液相色谱仪检定规程的操作说明书

液相色谱仪检定规程的操作说明书一、通用技术要求1.1仪器外观仪器上应有仪器的名称、型号、制造厂名、产品系列号、出厂日期等内容的标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证MC标志。1.2仪器电路系统仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键等功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。二、计量性能要求1.1输液系统1.1.1输液管路接口紧密牢固，在规定的压力范围内无泄漏。1.1.2流量设定值误差Ss和流量稳定性误差Sr应符合表1的要求。1.1.3梯度误差Gc:不超过±3%。1.2柱温箱1.2.1柱箱温度设定值误差△Ts：不超过±2℃。1.2.2柱温稳定性Tc：不超过1℃。1.3检测器液相色谱仪检测器的主要技术指标见表2。表1流量设定值误差Ss和流量稳定性误差Sr的要求流量设定值/（mL/min）0.51.02.0测量次数333流动相收集时间/min1055允许误差Ss5%3%2%Sr3%2%2%注：①最大流量的设定值可根据用户使用情况而定。②对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。表2液相色谱仪检测器的主要技术检测器项目紫外-可见光检测器二极管阵列检测器荧光检测器示差折光率检测器基线噪声不超过5×10-4AU不超过5×10-4FU不超过5×10-7RIU基线漂移不超过5×10-3AU/h不超过5×10-3FU/h不超过5×10-6RIU/h最小检测浓度不超过1×10-7g/mL萘/甲醇溶液不超过1×10-9g/mL硫酸奎宁/高氯酸水溶液不超过5×10-6g/mL丙三醇/水溶液波长示值误差波长重复性不超过±2nm优于2nm不超过±5nm优于2nm线性范围优于103优于103优于103换挡误差优于2%优于2%优于2%1.4整机性能仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示。1.4.1定性测量重复性（6次测量）RSD6:不超过1.5%。1.4.2定量测量重复性（6次测量）RSD6:不超过3.0%。三、检定方法1、通用技术要求的检查按第1.1、1.2条的要求，目视、手动检查。2、输液系统的检定a)泵耐压检定将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1mL/min，按说明书启动仪器，压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口处应无湿迹。卸下色谱柱，堵住泵出口端（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保持5min无泄漏。b)泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差Sr的检定按表1的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表1规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、式（2计算）Ss和Sr。Ss=（mF-Fs）/Fs×100%（1）Sr=(Fmax-Fmin)/Fm×100%（2）3、基线噪声和基线漂移的检定选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0Ml/min，紫外检测器的波长选在254nm，检测灵敏度调到最灵敏档，记录纸速调至5—10mm/min。开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。Nd=KB(3)式中：Nd----------检测器极限噪声；K-------衰减倍数；B-------测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1h内基线偏离原点的值（AU/h）表示。4、最小检测浓度的检定在3的色谱条件下，用微量注射器从进样口注入10--20μL1×10-7g/mL的萘/甲醇溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰—峰高，按式（4）计算最小检测浓度cL(按20μL进样量计算)。20H2NdcVLc(4)式中：cL------最小检测浓度，g/mL;Nd-------基线噪声峰—峰高,mm;c----标准溶液浓度，g/mL;H-------标准溶液的色谱峰高，mm;V------进样体积，μL。5、整机性能（定性、定量重复性）的检定将仪器各部分连接好，选用C18色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数：紫外检测器和二极管阵列检测器用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，检测波长为254nm，灵敏度选择在0.04左右，基线稳定后由进样器注入5-10μL的1×10-4g/mL的萘/甲醇标准溶液；荧光检测器用85%甲醇/水溶液做流动相，流量为1.0mL/min，激发波长和发射波长分别为345nm和455nm，灵敏度选在中间挡，基线稳定后注入5-10μL的1×10-6g/mL硫酸奎宁/高氯酸水溶液；差示折光率检测器用100%的水为流动相，流量为1.0mL/min，灵敏度选在中间挡，注入5-10μL的1×10-3g/mL的丙三醇水溶液。连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按式（7）计算相对标准偏差RSD6.RSD6定性（定量）=)16/()(261iiXX×X1×100%（7）式中：RSD6定性（定量）---定性（定量）测量重复性相对标准偏差；Xi-----第i次测得的保留时间和峰面积；X-----6次测量结果的算术平均值；i-----测量序号。