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气相色谱法测定鱼和肉中有机磷农药残留量生物制药09304第七组背景资料有机农药纯品一般为白色晶体，工业品为浅黄或黄色油状液体，大多具有特殊的臭味，而敌百虫和敌敌畏则具有令人愉快的水果香味。有机磷农药化学性质不稳定，多数易氧化、水解、异构化，温度、pH值，水分等因素会加速这些过程的进行，在碱性条件会迅速分解而失效。如食品，饮料中机磷农药残留超标，会引起机磷农药中毒，其毒理作用在于抑制体内的胆碱酯酶，使其失去了分解乙酰胆碱的能力，使各项功能失调，引起身理紊乱和轻重不一的中毒症状。因此对食品，饮料及周围环境中机磷农药进行检测并采取相应的措施十分必要。本实验以鱼和肉类为例采用气象色谱法来检测其有机磷农药残留量实验原理在气象色谱分析法中，固定相为液相的，试样试样中各组分的分离是基于各组分在固定液中溶解度的差异。混合组分在色谱柱内经过反复多次溶解、挥发过程，使溶解度小的组分先流出色谱柱，溶解度大的组分后流出色谱柱。本实验用FPD检测器的气象色谱仪进行鱼和肉有机磷农药的残留量测定，用外标法将样品液与标准液比较定量。实验部分主要仪器与试剂主要仪器：岛津GC-14APTF气象色谱仪（FPD检测器和岛津CR-7A数据处理机）有机磷农药标准样：敌敌畏99.9%，乐果99.9%，对硫磷10ug/ml，甲基对硫磷99.9%。检测样品：鸡肉、鱼、牛肉。水：采用石英亚沸二次蒸溜水标准溶液：将敌敌畏、乐果、甲基对硫磷和马拉硫磷农药标准品用甲苯制成100ug/ml的储备液；对硫磷为10ug/ml标准液，用甲苯稀释各储备液，配制成1～10ug/ml混合液。样品溶液的制备提取将动物组织粉碎，称取粉碎的样品20g于250ml具塞锥形瓶中，加入丙酮60ml，在电动震荡器上振摇0.5h，取下后立即过滤，得到提取液。净化取提取液30ml于125ml分液漏斗中，加入20g/l硫酸钠溶液60ml，二氯甲烷30ml。摇动2min后，置于架上静止分层，将下层提取液放入第二个250ml具塞锥形瓶中。再在分液漏斗的残余溶液中加入二氯甲烷20ml，摇动再提取2min静止分层后，下层液与前液合并。在第二个锥形瓶中加入中性氧化铝1g，摇动1min。将液体从第二个锥形瓶中倒出并经滤纸过滤于100ml蒸发皿中。将盛滤液的蒸发皿放在60℃的恒温水浴锅上，蒸发浓缩至1ml。用少量的丙酮多次将残液洗入具塞并带刻度的10ml试管中，定容至5ml，供气象色谱分析用。气象色谱试验条件色谱柱：2.1m×3.2mm玻璃填充柱；固定液：1.5%OV-17+1.95%QF-1的混合固定液;担体：150-75um(100-200目)ChromosorbW-HP;其它条件：气化室温度270℃、检测器温度250℃、柱温240℃；空气：620ml/min;载气（高纯氮）：30ml/min；程序升温：190℃保持2min，然后以20℃/min升至220℃并保持11.5min。样品的分析⑴标准样品的分析移取敌敌畏储备液1.0ml，乐果1.3ml,甲基对硫磷0.8ml,马拉硫磷3.8ml，对硫磷0.8ml混合后制成标准溶液50ml。取混合标准溶液1.0ul在确定的色谱条件下进样分析，得到标准样品的色谱图（见图1）。通过相对保留时间定性分析。⑵样品的分析取制备好的样品提取液1.0ul进样分析，分别得到相应于鸡肉、鱼和牛肉的气相色谱图，图2为鸡肉的色谱图。采用外标法定量得到各样品中的农药残留量，见表1。图二：鸡肉样品色谱图按照图二依次绘制出鱼、牛肉样品的色谱图信号06.012.0保留时间t/min鱼肉样品色谱图信号06.012.0保留时间t/min牛肉样品色谱图数据处理由于ws与As均已知，而Ai根据色谱图可得到，则可算样品中有机磷农药的残留量样品敌敌畏乐果甲基对硫磷马拉硫磷对硫磷鸡肉鱼牛肉表一根据公式:SisiAAww注意事项仪器应严格按照操作方法进行操作，严禁油污、有机物以及其它污物进入检测器及管道，以免造成管道堵塞或仪器性能恶化用任意一种检测器，启动仪器前应先通入载气仪器的汽化加热电路接线内直接接有220V电压，因此只有在主机关闭时才能装接插头座，否则将烧毁接线及电子元件主机及记录仪要接地良好，记录笔走动时，不要改变衰减，以免线路过载。仪器使用完毕要用仪器罩罩好思考题⒈在用气象色谱仪操作过程中，进样时应注意哪些事项要求？答：⑴进样时应要求操作稳当、连贯、迅速。⑵进针位置及速度、针尖停留和拔出速度都会影响进样的重现性。⑶一般进样相对误差为2~5%⑷用10uL微量注射器在仪器上练习进样操作，清洗溶剂是乙醇，样品是丙酮，进样量0.5uL⒉本实验为什么采用FPD检测器?答：火焰光度检测器，又称硫、磷检测器，它是一种对含磷、硫有机化合物具有高选择性和高灵敏度的质量型检测器，检出限可达10-12g·S-1（对P）或10-11g·S-11（对S）。这种检测器可用于大气中痕量硫化物以及农副产品，水中的毫微克级有机磷和有机硫农药残留量的测定。3﹑本实验.为什么在用外标法定量分析时，可用单点校正法测定？答：因为试样中被测组分浓度变化不大时，可不必作标准曲线，配置一个与被测组分含量十分接近的标准溶液，分别分析相同量的试样和标准溶液，由被测组分和标准溶液的峰面积比（或峰高比）可直接求出被测组分的含量。