石膏炮制前后的生肌药效比较研究

［基金项目］　国家“十五”重大科技专项“创新药物和中药现代化”资助项目（No．２００１BA７０１A５５３２）Correspondenceto：XiangLI，MD，Professor．EMail：[e-mail]石膏炮制前后的生肌药效比较研究李　祥１，刘元芬１，项晓人２，周一彪１，张之磊１（１．南京中医药大学药学院药物化学教研室，江苏南京２１００２９；２．南京中医药大学江苏省针灸学重点实验室，江苏南京２１００２９）［摘要］　目的：考察生、煅石膏的生肌作用。方法：于大鼠背部两侧脱毛区用手术刀切割直径约为１．５cm圆形创口２个，间距约为２cm，深达肌层，肌层伤口厚度约为０．１５cm，建立大鼠肌层创口模型。将４０只形成创口的SD大鼠随机分为４组：模型组、贝复济治疗组、生石膏治疗组、煅石膏治疗组。然后于创口处分别撒敷生、煅石膏细粉，喷洒药物贝复济，分别于第８和第１４天观察创口肉芽组织的修复状态。结果：煅石膏治疗组与模型组和生石膏治疗组比较，大鼠创口成纤维细胞数、肉芽组织中毛细血管数和肉芽组织中毛细血管面积均明显增加，差异有统计学意义（P＜０．０１）；与贝复济治疗组比较，两者差异无统计学意义（P＞０．０５）。生石膏治疗组与模型组比较，差异无统计学意义（P＞０．０５）。结论：煅石膏能促进大鼠伤口成纤维细胞和毛细血管的形成，加快肉芽组织增生，从而促进皮肤创口的愈合。石膏煅制后药效发生改变，具有生肌作用。［关键词］　石膏；煅石膏；创口；肉芽组织；生肌［中图分类号］　R６８５　　［文献标识码］　A　　［文章编号］　１６７２１９７７（２００６）０６０６２４０４ComparativestudyoftheeffectsofGypsumFibrosumandGypsumFibrosumPreparatuminpromotinggranulationXiangLI1，YuanFenLIU1，XiaoRenXIANG2，YiBiaoZHOU1，ZhiLeiZHANG1（１．DepartmentofMedicinalChemistry，CollegeofPharmacy，NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing，JiangsuProvince２１００２９，China；２．KeyLaboratoryofAcupunctureofJiangsuProvince，NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing，JiangsuProvince２１００２９，China）ABSTRACT　Objective：ToinvestigatetheeffectsofGypsumFibrosumandGypsumFibrosumPreparatuminpromotinggranulation．Methods：Thewoundsofmusclelayerwereproducedinratsbyusingsurgicaloperation．Tworoundwounds，withdiameterabout1．5cm，werecutatthedepilatoryareaoftwosidesofthebackofeachrat，withanintervalof2cm，deeptomusclelayer，andthethicknessoftheknifewoundofmusclelayerwasabout0．15cm．FortySDratswiththewoundswererandomlydividedinto4groups：untreatedgroup，beifujitreatedgroup，GypsumFibrosumtreatedgroupandGypsumFibrosumPreparatumtreatedgroup，with10ratsineachgroup．ThenthewoundsweresprinkledwithpowdersofGypsumFibrosumandGypsumFibrosumPreparatum，orsprayedwithbeifujisolution，respectively．Thehealingstateofgranulationtissuesofthewoundswasobservedattheeighthandfourteenthdayrespectively．Results：Thenumberoffibroblasts，thenumberofcapillarytubesandtheareaofcapillarytubesingranulationtissueofwoundsintheGypsumFibrosumPreparatumtreatedgroupweresignificantlyhigherthanthoseintheuntreatedgroupandGypsumFibrosumtreatedgroup（P＜0．01）．TherewerenostatisticaldifferencesbetweentheGypsumFibrosumPreparatumtreatedgroupandthebeifujitreatedgroup．However，GypsumFibrosumtreatedgroupshowednoobviousdifferencescomparedtotheuntreatedgroup（P＞0．05）．Conclusions：GypsumFibrosumPreparatumcanacceleratetheformationofcollagenoblastandmicrangiumin·４２６·中西医结合学报２００６年１１月第４卷第６期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，November２００６，Vol．４，No．６wounds，andtheproliferationofgranulationtissues，thuspromotingtheskinwoundstohealing．