脑脊液常规

脑脊液检验脑脊液检验•脑脊液(cerebrospinal,CSF)是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。•正常成年人CSF总量为120～180ml,平均150ml。•CSF的主要功能:①保护脑和脊髓免受外力震荡损伤；②调节颅内压力；③提供中枢神经系统营养物质并运出其代谢产物；④保持中枢神经系统pH在7.31-7.34；⑤通过转运生物胺类物质，参与神经内分泌调节。标本采集•适应症1有脑膜刺激症状时，如脑膜感染性疾病。2疑有颅内出血，如蛛网膜下腔出血。3中枢神经系统肿瘤。4不明原因的剧烈头痛﹑昏迷﹑抽搐或瘫痪。5中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉﹑造影等。标本采集•腰椎穿刺采集，特殊情况下可由小脑延髓池或侧脑室穿刺获取。•穿刺成功后先作压力测定，正常人80-180mmH2O，＞200mmH2O表示颅压增高，此时放出CSF的量应控制在2ml以内。•测定压力后将CSF收集于3支无菌试管中，每管1～2ml。第1管作细菌培养，第2管作化学检查和免疫学检查，第3管作理学及显微镜检查，如疑有恶性肿瘤，取第4管作脱落细胞学检查。•立即送检•放置过久，细胞破坏或细胞包裹于纤维蛋白凝块中导致细胞数降低及分类不准；•葡萄糖分解，使葡萄糖测定结果降低；•细菌自溶或死亡，影响细菌检出率。脑脊液常规检查•内容包括：颜色、性状、潘氏试验、细胞计数（指白细胞计数）、细胞分类（指白细胞分类）。1颜色正常情况下，脑脊液呈无色。病理情况下可有不同的颜色改变。•①红色常见于穿刺损伤或出血性病变。•穿刺损伤引起的出血，第1管为红色血性，第2﹑3管红色逐渐变淡，红细胞计数依次减少，离心沉淀后上清液透明。•颅内或椎管内新鲜出血，3管均呈红色，红细胞计数无明显差别，离心沉淀后上清液呈淡红色或黄色。•由于红细胞在某些脑脊液中5分钟后即可出现皱缩现象，因此不能根据红细胞是否皱缩鉴别陈旧性或新鲜出血。•②黄色常见于陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血﹑椎管梗阻﹑化脓性脑膜炎﹑结核性脑膜炎﹑重症黄疸如核黄疸。•③白色或灰白色常见于化脓性脑膜炎，多由于白细胞增加所致。•④褐色或黑色见于脑膜黑色素瘤。2性状（透明度）•CSF透明度可用“清晰”﹑”透明”﹑”微浊”﹑”微浑”﹑”混浊”描述。正常情况下，CSF是“清晰”﹑”透明”。•CSF混浊主要由于感染或出血导致CSF中细胞成分增多所致，混浊程度与细胞数量有关，＞300×106/L时，可出现混浊。•蛋白质含量增加或含有大量微生物也可产生混浊。•病毒性脑膜炎﹑神经梅毒CSF可透明；结核性脑膜炎CSF常呈毛玻璃样轻度混浊；化脓性脑膜炎CSF呈明显混浊。3凝固性•CSF可用“无凝块”﹑”有凝块“﹑”有薄膜“﹑”胶胨状“描述。•正常情况下CSF标本静置12-24h不形成薄膜﹑凝块或沉淀物。•在炎症情况下，CSF中蛋白质（包括纤维蛋白原）含量增高，＞10g/L时可形成凝块。•化脓性脑膜炎CSF静置1-2h，可形成凝块或沉淀物；结核性脑膜炎CSF静置12-24h，标本表面有网膜形成，取该网膜作结核杆菌检查，阳性率较高；蛛网膜下腔梗阻时，蛋白质含量可达15g/L，呈黄色胶胨状。4潘氏试验（Pandytest)•潘氏试验是蛋白质定性试验。•正常CSF蛋白质含量不到血浆蛋白的1%，主要为清蛋白。•中枢神经系统发生病变时，蛋白质含量可有不同程度的增高。CSF中蛋白质含量检测有助于对神经系统疾病的诊断。潘氏试验（Pandytest)•原理：CSF中蛋白质与苯酚结合成不溶性的蛋白盐而生成白色沉淀。