血培养仪器培训之理论部分

血培养仪器培训之理论部分1、原理：微生物在培养瓶中生长产生CO2，CO2激活了包埋在培养瓶底部的荧光物质，荧光物质在发光二级管的照射下被激发出荧光，培养孔位底部的荧光探测器探测到荧光并将数据传递到后部的微处理器，微处理器通过预设的一系列运算模式计算出荧光值；荧光值的强弱与CO2浓度成正比，而CO2浓度又与微生物浓度成正比，这样通过CO2这一中间物质将荧光强度与微生物浓度关联起来，荧光值越强，微生物浓度越高，反之亦然。2、培养瓶种类：三类七种培养瓶1）标准瓶：标准需氧瓶（血站、血液中心用）标准厌氧瓶（血站、血液中心用）2）树脂瓶：树脂需氧瓶（医院临床用）树脂厌氧瓶（医院临床用）树脂儿童瓶（医院临床用）树脂的功能：1．树脂最大的功能是吸附抗生素。树脂瓶中有两种树脂，白色的叫阳离子交换树脂，褐色的叫共价吸附树脂，一个起化学吸附作用，一个起物理吸附作用，通过这两种吸附作用，树脂可以在极短的时间内将标本中抗生素的浓度降至接近于零的水平2．裂解血细胞。如果裂解的是红细胞，可以将红细胞中的营养物质释放出来供微生物生长利用，其原理跟血平板与巧克力平板的关系一样；如果裂解的是白细胞，可以将被白细胞中吞噬的微生物释放出来，提高阳性检出率。3．为微生物生长提供了广大的附着表面。树脂用肉眼看表面是光滑的，但在高倍镜下观察表面是坑洼不平的、镂空的，打个比方就像一个核桃，如果将一个树脂瓶中所有树脂的表面积展开，可达5个标准足球场的面积。4．涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰。由于树脂本身无色透明、染色时又不着色，因而在涂片染色镜检时不会对观察背景造成干扰，从而避免了实验室初学者对观察结果产生误判。3）含溶血素瓶：含溶血素厌氧瓶1.厌氧瓶不仅可以培养厌氧菌还能培养兼性厌氧菌。2.研究数据表明有16%的链球菌和17%的肠杆菌科的细菌仅对厌氧瓶报阳，如果不用厌氧瓶就会对这部分微生物造成漏检。含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶1.BD所有的需氧瓶都能培养真菌，之所以要用这一专业的真菌瓶是为了培养苛养的真菌，比如丝状真菌。2.BD有专业的分枝杆菌培养瓶，能培养分枝杆菌，但只能培养血液等无菌体液的标本，不能培养痰标本；由于无菌体液标本无需进行预处理，因而不会形成气溶胶，不会对操作者的健康造成威胁，但在获得分枝杆菌的纯培养后，进一步的操作应在3级实验室中进行。3、双瓶多套采血：美国CLSI《血培养的原则与操作指导建议》规定，血培养标本采集应以“套”为单位，“一套”包括一个需氧瓶和一个厌氧瓶，BD给广大用户的推荐是“一个树脂需氧瓶+一个含溶血素的厌氧瓶”。对怀疑菌血症的成人患者，应在不同部位采集2~3套血培养，儿童患者也应采集2套血培养。多套血培养必须在不同部位采集，在同一部位无论采集多少套都只能算一套。4、培养瓶外观：小酒瓶设计：配合持针器的使用在颠倒混匀时能产生强烈回旋，有助于标本的混匀双条码：窄条码可撕下贴到化验单上，加强标识采血量刻度：采血时便于控制采血量存放温度：2~25℃常温保存，为实验室节省了空间和设备的投入瓶壁较厚，不会摔破，安全可靠5、BD血培养瓶的两个卓越功能：延迟瓶功能标准瓶，树脂瓶，含溶血素瓶≤48小时，25℃树脂瓶，含溶血素瓶≤20小时，35℃标准瓶≤12小时，35℃注意：延迟放入时应在室温放置，切不可放置在水浴箱和温箱内，否则仪器会报假阳性。3小时重新放入功能：针对假阳性6、假阳性和假阴性：假阳性：1.和仪器有关：血培养仪放置的环境温度要求在18~25℃，最高不要超过28℃，若仪器长期在28℃以上的环境中运行会报假阳性。血培养仪未连接稳压电源，因电压不稳导致电压的骤升骤降使仪器报假阳性。2.和耗材有关：血培养瓶存放的温度为2~25℃，存放温度若长期超出该范围，仪器也会报假阳性（培养瓶不能冻存）。3.和标本有关：血细胞也会呼吸产生CO2，虽然与细菌相比血细胞的增长非常缓慢，但是当标本中血细胞数量超标或者某些炎性疾病标本中白细胞数量超标时，仪器会将血细胞呼吸产生的CO2当做是由细菌产生的，从而报假阳性。因此，对于该类标本应给予特别关注。假阴性：1.在取样时没有将培养瓶充分颠倒混匀。2.嗜血杆菌在巧克力平板上生长，在血平板上不生长，取样时只接种了血平板而未接种巧克力平板。3.淋球菌对温度较敏感，采样时未将培养瓶恢复至室温或接种时未将淋球菌平板恢复到室温导致淋球菌死亡。排除了以上原因，仪器是不会报假阳性和假阴性的。