TheeffectofGypsumFibrosumischangedafterbeingcalcined，andGypsumFibrosumPreparatumhasobviouseffectinpromotinggranulation．KEYWORDS　GypsumFibrosum；GypsumFibrosumPreparatum；trauma；granulationtissue；promotinggranulationZhongXiYiJieHeXueBao／JChinIntegrMed，2006，4（6）：624627　　．jcimjournal．com　　石膏（GypsumFibrosum）始载于枟神农本草经枠，列为中品。为单斜晶系石膏的矿石。中医临床生、煅兼用，功效各异。生石膏性大寒，主要功效为清热泻火，除烦止渴。煅后主要为外用，煅石膏收湿、生肌、敛疮、止血。外用治疗疮疡不敛、湿疹瘙痒、水火烫伤和外伤出血。其收湿作用可能为煅石膏的物理性质，因石膏煅过后极易吸水，能保持创面干燥。石膏中还含有钙离子，具有止血的功效。石膏炮制前后功效截然不同，具有明显的变化，本文就生、煅石膏生肌药效进行比较实验研究。1　材料与方法１．１　实验材料１．１．１　药品与试剂　生石膏，采自湖北应城，研成细粉，过五号筛。煅石膏，取生石膏经６５０℃煅制０．５h而得，研成细粉，过五号筛。贝复济喷雾剂（外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子），珠海东大生物制药有限公司，批号２００４１２０２，规格３６０００AU／瓶。硫化钠，武进县化学试剂厂，批号８９７２０，临用前用蒸馏水配成８％的溶液。戊巴比妥钠，上海化学试剂公司，批号２００２０３１５。１．１．２　实验动物　选用SPF级健康SD大鼠４０只，雌雄各半，体质量１８０～２２０g，由南京中医药大学实验动物中心提供，许可证号：SYXK（苏）２００２０１２３。１．１．３　实验仪器　CMIAS９８A图像分析仪，北京航空航天大学提供。１．２　实验方法１．２．１　造模［１］、分组及药物处理　所有实验动物给药前后，均单笼喂养，自由饮水，室温２０～２５℃，相对湿度４５％～６０％。４０只SD大鼠均在背部两侧，用８％硫化钠脱毛，每块脱毛面积约为３cm×３cm。脱毛后，腹腔注射１％戊巴比妥钠３ml／kg，麻醉后在脱毛处常规消毒，然后进行手术，形成２个圆形创口，即在每块脱毛区距脊柱１cm处各用手术刀切割直径约为１．５cm圆形创口２个，间距约为２cm，深达肌层，肌层伤口厚度约为０．１５cm。形成创口的动物随机分为４组：模型组、贝复济治疗组、生石膏治疗组和煅石膏治疗组，每组１０只。煅石膏治疗组和生石膏治疗组于动物背部两侧创口（共４０个）处分别均匀撒敷约５０mg粉末；贝复济治疗组，将贝复济均匀喷于创口（６００AU／创口）处；模型组不作任何处理。４组大鼠创口均无菌包扎。隔日换药１次，其中煅石膏治疗组、生石膏治疗组和贝复济治疗组中每只动物一侧创口（共３０个）各连续给药８d，另一侧创口（共３０个）连续给药１４d。１．２．２　检测指标　分别于给药后第８和第１４天于相近处取肉芽组织，进行组织学一般观察，并计算肉芽组织成纤维细胞数、新生毛细血管数、面密度、数密度和周密度等。取肉芽组织置卡诺氏液中固定４５min，常规乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片，苏木素伊红（haematineeosin，HE）染色法染色后用光镜及图像处理系统进行：（１）一般观察；（２）每个标本观察３个视野，计算肉芽组织中成纤维细胞数，并求其均值（成纤维细胞数／每个视野）；（３）每个标本观察３个视野，计算新生毛细血管数及其面积，并计算面密度（新生毛细血管总面积／统计场面积）、数密度（新生毛细血管个数／统计场面积）、周密度（新生毛细血管周长／统计场面积），求其平均每个视野的数值［２］。１．３　统计学方法　采用t检验进行统计学分析。2　结　果２．１　一般观察　给药后第８天，模型组肉芽组织中新生毛细血管较少，成纤维细胞分布在大量炎性细胞中。贝复济治疗组肉芽组织中新生的毛细血管较多，管腔大；中性白细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等数目减少，成纤维细胞分布较密集，且大多为幼稚细胞。煅石膏治疗组肉芽组织中新生的毛细血管较多，管腔大；中性白细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等数目减少，成纤维细胞分布较密集，且大多为幼稚细胞。生石膏治疗组肉芽组织中新生毛细血管较少，成纤维细胞分布于一些炎性细胞中。见图１。给药后第１４天，模型组动物新生的毛细血管分布仍不多见，成纤维细胞数量稍增加。贝复济治疗组新鲜肉芽菲薄，下面的肉芽组织逐渐纤维化；毛细血管分布较多见，管腔大；成纤维细胞分布仍很密集。煅石膏治疗组新鲜肉芽菲薄，下面的肉芽组织·５２６·中西医结合学报２００６年１１月第４卷第６期　JournalofChineseIntegrativeMedicine，November２００６，Vol．４，No．６逐渐纤维化；毛细血管分布较多见，管腔大；成纤维细胞分布仍很密集。生石膏治疗组新鲜肉芽菲薄，下面的肉芽组织纤维化缓慢；毛细血管分布略多，管腔大；成纤维细胞分布仍较密集。见图２。２．２　石膏对大鼠创口肉芽组织中成纤维细胞、毛细血管数目和面积的影响　煅石膏治疗组与生石膏治疗组比较，大鼠创口成纤维细胞数、肉芽组织中毛细血管数和肉芽组织中毛细血管面积均增加，差异有统计学意义（P＜０．０１）；与贝复济治疗组比较，差异无统计学意义（P＞０．０５），表明煅石膏修复创口、生肌作用与贝复济相当。生石膏治疗组与模型组比较，差异无统计学意义，表明生石膏无生肌作用。见表１、２。图1　给药8d各组病理组织切片（HE染色，×1200）Figure1　Pathologicalchangesafter8dayadministrationin4gro