泌乳素放射免疫分析药盒说明书

泌乳素放射免疫分析药盒说明书【药品名称】通用名：碘[125I]-泌乳素放射免疫分析药盒汉语拼音：Dian[125I]CuirusuFangshemianyifenxiYaohe英文名:Iodine[125I]-ProlactionRadioimmunoassayKit简称：碘[125I]泌乳素(PRL)放免药盒【使用目的】用于定量测定人血清（或血浆）中泌乳素(PRL)的浓度。【用途】泌乳素是由垂体前叶分泌的蛋白激素，分子量为2200dt。在雌激素、孕激素、皮质类固醇作用的基础上，泌乳素对泌乳的开始和维持起着重要作用，妊娠后血清泌乳素逐渐增加，至分娩前达到高峰，哺乳期进一步增加，泌乳素的测定，对诊断垂体疾病，如垂体瘤和泌乳综合症的诊断有重要价值，对月经异常和不孕症的诊断有重要意义。本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含泌乳素(PRL)的样品和125I标记的泌乳素(PRL)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中泌乳素(PRL)的浓度。【试剂主要组成成分】PRL标准品：一套共7瓶，以不含PRL的人血清为基质，用时轻轻摇匀，（2~8℃）需冷存。PRL标准品浓度ABCDEFG（单位）05102550100200ng/ml本药盒标准品浓度采用WHO1stIRP75/504,与WHO2ndIS83/562的换算关系为：1ng/ml(1stIRP)=21mIU/ml(2ndIS83/562)质控血清：两瓶，低值和高值，1.0ml／瓶，浓度值范围见瓶上标签。2～8℃冷存。抗PRL抗体：一瓶，绿色溶液，2～8℃冷存。125I-PRL：一瓶，88.23kBq/瓶，红色溶液，2～8℃冷存。分离剂：一瓶，蓝色溶液，充分摇匀后使用，2～8℃冷存。【仪器】γ－计数器低温离心机恒温水浴箱【样本收集和保存】220微升人血清样本。采静脉血5ml于塑料试管中，静置使其凝固后，1500转／分离心，取其上清液，放置玻璃瓶中。如果样本不立即使用，可在-18℃~-25℃储存6个月。严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。【使用前准备】试验前，恢复样本至室温，小心摇匀血清样本。【实验方法】【实验方法I】1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30分钟以上才可进行操作；2、取60X12mm聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本200µl加入相应编号的试管中；4、每管均各加入200µl标记物工作液；5、除去总T管、NSB管以外的每管均各加入200µl抗体工作液，充分混匀；6、37℃温育180分钟；7、每管均各加入500µl分离剂后，充分混匀；8、室温放置5~10分钟后，离心3500转／分，20分钟后，吸去或倾倒掉上清液；9、用γ-计数器测定各管计数CPM.推荐检测时间:1分钟10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。【操作流程】【操作流程I】（单位μL）NSB标准品(Standards)质控品和人样品(QC&Samples)TA（B0）BCDEFGLH12…..标准品(STD)A200200标准品(STD)B－G200200200200200200质控品和样品(QC&Sample)200200200200….抗PRL血清(Anti-PRL)125I-PRL混匀，置37℃水浴温育180分钟(VortexandIncubate180minutesat37℃)分离剂(Pr)500摇匀，室温放置5～10分钟，3000RPM离心20分钟（温度低于25℃）Vortex，Centrifugefor20minutesat3,000RPM（Below25℃）吸去上清液(AspiratetheSupernateofthetubes)沉淀物计数1分钟(Countfor1minute)【实验方法II】1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30分钟以上才可进行操作；2、取60X12mm聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本200µl加入相应编号的试管中；4、每管均各加入200µl标记物工作液；5、除去总T管、NSB管以外的每管均各加入200µl抗体工作液，充分混匀；6、室温（16～25℃）放置过夜（12～16小时）；7、每管均各加入500µl分离剂后，充分混匀；8、室温放置5~10分钟后，离心3500转／分，20分钟后，吸去或倾倒掉上清液；9、用γ-计数器测定各管计数CPM.