甜菜夜蛾抗药性及其机理

第卷年第期月植物保护学,!代!日人甜菜夜蛾抗药性及其机理王开运姜兴印仪美芹陈丙坤夏晓明山东农业大学植物保护学院,泰安摘要采用〕推荐的点滴法,测定了甜莱夜蛾山东泰安种群对顺式氯氰菊醋等种药剂的杭性,以及种增效剂对种药剂的增效作用。用浸渍法测定了种渗透剂对药剂的增效作用。结果表明,泰安种群与敏感种群相比,对顺式氯氰菊醋、灭多威、丙澳磷、氟呢脉和硫丹的杭性分别达,,,及倍,且抗性谱广、发生程度严重。种增效剂和种渗透剂与不同药剂混用,均表现不同程度的增效作用,表明该种群为多重杭性。其杭性与多功能氧化酶、水解酶、谷脱甘肤一一转移酶的活性提高有关,也涉及杭击倒基因敏感度和表皮穿透性的改变。关键词甜莱夜蛾,杀虫剂,抗性,机理甜菜夜蛾匀刃故化呀〕是我国近年来危害严重的害虫之一。世纪年代以前,该虫在我国为间歇性发生。自年代以后,随着气候条件和栽培制度的变化,该虫的发生有逐年加重的趋势,尤其以黄淮和江淮地区发生面积大、危害重,部分地区甚至暴发成灾。因其食性杂、寄主范围广〔’〕,又特别喜食蔬菜、大豆、花生、玉米及棉花等作物,给农业生产带来很大影响。长期以来,防治该虫主要依靠化学农药。在我国南方,由于该虫发生世代多,用药频繁,上海郊区已发现其对拟除虫菊醋和有机磷杀虫剂产生了显著抗性〔〕。作者等也已证明,山东泰安郊区蔬菜田的甜菜夜蛾对顺式氯氰菊醋、灭多威、氟陡脉和丙澳磷均不敏感,其抗性随世代和幼虫龄期的增加而增强。为进一步明确该虫的抗药性现状和机理,解决生产中的防治难题,特开展了甜菜夜蛾抗药性及其机理的研究。材料与方法供试药剂顺式氯氰菊醋,原药山东华阳农药化工集团、乳油本实验室配制灭多威,原药山东华阳农药化工集团氟陡脉,原药日本石原产业株式会社丙澳磷,原药山东青岛农药厂、乳油本实验室配制硫丹,晶体美国陶氏化学公司毒死蟀,原药浙江仙居农药厂辛硫磷,原药天津农药总厂增效醚,纯度日本高沙化学公司认,纯度中国科学院上海昆虫研究所增效磷,纯度中国科学院动物研究所磷酸三苯醋甲北学纯基金项目国家“九五”科技攻关资助项目仪一一。植物保护学报卷上海化学试剂厂顺丁烯二酸二乙醋北学纯班公司农药伴侣翰,工业品山东充州中草药农药厂农药渗透剂叨,工业品河北固安助剂厂。试虫敏感种群由华中农业大学植保系提供。抗性种群分别于和仪刃年月下旬采集于山东泰安市郊区范镇的大葱田。饲养方法在恒温养虫室内以人工饲料单头饲养。饲养条件温度士℃,相对湿度左右,光周期二。毒力测定方法点滴法采用〕推荐的微量点滴法,待幼虫进人龄第天每头虫重达时测定。用丙酮将药剂稀释成系列浓度,用微量点滴仪点滴到幼虫的胸部背板,每头川,对照组用丙酮处理。每个浓度处理头,重复次,处理后分别放人含人工饲料的养虫盒内,单头饲养。在℃恒温养虫室内特异性杀虫剂为后检查死、活虫数,计算虫口死亡率、校正死亡率,并按阎机率分析法求山印值。浸渍法将药剂先配成乳油,再用水稀释成系列浓度,每次取一巧头幼虫放人浸虫器中,置于药液中浸渍,每个浓度处理头,重复次,取出后分别放人含有人工饲料的养虫盒内单头饲养。饲养条件和计算方法同点滴法。抗性机理研究增效剂的作用选用、认、了〕和种酶抑制剂,分别与药剂按混用,配成丙酮液并稀释成系列浓度,以点滴法处理。试虫饲养、观察及结果计算同点滴法。增效倍数药剂山父药剂增效剂。,〕渗透剂的作用将渗透剂与和习分别配成和的水溶液,用其分别将药剂乳油稀释成系列浓度,按上述浸渍法对试虫浸渍处理、饲养、观察和结果计算。按增效剂的增效倍数计算方法,计算渗透剂的增效倍数。结果与分析抗药性比较山东泰安甜菜夜蛾对种药剂的抗性见表。种代表性药剂顺式氯氰菊醋、灭多威、丙嗅磷、氟陡脉和硫丹对泰安种群龄幼虫的刀分别为,,,和子侣,与对敏感种群的毒力相比,抗性分别达!,,,和倍。以对顺式氯氰菊醋、灭多威和丙嗅磷种常用拟除虫菊醋、氨基甲酸醋和有机磷类杀虫剂的抗性最为严重。抗药性发展速度泰安郊区不同年份甜菜夜蛾田间种群的抗药性变化见表。经过年的药剂防治,种常用杀虫剂对该地甜菜夜蛾龄幼虫的毒力均有不同程度的降低,抗性均有显著提高。