离子色谱操作教程

离子色谱操作程序一、准备工作：去离子水：必须准备足量的去离子水淋洗液：配制好要用的淋洗液配制标准溶液：提前准备好预分析离子的标准溶液（均用去离子水配制）样品：进样前要用0.45m的过滤膜过滤检查淋洗液的液面高度，不应低于200ml二、开关机：1、开机：打开N2保护气，调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间，淋洗液前仪器压力表3-6psi之间；打开IC、PC电源开关；打开仪器软件开关、开泵；开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器；检验仪器是否正常：压力1300-1500psi以下，一般阳离子1140-1160psi之间，阴离子在1140-1180之间；系统压力的波动应小于±10psi；阴离子的背景电导应低于20μS；阳离子的背景电导应低于10μS；内部无泄漏；抑制器、废液出口有连续气泡，泵出口无气泡2、关机：关抑制器关泵关软件关保护气关电源离子色谱程序设定方法1、打开色谱工作站，点击计算机代码，双击与控制面板2、确认各模块的“connected”图标均为绿色后，点击红色正方形图标（stopflow）和绿色三角图标（continue），开泵(pumpon/off)，设定流速3、点击蓝色圆形图标（acquisitionon/off），选ECD-ECD_1，选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，点击“确定”开始采集基线(如果这次和上次用的同一个系统，则可以直接连接后开泵，点击蓝色图标采集基线)4、阳离子分析：柱：CS12A抑制器：CAES淋洗液：20mMMSA淋洗液流量：1.0ml/min测试电流：65mA阴离子分析：柱：AS14抑制器：ASRS_4mm淋洗液：3.5mMNa2CO3/1.0MmNaHCO3淋洗液流量：1.2ml/min测试电流：20mA5、设定运行程序（ProgramFile）依次点击file和new，选择programfile，点击“OK”，点击“下一步”，确认泵的工作方式（isocratic）、淋洗液通道％A、高/低压极限（设为0-3000psi）和流速是否正确，点击“下一步”。选择手动进样“manual”，进样时间设为30s将acquisitiontime调整至0-18min，点击“下一步”，确认以下参数：采样频率（5Hz），自动调零“Yes”池温柱温均为“35℃”选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，电流为推荐值，点击“下一步”选择“reviewtheprograminanewwindow”，点击“完成”在程序的第一行添加一下提示信息：message“请进样”，删除“0.000”的“inject”（注意：绿色字体为注释信息，不起作用）存盘退出（推荐存入独立的“program”子目录中）6、建立方法文件（mothedfile）依次点击file和new，选择methodfile依次点击file和saveas，存盘退出（推荐存入独立的“method”子目录中）7、建立样品表（sequence）依次点击file和new，选择sequence（usingwizard），点击“OK”，点击“下一步”（连续两次次）填入未知样的数量“numberof”和每个样的平行测定次数“injectionper”，点击“apply”，点击“下一步”，填入标准样品的数量“numberof”和每个样的平行测定次数“injectionper”，点击“apply”，点击“下一步”，选择正确的程序文件，点击“open”，选择正确的方法文件，点击“open”，选择方法文件和程序文件，选择正确的报告文件，点击“下一步”，为这个sequence起名“sequencename”，点击“完成”8、运行标准样品点击蓝色圆形图标（acquisitionon/off），选择“yes”，停止采集基线依次点击batch和start。点击“add”，打开需要运行的样品表点击“readycheck”，如果样品表没有错误，将出现“readycheckwassuccessful”提示，点击“确定”点击“start”，注入样品，点击“确定”8、处理标准曲线（以多点校正为例）依次点击file和browser，双击需要处理的标准样品文件（第一个标准点），依次点击view和QNT-Editer点击屏幕左下角“General”，在“Dimensionof”处输入浓度单位“mg/L”点击相邻的“Detection”，设定最小峰面积为0.005。点击键盘“↓”，选择“是（Y）”将新生成的“MinimumArea”重新选为“InhibitIntegration”，按“Enter”键点击键盘的“↓”后，将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处，在Ret.Time[min]的第三行输入屏幕左下角显示的时间“2.5”点击相邻的“PeakTable”选择Edit、AutogeneratePeaktable，依次点击OK和确定，在“PeakName”下顺序输入离子名称，注意：定性分析到此结束。如需进行单点校正，直接执行下一步。在“Cal.Type”下“Lin”处双击左键，选择“LinearwithOffset”，点击“OK”，在“Loff”处点击右键，从弹出的对话框中选择“FillColumn”点击相邻的“AmountTable”，注意：如果进行单点校正，在“Amount[mg/L]”处输入各个组分的浓度，存盘退出在“Amount[mg/L]”处点击右键，依次选择Columns和EditAmountColumns。