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1基因工程考试试卷（十四）院系年级专业姓名学号考试课程题号一二三四五六七八总分(2)用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。()(3)脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶。()(4)蛋白质的氨基酸序列中各种重要信号都可以通过短氨基酸序列同报告蛋白的融合进行研究。()(5)用不同的产生粘性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的粘性末端是不亲和的粘性末端。()(6)人工导入基因和正常染色体基因间的同源重组，可以发生基因置换。()(7)不匹配的粘性末端可以通过部分填补后进行连接。()(8)通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。()(9)就像对培养中的鼠胚性干细胞进行遗传操作获得突变鼠一样，用DNA转染培养中的单个植物细胞，能够创造转基因植物。()(10)在液相—液相和液相—固相杂交中，它们的杂交效率相同。()四、选择题(每题2分，共20分)(1)下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?()(a)限制酶是外切酶而不是内切酶(b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割(c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端(e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端(2)DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，()(a)将双链DNA分子中的5'磷酸基团同3'OH末端重新形成磷酸二酯键(b)作用时不消耗能量(c)需要Mn2+等二价辅助离子(d)也可以连接RNA分子(3)关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确?()(a)具有可诱导性(b)具有可转移性(c)细菌生长的任何时期都可以出现(d)不同细菌出现感受态的比例是不同的(4)关于Ti质粒的四个区，下列哪一项不正确（）(a)T-DNA区(b)Vir区(c)Con区(d)Ore区(5)关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确?()(a)在不同的宿主中具有不同的复制机制(b)在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点(c)在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶(d)在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率得分一、填空题：（每小题2分，共10分）1、基因表达2、质粒3、平齐末端4、回文序列5、杂交探针二、填空题（每空1分，共10分）(1)噬菌体是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是__________，而来自噬菌体的主要结构是___________________。(2)基因工程又称重组DNA技术，其实施至少要有4个必要的条件：(1)____________；(2)____________；(3)___________；（4）___________。(3)只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成，用_____________可以将这段DNA进行百万倍的扩增。(4)质粒拷贝数是指细胞中___________________。(5)EGTA是________________离子螯合剂。(6)简并PCR主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计________引物来合成相应的基因。三、判断题(每题1分，共10分)(1)取代型载体(replacementvector)是指叫同一种限制性内切核酸酶在λDNA中具有两个切点，外源DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。()得分：得分：得分：得分：2基因工程考试试卷（十四）院系年级专业姓名学号考试课程(6)异戊醇的作用是：()(a)使蛋白质脱水(b)使DNA脱水(c)帮助DNA进入水相(d)减少气泡，促进分相(7)用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：()(a)染色体DNA断成了碎片(b)染色体DNA分子量大，而不能释放(c)染色体变性后来不及复性(d)染色体未同蛋白质分开而沉淀(8)关于cDNA的最正确的提法是：()(a)同mRNA互补的单链DNA(b)同mRNA互补的双链DNA(c)以mRNA为模板合成的双链DNA(d)以上都正确(9)限制性内切核酸酶可以特异性地识别：()(a)双链DNA的特定碱基对(b)双链DNA的特定碱基序列(c)特定的三联密码(d)以上都正确(10)能够用来克隆32kb以下大小的外源片段的质粒载体是()(a)charomid(b)plasmid(c)cosmid(d)phagemid五、简答题(30分)(1)简述基因工程的操作流程？（6分）(2)简述PCR技术的原理。（6分）(3)cDNA文库与基因组文库的区别。（6分）(4)简述构建载体的一般原则。（6分）(5)简述在筛选基因重组体的方法中的重组质粒的快速鉴定和重组质粒的限制酶解鉴定的原理。（6分）六、实验成绩（20分）得分：得分：