该虫对顺式氯氰菊醋、灭多威、辛硫磷、毒死蟀、丙嗅磷、氟陡脉和硫丹等种药剂的抗性变化分别为,,,,,和倍。该地甜菜夜蛾对种药剂间抗性水平的差异主要与南方虫源地用药的种类和数量有关。近年来,由于该虫对拟除虫菊醋王开运,等甜菜夜蛾抗药性及其机理表甜菜夜蛾对种药剂的抗性毛山毛改砚邵心招」药剂敏感种群!详,‘抗性种群叹治枷洲己石。抗性倍数称硬男劝值场拌岁值bvah.e顺式氯氰菊酷alpllac甲,mledlrin灭多威medlomyl丙澳磷p到赫ofos氟吮脉山10司1.呱川又】硫丹end〔旧u】faZI1.47031.87151.48721.70161.80820.02872.48750.16701.65385.34591.m770.62451.4月以)12.81101.7325H场(尸留g)44.08288.8651034.喇))巧.585152.5印巧36.0532.1193.525.011.9表2不同年份甜菜夜蛾对7种药剂抗性变化毛山le2Resistanceehangesof5.。理召“。toseveninsecticidesinthe击fferentye印rs药剂In溉ticides抗性倍数(2(XX)/1卯8)b值by曲,ell场(尸留g)b值bvalueLl场(拜留g)Resist田Iceratlo顺式氯氰菊酷目pll朋y详m双,俪n灭多威训油阅,yl毒死蝉dd。甲y“fos辛硫磷phoxin.丙澳磷profenofos氟陡脉e卜肠田u~硫丹endos.川油12.07702.32551.73182.1伪22.36871.36151.384313.37014.肠l49.1以2.48751.65381.45911.36271.《犯771.4捉刃1.73253.35.92.21034.415.585152.563.22.41.81.3类药剂的抗性严重,各地使用灭多威和有机磷类杀虫剂的量增大,因此该虫对这两类药剂的抗性增长较快。2.3抗性机理2.3.15种酶抑制的增效作用利用多功能氧化酶抑制剂PBO、多功能氧化酶和抗击倒基因抑制剂NIA、多功能氧化酶和醋酶抑制剂SV;、梭酸醋酶抑制剂lr甲和谷胧甘肤一s一转移酶抑制剂DEMS种酶抑制剂与顺式氯氰菊醋混用后的增效作用见表3。从表3看出,PBO的增效倍数最高,为3.3倍;N认和Tpp次之,分别为2.0和1.9倍;svl再次之,为1.5倍;DEM增效倍数仅为1.2倍。说明该种群对顺式氯氰菊醋的抗性与多功能氧化酶活性提高有关,也与水解酶、谷胧甘肤一S一转移酶有一定关系。由表4可知,对灭多威的增效作用,以PBo增效最突出,达4.0倍;其次为sVI,达3.6倍;NIA和叨匹〕再次之,分别为2.7和2.3倍;DEM仅为1.4倍,亦有一定增效作用。该种群对灭多威的抗性机理主要与多功能氧化酶、水解酶活性提高有关,谷胧甘肤一S一转移酶也参与其代谢。由表4还可看出,5种酶抑制剂对丙澳磷的增效作用,N认增效十分显著,达7.2倍;其次为SVI,达3.4倍;而PBO、Tpp和DEM分别为1.3,1.4及1.3倍,也有一定的增效作用。多功能氧化酶专性抑制剂PBO却增效不突出,而作用点较多的N认和SVI均表现出显著的增效作用。其原因与NIA能抑制其抗击倒性和svl能抑制醋酶的植物保护学报29卷表35种酶抑制剂对顺式氮氛菊醋的增效作用r【、d〕le3Synel衫smoffiveelu犯11einhil〕itorstoalpllac”片mleth石n药剂111阳注icidss1」从!解g增效倍数S押ergisticratio顺式氯氰菊醋目pl1acy’PenneI如rn司pllac解rmed滋n+PBO目lzllac,知记Iluin+NIAal汕况ypennethrin+SVIal户a日犯“,Inetl俪n+皿〕P是山如砚月祀mletl币n+DEM回归式(y二)R吧ession.邓lat1On0.