实时荧光定量PCR仪比较表ABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480光源卤钨灯蓝光LED石英卤钨灯石英卤钨灯6个LED96个蓝光LEDLED1个LED氙灯通道5通道其中一个为校正染料通道3通道4通道5通道52/4通道2、4、5、6不等3块检测滤光片/6块检测滤光片五通道检测器冷CCD光电二极管PMTPMT6个光电二极管1/2个PMTPMT光电二极管CCD滤光系统5个激发光滤镜与5个发射光滤镜带有3个/4个检测端滤光片4个激发光滤镜与4个发射光滤镜5个激发光滤镜与5个发射光滤镜6个激发与6个检测激发端没有滤光片发射端有2/4个滤光片检测滤镜片3个/6个发射光检测滤光镜5个激发端滤光片和6个检测断滤光片样品通量96孔48孔/96孔96孔96孔96孔96孔36/72/1003296/384激发光范围400-660nm470nm350-750nm350-750nm450-730nm470nm365nm/470nm/530nm/585nm/625nm/680nm/460nm470nm430-630nmABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480检测光范围500-660nm350-700nm350-700nm450-730nm460nm/510nm/555nm/610nm/660nm530,640,705nm/530,560,610,640,670,705nm430-630nm可用荧光染料FAM™/SYBR®GreenI,VIC™/JOE™,NED/TAMRA™/CY3,和ROX™CY5FAM™/SYBR®Green,VIC®/JOE™,andROX™ALEXAFluor®350(350nm-440nm),FAM™/SYBR®GreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX™/JOE™/VIC™(535nm-555nm),Cy3™(545nm-568nm),TAMRA™(556nm-580nm),ROX™/TexasRed®(585nm-610nm),andCy5™(635nm-665nm).ALEXAFluor®350(350nm-440nm),FAM™/SYBR®GreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX™/JOE™/VIC™(535nm-555nm),Cy3™(545nm-568nm),TAMRA™(556nm-580nm),ROX™/TexasRed®(585nm-610nm),andCy5™(635nm-665nm).没有明确注明可用染料,SybrGreenI可用SYBR®Green,FAM,VIC,TET,HEX,ROX,JOE,TAMRAFAM™/SYBR®GreenI,TET,HEXVIC™/JOE,/TAMRA™/CY3,TexasRed和ROX™CY5FAM/SYB,LC610.LC710(2.0增加HEX,JOE,640,670)LightCycler®Cyan500/SYBRGreenI/FAM/HEC(VIC)/LightCycler®Red610/LightCycler®Red640/Cy5ABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480检测动态范围9个9个10个10个9个910个9个10温度均一性(+/-)0.5±0.5°C(+/-)0.25(+/-)0.25±0.4°C±0.4°C+/-0.01(+/-)0.4(+/-)0.35升降温速度样品:1.6度/秒,模块:2.5度/秒模块最高4.6度/秒,样品快速功能下2.2度/秒、普通功能下1.6度/秒2.5度/秒2.5度/秒最高5度/秒,平均3.3度/秒铝质:升4度/秒,降3度/秒;银质:升6度/秒,降4.5度/秒15度/秒0.1-20度/秒升4.8度/秒,降2.5度/秒检测灵敏度(准确性)单拷贝(区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%)10拷贝(区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%)单拷贝(区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%)单拷贝(区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%)单个拷贝的基因组DNA≤50fMfluorescein单拷贝单拷贝单拷贝升降温方式Peltier半导体Peltier半导体/steponeplus使用VeriFlex技术分为6个独立控制区域Peltier半导体Peltier半导体Peltier半导体Peltier半导体空气加热制冷空气加热制冷Peltier半导体ABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480反应体积20~100uL10-30uL10~100uL10~100uL1~50uL5-100ul(通常20ul)20ul-100ul的毛细管(反应体积可最少到5ul)10uL-100uL(96well)and5uL-20uL(384well)试剂和耗材专门为Taqman设计ABI专用耗材(0.1mL)开放开放(支持FRET)低缘管开放36孔可使用0.2ml的单管,其余为专用耗材特制耗材,专用试剂封闭快速PCR功能无有,快速功能40分钟内完成与FullVelocity配合使用可以快速至50分钟完成与FullVelocity配合使用可以快速至50分钟完成有有本身升降温速度比较快。