第07章胺类药物的分析11

第七章芳香胺类药物的分析本章主要内容芳胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析苯丙胺类药物的分析第一章芳胺类药物的分析一、基本结构与化学性质Structureandproperties常见的芳胺类药物对氨基苯甲酸酯类药物COOR2NR1H重氮化偶合与芳醛缩合-Schiff碱易氧化变色易发生水解侧链烃胺-碱性苯佐卡因（benzocaine）H2NCOOC2H5H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2]HCl.[盐酸普鲁卡因（procainehydrochloride）局部麻醉药。浸润麻醉、阻滞麻醉、蛛网膜下腔麻醉、硬膜外麻醉和封闭疗法局部麻醉药。COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHHCl盐酸丁卡因(tetracainehydrochloride)CONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl盐酸普鲁卡因胺(procainamidehydrochloride)其局麻作用比普鲁卡因强，毒性亦较大，能透过粘膜主要用于粘膜麻醉眼科手术前表面麻醉用于各种心律失常但因其促心律失常作用和其他不良反应，现仅推荐用于危及生命的室性心律失常。酰胺类药物的基本结构NHCR2OR1R3R4酰胺结构水解后具有芳伯胺基酚羟基与FeCl3显色侧链烃胺弱碱性，与生物碱沉淀剂与重金属离子反应有色配位化合物HONHCOCH3对乙酰氨基酚（扑热息痛）(paracetamol）用于感冒发烧、关节痛、神经痛偏头痛、癌性痛及术后止痛。SOONHCOCH3CH3CONH醋氨苯砜(acedapsone)抗麻风药物。NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3HCl盐酸利多卡因（lidocainehydrochloride）本品为局麻药。主要用于表面麻醉（胸腔镜检查和腹腔手术时作粘膜麻醉用）NHCONC4H9CH3CH3HCl盐酸布比卡因（bupivacainehydrochloride）用于局部浸润麻醉外周神经阻滞椎管内阻滞。（一）具有芳伯氨基（二）酯键或酰胺键（三）具脂烃胺侧链（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（六）UV（七）IR（五）某些特征取代基（如酚羟基）的反应二、鉴别试验（identificationtest)（一）重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄～猩红色萘酚OH-※直接：盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸普鲁卡因胺H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2]HCl.[盐酸普鲁卡因ChP（2005）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）供试品50mg稀盐酸1ml溶解放冷NaNO20.1mol/L数滴碱性β-萘酚数滴橙黄-猩红色间接：对乙酰氨基酚醋氨苯砜HONHCOCH3对乙酰氨基酚ChP（2005）[鉴别]（2）NaNO2试液碱性β-萘酚2ml红色水3ml稀释供试品约0.1g稀盐酸5ml加热40min放冷5滴取0.5mlHONHCOCH3+HCl+H2OHONH2HCl.（乳白色）盐酸丁卡因H2NaNONHC4H9COOCH2CH2N(CH3)2+HNO3N-C4H9COOCH2CH2N(CH3)2-ONN-亚硝基化合物（二）三氯化铁反应对乙酰氨基酚（三）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应黄色蓝紫色硫酸铜盐酸利多卡因氯仿碳酸钠亮绿色细小钴盐盐酸利多卡因H2CoCl黄色棕黑色）暗棕色羟肟酸铁（紫红色羟肟酸盐酸普鲁卡因胺322FeClOH2．羟肟酸铁盐反应、）（盐酸利多卡因3HNO23NOHg3．与汞离子的反应对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色区别（四）水解产物的反应1.盐酸普鲁卡因ChP（2005）[鉴别]供试品约0.1g水2ml溶解10%NaOH1ml白色沉淀△油状对氨基苯甲酸钠△蒸汽盐酸白色沉淀过量盐酸普鲁卡因不溶于水二乙胺基乙醇OHCH2CH2N(C2H5)2溶于水普鲁卡因H2NCOONa不溶于水H2NCOOH2.苯佐卡因ChP（2005）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。）（碘仿臭气，黄色乙醇乙醇苯佐卡因32CHINaOHINaOHH2NCOONa+（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物盐酸利多卡因ChP（2005）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀熔点为228～232℃，熔融时同时分解。2.硫氰酸盐衍生物盐酸丁卡因ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，熔点约为131℃。盐酸布比卡因ChP（2005）[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。（六）UV（七）IR盐酸布比卡因ChP（2005）[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。三、杂质检查(impuritiestest)（一）对乙酰氨基酚的杂质检查HONHCOCH3一般杂质：酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣特殊杂质：乙醇溶液的澄清度和颜色有关物质（对氯乙酰苯胺）对氨基酚NO2Cl水解NO2OH还原Fe粉NH2OH乙酰化NHCOCH3OH生产中的还原剂带入则产生浑浊。1、乙醇溶液的澄清度和颜色对乙酰氨基酚性状：白色结晶或结晶性粉末易溶于热水、乙醇略溶于水Fe粉对氨基酚氧化后形成有色氧化物，在乙醇中显橙红色或棕色2.有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物对氯乙酰苯胺杂质对照品法NO2Cl水解NO2OH还原Fe粉NH2OH乙酰化NHCOCH3OH副反应NH2Cl还原乙酰化NHCOCH3Cl样品液和对照液：检查方法TLC对乙酰氨基酚1g乙醚5ml离心上清液对氯乙酰苯胺50μg/ml200μl40μl限量？4050100%200510-6=0.005%2.对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理蓝色亚硝基铁氰化钠对氨基酚OH配位化合物HONHCOCH3检查方法对照法取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005％）。%005.0%1000.11050%1006供试品量允许杂质存在的最大量L(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查检查方法TLC杂质对照品法杂质来源水解产生（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物Cl-+22+2+++ArNH2NaNO2HClArNNNaClH2O四、含量测定※具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。NHCOR+H2ONH2+RCOOHH+△NO2+6[H]NH2+2H2O2.主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：NOCl（氯化亚酰胺）NN+Cl-快NNOH快NNOH慢NO+Cl-NH2OHNOBrHBrHNO22OHNOClHClHNO22（1）K1（2）K2∵K1≈300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度HCl+KBr→HBr+KCl（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3盐酸1:2.5～6；加入盐酸：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果NN+Cl-+H2NNNNH+HCl酸度过大，游离Ar-NH2量减小，反应减慢（3）室温条件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定3.指示终点的方法（1）永停滴定法ChP（2005）、BP（1998）永停滴定法（附录ⅦA）调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml。置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂—铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，搅拌。至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。（2）电位法USP（24）（3）外指示剂法（4）内指示剂法4.测定方法盐酸普鲁卡因ChP（2005）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl（三）紫外分光光度法对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。（二）非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性对乙酰氨基酚ChP（2005）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。%11cmE原料药吸收系数法%100100%11scmmVnlEA百分含量USP（24）对照法（四）HPLC法盐酸普鲁卡因注射液ChP（2005）可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.重氮化—偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+·BrC．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法ChP（2005）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点第二节苯乙胺类药物的分析R1CHCHNHR2OHR3苯乙胺类药物的基本结构*侧链烃胺HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素常见的苯乙胺类药物Adrenaline用于心脏骤停的抢救和过敏性休克的抢救，也可用于其他过敏性疾病(如支气管哮喘、荨麻疹)的治疗。与局麻药合用有利局部止血和延长药效。HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHONoradrenalinebitartrateHOCHOHCH2NHCH3HCl盐酸去氧肾上腺素HCOHHCCH3HNCH3.HCl盐酸麻黄碱HOCHOHCH2NHCH(CH3)2HClHO盐酸异丙肾上腺