侧飞粗+2.4875x2.3月《珍+2.3705x2.1689+2.的55x1.8922+2.ll4Dx2.35肠+l.9549x1.7肠2+2.1259x95%置信限95%FL44.082036.768一52.85413.23印11.0]5~16.01222.441018.的5一27.83229.510023.斜5~36.54322.6汉洲)17.987~28.5475.429728.655~43.812表45种酶抑制剂对灭多威和丙澳磷的增效作用尸ral〕le4Syne心smoffiveel拐yn】ei而bitorstomethomylandpn〕felldbs酶抑制剂Elu犯11ei山ibitor灭多威methonlyl丙嗅磷pn;庇llofosb值bvdueLl)义(陪g)增效倍数S犯lergistioratiob值bvalueL【)刃拌岁g增效倍数Syllel名istioratio凡、,一44八j..…J.,夕九一、1...981139如9840麒143姗714洲0341.57411.57961.肠701.51121.取刃81.65384.02.73.62.31.41.25751.61452.2望X)1.48271.25751.0277156926689卿225865223224653788PBONIASVITPPDEM水解活性有关。5种酶抑制剂对硫丹的增效作用见表5。其中N叭增效显著,达3.1倍;PBO、SV、、卿和DEM分别达1.6,1.8,2.3和2.0倍,均有明显的增效作用。其抗性机理也与该种群抗击倒能力增强和多功能氧化酶、水解酶、谷胧甘肤一S一转移酶的解毒代谢作用提高有关。由表5还可看出,仅有Tpp和DEM对氟陡脉有一定增效作用,增效倍数分别达1.5及1.3倍;PBO、NIA和svl增效均不明显。表明该种群对氟陡脉的抗性与水解酶和谷胧甘肤一s一转移酶有一定关系,与多功能氧化酶关系不明显。2.3.22种渗透剂的增效作用生物测定证明,翰和顺式氯氰菊醋混用与顺式氯氰菊醋单用相比,u二印由296.37nlg/L降至93.167n娜L,增效达3.2倍。C,01B与顺式氯氰菊醋混用与单用相比,LC,〕降至巧9.以n官L,增效达1.9倍。表明甜菜夜蛾对顺式氯氰菊醋的抗性与药剂穿透表皮能力的降低有直接关系。翰和Cl,olB分别与毒死蜂混用,其增效倍数分别为1.6和1.3倍,增效作用也较为明显,表明甜菜夜蛾对毒死蟀的抗性亦与表皮穿透性变化有关。3讨论甜菜夜蛾一直是我国南方地区发生的主要蔬菜害虫,并依靠化学防治控制为害[e],因长期大量使用化学农药导致抗药性的发生。吴世昌[z]在1981年测定氯氰菊醋、嗅氰菊王开运,等:甜菜夜蛾抗药性及其机理表55种酶抑制剂对硫丹和氟咤崛的增效作用lhbles黝祀心smoffiveel此”11ei南bitorstoell(losuifallandc喻团uaz山℃n酶抑制剂Ell甲lleirlhlbi1OI,硫丹傲妇osu】6ul氟咙脉elll。田uazun”1b值bvalue1」蝙寻刁g增效倍数Synergsticratinb值bval吸eIJ),解g增效倍数S”lerglstiorati。1.5173151731.铭911.57391.59531.粼以)13.981,Ž1”一/1”、985736以58,,八‘0气乙气”,..,.且.......唯.且,卫八、l勺勺‘‘1135622697925925508846816272441.5闷印1.42111.29741.35681.48011.3843PBONIASvlTPPDEM醋和氰戊菊醋3种菊醋类药剂,及马拉硫磷、敌敌畏和乙酞甲胺磷3种有机磷杀虫剂对该虫均是敏感的,1991一1992年,抗性才突出地暴露出来。作者在山东多点进行越冬调查证明,在我国黄淮地区,因冬季寒冷,该虫难以在露地条件下越冬,但各种群的抗药性水平却与南方虫源差异不大。越冬调查和抗药性测定结果表明,山东等北方非越冬地区的甜菜夜蛾是由南方迁飞而来,要明确其迁飞规律