反应时间45min-1.5h不等本身升降温速度比较快。35个循环反应20ul要30min,100ul要60min40-60分钟之内完成40个PCR循环ABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480软件易用性软件操作复杂、单个软件功能薄弱。绝对定量(标准曲线)、ΔΔCT进行相对定量分析、基因分型、融解曲线分析软件功能强大,支持绝对定量分析、基因表达差异分析、SNP分析等不同应用模式、操作非常方便简单,界面直观。软件功能强大,支持绝对定量分析、基因表达差异分析、SNP分析等不同应用模式、操作非常方便简单,界面直观。支持激发光滤光片与发射光滤光片的单独控制,能形成滤光片的错配,从而来满足FRET应用。标准曲线分析,ΔCT与ΔΔCT进行相对定量分析,基因分型、读板实验。数据输出方便。具有e-mail提醒功能。软件功能比较强大。ABI,Prism7500ABIStepOne/PlusStratageneMx3000PStratageneMx3005PBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotor-Gene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480主体评价5通道,能与Taqman探针很好的匹配,软件使用麻烦,需要校正染料。仪器搬动后需要校正光路。有引物探针设计软件,但只能设计引物与Taqman探针。有单独的相对定量软件。目前StepOne系列的光学系统没有详细信息。只是知道LED激发所有的孔。1.开放的系统,宽广的波长范围,能采用所有可用的探针染料.2.孔间温差小,实验重复性好。3.采用PMT检测,减少激发光、检测光交叉干扰,提高灵敏度4.软件功能强大,但非常简单易用5,机器内置芯片能保存数据,电脑死机等情况不会丢失数据。6,完全的荧光定量PCR培训项目。7,个人化的荧光定量PCR仪1.开放的系统,宽广的波长范围,能采用所有的定量探针染料.2.孔间温差小,实验重复性好。3.采用PMT检测,减少激发光、检测光交叉干扰,提高灵敏度4.软件功能强大,但非常简单易用5,机器内置芯片能保存数据,电脑死机等情况不会丢失数据。6,5通道配置,支持FRET应用。7,完全的荧光定量PCR培训项目。8,个人化的荧光定量PCR仪具有梯度和快速功能LED+光电二极管(检测灵敏度值得怀疑);逐孔扫描(光源移动);操作温度30-100℃有梯度功能;采用LED作为光源,光强弱。阵列光源有个体差异,影响检测的重复性;是普通PCR的升级产品,稳定性有待考查RG6000有5种型号:2Plex,2Plex+HRM,5Plex,5Plex+HRM,6Plex。空气加热制冷,升降温速度快,温度均一性好。但是控制温度不精确。通量少,不能使用96孔板等耗材。支持FRET应用空气加热制冷,升降温速度快,温度均一性好。但是控制温度不精确。通量少,必须使用专用的耗材。大多数通道只能用专用的试剂。光源采用氙灯寿命短500小时,灯泡价格未知。只能使用罗氏的微孔板和贴膜。活动的加热模块温度均一性差。CCD成像光路中光源距样品较远(减少边缘效应)带来的问题是检测灵敏度降低。貌似这里的参数与罗氏单页不符。?简评卤钨灯激发范围宽广,光强强,非常适合做多通道的定量PCR,LED的激发光源是冷光源相对寿命相对也要长,但是光强度低,光的激发范围受限制,氙灯波普偏窄。多通道是定量PCR发展的趋势,现在多通道的荧光定量实验也越来越多,主流的是4通道采用CCD检测器具有边缘效应,做实验时必须加入校正染料。采用PMT检测器,能将光信号放大,检测灵敏度高,无需校正染料。发光二极管的检测灵敏度低。激发光与发射光的双重过滤能排除杂光的影响,从而提高检测的准确性96孔通量高,可以采用多孔板方便操作。Stratagene扩大了光谱的检测范围,从350-750nm。目前市场上所有的荧光探针都适用。优化的4通道能减少各通道光谱之间的相互干扰。简评Stratagene检测光范围最宽广Stratagene的可用染料最多,开放性最好简评宽广的动态范围有利于摸索实验条件Stratagene改进了传统的模块加热方式,使得温度非常均匀,实验的重复性更好相比同类型产品,Stratagene的升降温速度快半导体加热制冷控温更加精确。空气加热制冷虽然快速,但是控温不精确。简评PCR反应的一般体积都是20-50ulStratagene试剂和耗材完全开放快速PCR功能有利于缩短反应时间,提高实验效率。简评Stratagene定量软件的操作简单,有口皆碑!简评stratageneMx系列是高性能,全开方的个人化实时荧光定量PCR仪指标参数ABIQ62.1热循环系统:珀耳帖效应系统,加热模式采取银质控温模块.2.2通道数:5色激发光滤光片和5色检测光滤光片;另外可以升级至6色激发光通道和6色检测光通道。2.3模块规格:标准96孔模块。2.4反应体积:标准96孔模式:10-100μL;。2.5支持耗材:国际标准96孔(0.2mL)反应板与光学盖膜,0.2mL八连管,0.2mL单管。★2.6温控模块最高升温速率≥6.5°C/秒。★2.7温控范围:39°C–97°C。2.8光学系统:高能量合金卤素灯,配备光源寿命监测并且光源寿命不低于10000小时★2.9支持