推荐检测时间:1分钟10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。【操作流程II】（单位μL）200200NSB标准品(Standards)质控品和人样品(QC&Samples)TA（B0）BCDEFGLH12…..标准品(STD)A200200标准品(STD)B－G200200200200200200质控品和样品(QC&Sample)200200200200….抗PRL血清(Anti-PRL)125I-PRL混匀,室温放置12~16小时(VortexandIncubate12~16hrsatRoomTemperature)分离剂(Pr)500摇匀，室温放置5～10分钟,3000RPM离心20分钟（温度低于25℃）Vortex，Centrifugefor20minutesat3,000RPM（Below25℃）吸去上清液(AspiratetheSupernateofthetubes)沉淀物计数1分钟(Countfor1minute)【实验过程中应注意】1、γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％；2、加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染；3、如果某一个样本的测定值高于最高浓度的标准品浓度，用零标准品以1：2或1：4的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。【质量控制】每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果的可靠性。1、质控血清的平均值应在允许范围内；2、曲线方程应采用最佳拟合方式；3、重复样本的测定结果相差在15％以内。如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。【测定结果的计算】计算标准品（B~G）、质控品和样品与标准品A的比值剂量-反应曲线按“对数剂量-结合率对数”（Log(dose-Log(B/B0))数学模型或四参数数学模型拟合，通过每个标准品的B/B0和其浓度建立标准曲线；从标准曲线上查出样本的浓度值，样本的浓度应在标准曲线之内。【实验的局限性】本品仅供体外诊断使用，只能用于人血清或血浆样本的测定而不能用于其他体液样本；通过其它方法得到的PRL值与本品测定结果不具有直接的可比性；【产品性能指标】灵敏度：取药盒中校准试剂A点（0剂量）作20平行管，求其均值X及偏差SD，从剂量—反应曲线上查出与X-2SD相对应的剂量值，确定为本药盒的灵敏度（最小检出值），为0.4ng/mL。200200B/B0×100=标准或样品(STDorSamples)(CPM)—NSB(CPM)A标准(STD)(CPM)—NSB(CPM)×100精密度：精密度是质量控制的基本参数，用批内变异系数和批间变异系数确定。要求批内变异系数10%，批间变异系数15%。批内变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3同时分别进行多个复管一次测定中的重复性，应小于10%。C1C2C3批内变异系数4.16%5.25%6.18%批内变异系数均小于10%。批间变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3在多次测定间的重复性，应小于15%。C1C2C3批间变异系数7.38%6.71%4.37%批间变异系数均小于15%。测定范围：采用零标准品添加高浓度的PRL,确定本试剂盒的测定范围为0～200ng/ml【正常参考值】年龄（岁）例数平均值ng/ml实测范围ng/ml男性379.80~21女性9712.12~23文献报告的正常范围可供参考如下正常例数平均值ng/ml实测范围ng/ml分娩时母血清3611226~410青春期前：男(5～17岁)3262~16女(4～17岁)4773~19成人：男1391~12女2054~21内分泌异常例数平均值ng/ml实测范围ng/ml单纯生长激素缺乏13106~16原发性多垂体激素缺乏21141~48下丘脑肿瘤1392~26女性肢端肥大16239~60男性肢端肥大6123~33伴有溢乳的垂体肿瘤82677355~11130建议各实验室应建立本实验室的正常值，以上数据仅供参考。【规格】50人份／盒、100人份／盒【储藏】冷冻组份-20℃,冷藏组份2～8℃。【有效期】1个月【使用范围】仅供体外诊断使用【批准文号】国药准字S10950200【生产企业】天津市协和医药科技有限公司【地址】天津市南开区白堤路238号【电话】80081801000228789188002287893072