性状;选取5对F1代果蝇,转入一新培养瓶,于25℃培养,贴好标签;4、7d后,处死F1亲本;5、再过5-7d,F2成蝇出现,开始观察记录,连续统计7d。1、果蝇的单因子实验杂交组合18#♀x2#♂(正交)2#♀x18#♂(反交)2、果蝇的伴性遗传杂交组合18#♀x22#♂(正交)22#♀x18#♂(反交)3、果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合e♀x2#♂(正交)2#♀xe#♂(反交)果蝇的系列杂交实验•果蝇的三点测交野生型果蝇(+++)为父本(红眼、长翅、直刚毛)三隐性果蝇(wmsn3)母本(白眼、小翅、焦刚毛)(不要求作正、反交对照)要求每组至少统计250只果蝇。故在“F1代果蝇,转入一新培养瓶”时,每组做4瓶或以上。注意事项:1、每次实验必须严防污染,棉塞不能混用,毛笔、瓷板和麻醉瓶使用后必须洗净、消毒、凉干。2、挑处女蝇时,每次必须把成虫一只不留地取出,并每次间隔不能超过12小时。3、移入新培养瓶时,须将瓶横卧,然后将果蝇挑入,待果蝇清醒过来后,再把培养瓶竖起,以防果蝇粘在培养基上。4、刚羽化的果蝇色淡白,体软绵,难辨♀♂,务必小心区别。5、注意使用乙醚麻醉剂,用完后应立即盖好。实验室不能有明火。6、本实验期间,实验室全开放,各组成员必须保持实验室的安全、安静、整洁、有序。