点击“Auto-Generate”，按“Apply”键，按“OK”键退出在“Amount”下输入各个组分的标准点浓度，屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线，点击“Integration”图标，选择“Calibration”，查标准曲线合格后，存盘退出离子色谱的基本操作一、淋洗液的配制：阳离子——20mM的MSA（甲磺酸）。配制：2.6mlMSA（分析纯即可）溶解在2升的淋洗液瓶中。注意配制过程中MSA要用0.45um的滤膜过滤，以防止堵塞管路。阴离子——3.5mMNa2CO3/1.0mMNaHCO3。配制：称取37.1gNa2CO3/8.4gNaHCO3（分析纯即可）定容于1升的容量瓶中，配成350mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液母液（可保留半年），用前需稀释100倍，即取20ml母液于2升的淋洗瓶中。注意：淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。二、样品前处理过滤：0.22µm,0.45µm过滤膜稀释：未知样品稀释100倍基体消除：去除样品中所包含的，有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分（如：重金属离子、有机大分子）去除样品中所包含的，有可能干扰目标离子测定的成分（如：高离子强度基体）三、SRS使用注意事项淋洗液中含有机溶剂时，使用外接水或者化学抑制；尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命；抑制器与泵同时开关；或当泵压1000psi以上在开抑制器每周至少开机一次，保持抑制器活性；长期不用应封存抑制器；重新启用前需要水化抑制器，具体操作如下：①ASRS——从ELUENTOUT处注入3mLH2O从REGENIN处注入5mLH2O②CSRS——从ELUENTOUT处注入3mLH2O从REGENIN处注入5mLH2O完成上述操作后，将抑制器平放30分钟。四、阴、阳离子色谱柱的更换：准备工作：要在换柱之前开泵和抑制器洗柱，至少30min，直到仪器稳定为止，因为仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。更换系统：更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器；接通电源，停泵，设置淋洗液存量；打开保护柱进口的接头，开泵；排气泡，调节流速；清洗管路，用试纸检验流出溶液的pH值，与分离柱要求的淋洗液一致后停泵；拧紧保护柱进口的接头，进行正常操作。注意：每个接口的正确对应，保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向，保护柱箭头向下、色谱柱箭头向上。抑制器连接时注意阴阳离子的不同，阴离子的regenin/out均为平头接口，而阳离子则只有regenout为平头接口，注意更换。换下来的柱子及抑制器一定要密封好，已保持内部有溶液，防止内部溶液干掉，阴离子的抑制器regenin/out用专用堵头密封。柱子装好后先开泵看是否漏水（气），再装上外面的两块面板。五、排气泡：如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。具体操作：首先开泵，将注射器插入右侧主泵，旋松主泵的旋钮，此时有液体从泵中流出，流到8ml左右关闭泵，拧紧主泵旋钮，取出注射器，弹出注射器内气泡，然后将注射器插回主泵，打开左侧副泵旋钮后，再缓慢打开主泵旋钮，慢慢将注射器内液体推入泵内，从副泵流出，旋紧两个泵的旋钮。六、测柱头压：要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。正常的柱头压力值：过六通阀到保护柱前正常压力100psi以下；过保护柱后压力小于500-600psi；过分析柱后压力小于1500psi；系统正常压力1300-1500psi以下。七、分离柱的存储与清洗分离柱的储存：在存储前用淋洗液正常运行至少10min，取下保护柱和分离柱，用死接头将分离柱/保护柱两端封堵分离柱的清洗：按清洗液—色谱柱—保护柱的流路进行清洗，流速为1.0ml/min；清洗程序及时间为：去离子水-15min，清洗液-60min，去离子水-15min，淋洗液-30min清洗液的类型阴离子柱：①低价态亲水离子污染（常用——X10倍淋洗液②高价态疏水离子污染——80%乙腈/20%200mMNaCl(用HCl调节pH=2.0)③金属离子污染——0.1M草酸阳离子柱①高价阳离子/酸溶性污染——10mMHCl(15min)——1MHCl(60min)——10mMHCl(15min)②疏水性阳离子/有机污染——10%100mMHCl/90%乙腈(30min)八、抑制器的存储与清洗抑制器的存储：抑制器的清洗：以1.0mL/min的流速，按清洗液-ELUENTIN-ELUENTOUT-REGENIN-REGENOUT流路进行清洗清洗液的类型阴离子抑制器①金属污染或沉淀——0.1MKCl/1.0MHCl(30min)——去离子水(10min)——0.2N硫酸——淋洗液(10min)②有机污染——10%1.0MHCl/90%ACN(30min)——去离子水(10min)——0.2N硫酸——淋洗液(10min)Na2CO3阳离子抑制器①金属污染或沉淀——1.0MMSA(30min)——去离子水(10min)——0.2NNaOH——淋洗液(10min)②有机污染——10%1.0MMSA/90%ACN(30min)——其余同上