新药研究中的动物实验方法生化分院药剂专业周丽萍实验动物:是指经人工饲育,对其携带的微生物实行控制,遗传背景明确或来源清楚,用于新药研究、教学、生产、鉴定以及其他科学实验的动物。通过对动物本身生命现象的研究,进而推用到人类,探索人类的生命奥秘,控制人类的疾病和衰老,延长人类的寿命。重要性常用实验动物大鼠小鼠兔Beagle犬小型猪猴ByChenMin-li1动物实验前的准备左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤右手抓取鼠尾左手无名指按住鼠尾小指按住后腿1.1实验动物的抓取与固定小鼠的抓取与固定1.2编号和标记方法标记的方法应保证号码清楚、耐久、简便、易认和适用。现介绍几种常见标记方法:染色法、标牌法、烙印法、耳孔法。编号原则是:先左后右,从前到后。1.3实验动物的麻醉动物的麻醉方法1.全身麻醉(1)吸入法(2)腹腔和静脉给药麻醉法2.局部麻醉1.4实验动物被毛的去除方法去除被毛的方法有四种:•剪毛•拔毛•剃毛•脱毛2实验动物的给药途径和方法•经口给药:饲料、饮水、灌胃•注射给药:皮下注射静脉注射腹腔注射脑内注射等•吸入给药:鼻腔吸入鞘内注射小鼠的腹腔注射小鼠的灌胃小鼠的皮下注射皮下注射大鼠尾静脉3人类疾病动物模型医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。认识生命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研究,实质上是生物比较医学的应用科学。使用动物模型的意义提供疾病材料避免人体实验造成危害增加可比性样品易得简化实验动物模型设计原则相似性重复性易行性经济性可靠性适用性可控性动物背景资料完整3再现所要研究的人类疾病14能在2种动物重复产生该疾病2动物模型的评估价廉便于运送实例:缺氧缺血性脑损伤疾病动物模型大鼠左侧颈总动脉结扎2-3h后左眼睑裂变小缺氧时大鼠出现登高、相互挤靠等现象4周龄,SD大鼠麻醉、备皮游离左颈总动脉,结扎术后休息2-3h,苏醒后以8%O2和92%N2、1.5-2L/min的流量持续通气2.5h大鼠左颈总动脉已游离HE染色观察脑组织病理变化经心脏灌流4%多聚甲醛固定取脑脱水透明浸蜡包埋行常规HE染色不同时间点的脑组织病理变化图(HE×100)4各种检验标本采集方法其他检验标本采集方法脑脊液采集腹水采集断头采集断头取脑血液采集方法尾侧静脉采血:大鼠,0.5-1mL尾静脉切口采血:小鼠、大鼠,0.1-0.2mL粪、尿液采集方法5实验动物的处死方法•脊椎脱臼法•断头法•击打法•急性大失血法(心脏灌注)•化学致死法心脏灌注