•操作：取潘氏试剂2ml，置于试管中，用吸管滴入1-2滴CSF，在黑色背景下立即观察结果。结果判定标准（1）不形成沉淀，判定为阴性（-）；（2）轻微的白色云雾状，判定为弱阳性（±）；（3）灰白色云雾状，判定为1+；（4）白色混浊，判定为2+；（5）白色絮状沉淀，判定为3+；（6）白色块状沉淀，判定为4+。方法学评价•潘氏试验所需CSF标本量少，检测灵敏度高，结果易于观察，沉淀物的多少与标本中蛋白质含量成正比。•但由于灵敏度高，部分正常CSF可出现弱阳性。5显微镜检查•（1）细胞计数•日常工作中白细胞计数。在标本采集后1h内进行。•操作：通常采用手工法，改良牛鲍计数板计数。在试管中加入1滴冰醋酸，转动试管，使内壁沾有冰醋酸后倾去，然后滴加混匀的脑脊液3-4滴，数分钟后，混匀充入计数池。•计数板：9个大方格，每个大方格容积0.1µl，计数10个大方格，结果×106/L。•如标本中细胞数过多，可用生理盐水或红细胞稀释液将标本稀释后再计数（注意：结果必须乘以稀释倍数），也可以用血细胞分析仪计数（尤其是血性标本）。校正计数•因穿刺损伤血管或出血性脑血管病的血性CSF，白细胞计数结果需要校正，剔除因出血带入CSF的白细胞。•计算法WBC已校正＝WBC未校正－RBCCSF×WBC血液/RBC血液•估算法以WBC血液/RBC血液为1/700的关系，从未校正WBC计数结果中扣除，得已校正WBC。WBC已校正＝WBC未校正－RBCCSF/700参考值•WBC成人（0-10）×106/L儿童（0-15）×106/L新生儿（0-30）×106/L•RBC无。（2）细胞分类（白细胞分类计数）高倍镜下分单核细胞（单个核细胞，主要包括淋巴细胞和单核细胞）和多核细胞（主要指中性粒细胞）。当白细胞数＞100×106/L时，计算单核细胞和多核细胞的百分比。当白细胞数＜100×106/L时，报告单核细胞和多核细胞的绝对值。•由于高倍镜下直接分类不能观察细胞的细微结构，因此个别细胞难以确认。•如果有较多量大细胞既不能归为单核细胞，又不能归为多核细胞，则进行计数并在备注中列为“分类不明大细胞×106/L”。•主要目的：引起临床注意，排除癌细胞。参考值正常CSF中主要为淋巴细胞和单核细胞，二者比例为7：3。可含极少数中性粒细胞。偶尔可见脑膜和蛛网膜细胞﹑室管膜细胞﹑脉络膜细胞等。。脑脊液细胞学检查（脱落细胞学检查）将脑脊液离心（细胞离心机制片）﹑瑞氏染色﹑油镜下分类计数。细胞分类•免疫活性细胞包括大淋巴细胞﹑小淋巴细胞﹑激活淋巴细胞﹑淋巴样细胞﹑浆细胞。提示免疫反应参与了疾病过程。•单核巨噬细胞包括单核细胞﹑激活单核细胞﹑吞噬细胞。•多核型白细胞包括中性粒细胞﹑嗜酸性粒细胞﹑嗜碱性粒细胞。•肿瘤细胞CSF中发现肿瘤细胞对中枢神经系统肿瘤有确诊价值。•白血病细胞及淋巴瘤细胞临床意义•中枢神经系统感染性疾病分急性炎症渗出期﹑亚急性增殖期﹑修复期。渗出期呈粒细胞反应；增殖期呈激活淋巴或单核巨噬细胞反应；修复期呈淋巴细胞反应。WBC（10-50）×106/L为轻度增高，（50-100）×106/L为中度增高，200×106/L以上为显著增高。中枢神经系统感染性疾病•化脓性脑膜炎WBC显著增高，可达数千×106/L。•结核性脑膜炎WBC中度增高，一般＜500×106/L。•病毒性脑炎﹑脑膜炎WBC轻度增高。•新型隐球菌脑膜炎WBC中度增高，可查到新型隐球菌。•蛛网膜下腔出血出血2-3天后可见吞噬有红细胞或含铁血黄素的吞噬细胞。•中枢神经系统肿瘤WBC数正常或稍高。CSF中找到白血病细胞对脑白血病有确诊意义。•脑寄生虫病WBC增高，嗜酸性粒细胞及浆细胞均可增高，嗜酸性粒细胞可＞60%。可见血吸虫卵﹑阿米巴原虫﹑弓形体等。谢谢！