第9章维生素类药物(6版)

2019/8/181第九章维生素类药物的分析2019/8/182概述维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。人体不能合成维生素。2019/8/183VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺2019/8/184第一节维生素A的分析（一）结构一、结构与性质为一个具有共轭多烯醇侧链的环己烯2019/8/185维生素A为全反式结构存在多种立体异构化合物-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:CH3CH3CH3CH2ORCH3CH32019/8/186维生素A325.5100%新维生素Aa32875%新维生素Ab320.524%新维生素Ac310.515%异维生素Aa32321%异维生素Ab32424%max相对生物效价2019/8/187VitA2VitA3易发生脱氢、脱水、聚合反应dehydroretinolanhydroretinol2019/8/188鲸醇kitol2019/8/189酸醛环氧化物、氧化剂紫外线、VitAVitAVitA]O[O2△或有金属离子存在时氧化↑1、不稳定性共轭多烯侧链易被氧化（二）性质2019/8/1810环氧化物VitA醛VitA酸2019/8/18112、与三氯化锑发生呈色反应紫红蓝色3SbClVitACHCl34、溶解性不溶于水，易溶于有机溶剂和植物油等3、UV吸收325~328nm有吸收2019/8/1812（一）三氯化锑反应条件无水无醇紫红蓝色3SbClVitACHCl3二、鉴别试验2019/8/1813-RCOOSbCl5+CH2蓝色紫红+CH2-RCOOSbCl52019/8/1814VitAVitA无水乙醇-HCl(100:1)△去水(二）UV法λmax为326nm一个吸收峰λmax为350～390nm三个吸收峰2019/8/1815USP显色剂磷钼酸规定斑点颜色和Rf值BP杂质对照品法显色剂三氯化锑TLC法（三）2019/8/18161、杂质吸收异构体氧化产物及光照产物合成中间体去氢维生素A（VitA2）去水维生素A（VitA3）（一）UV法——三点校正法三、含量测定2019/8/18172、测定原理（1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸光度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。2019/8/18182019/8/1819纯品溶剂λE1%1cmCF维生素A醋酸酯环己烷328nm15301900维生素A醇异丙醇325nm182018302019/8/1820国际单位IU1IU=0.344μg全反式维生素A醋酸酯6110129070000.344/ggAIUgIU维生素醋酸酯3、生物效价及换算因子(CF)/2907000IUg效价（）2019/8/18216110133300000.300/ggAIUgIU维生素醇1IU=0.300μg全反式维生素A醇6110/33300000.300gIUgg效价（）2019/8/18221%1/cmIUgCFE＝333000018301820CF290700019001530CF维生素A醋酸酯维生素A醇定义：单位数值所相当的效价1%1cmE1%1/cmIUgECF＝2019/8/18234、标示量％计算％标示量丸标示量％＝100/IU1%1////cmIUIUggIUgWECFW丸丸％标示量平均丸重＝100g/IU1%1100cmECFW％标示量2019/8/1824%100%ACFWCl标示量标示量W100ml10ml50ml1010010050AAWCll%100%100ADCFWW标示量标示量1%1cmE2019/8/18255、波长的选择三点波长的选择原则：一点选择在维生素A的最大吸收处（1），其他两点在1的两侧各选一点（2和3）1=max=328nm2=316nm3=340nmΔ=12（1）第一法（等波长差）测定对象维生素A醋酸酯31122019/8/1826（2）第二法等吸收比法(皂化法)测定对象VitA醇32176AAA1=max=325nm2=310nm3=334nm2019/8/1827iAnm360340328316300ml/IU159S处测、、、、分别于溶液～环己烷6、第一法（直接测定法）（1）方法求算并与规定值比较，求差值328iA/A2019/8/18283003283163283283283403283603280.5550.9071.00000.8110.299AAAAAAAAAA规定值差值328iA/A2019/8/1829max在326～329nm之间1）（2）A的选择且所测各波长吸光度比值均不超过规定值的±0.02直接用328nm波长处测得的A328进行计算2019/8/18303403163283282523AAA.A校正max在326～329nm之间2）且所测各波长吸光度比值有一个以上超过规定值的±0.02%100AAAf328328)(328校正校正公式：计算2019/8/18310+3%－15%－3%第二法校正328A328A第二法f2019/8/1832供试品需按第二法（皂化法）测定max不在326～329nm之间3）1900%100%100ADWW标示量标示量（3）结果计算2019/8/1833VitAD胶丸中VitA的含量测定精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物0.2399g至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为2019/8/1834A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299求本品中维生素A的标示量%？2019/8/18357、第二法等吸收度法(皂化法)测定对象VitA醇32176AAA2019/8/1836i/KOHAnm334325310300ml/IU159VitAVitAS处测、、、于～稀释至溶解异丙醇除去植物油的干扰甘油和脂肪酸盐植物油醇醋酸酯皂化液挥干乙醚乙醚提取乙醇水溶性脂溶性（1）方法2019/8/18371）max在323～327nm之间（2）A值的选择且A300/A325小于或等于0.73334310325325260455528156A.A.A.A校正%100AAAf325325)(325校正2019/8/183803%－3%校正325A325A校正325Af2019/8/18392）max不在323～327nm之间或取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定A300/A325大于0.731830%100%100ADWW标示量标示量（3）结果计算2019/8/1840（1）校正公式采用三点法，仪器波长不准确，会有较大误差，故测定前，应校正仪器波长（2）测定应在半暗室中快速进行，所用试药不得含有氧化性物质，避免被紫外线或氧化性物质破坏8、讨论2019/8/1841（二）三氯化锑比色法蓝色3SbClVitA优点简便快速λmax618nm～620nm标准曲线法SbOClSbClOH32缺点呈色不稳定（5~10s内）水分干扰与标准曲线温差≤±1℃专属性差三氯化锑有腐蚀性2019/8/1842NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+ClHCl-·氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第二节维生素B1的分析HClCl-一、结构与性质（一）结构thiaminehydrochloride2019/8/18431、溶解性易溶于水水溶液呈酸性2、UV共轭双键λmax=246nm3、硫色素反应蓝色荧光硫色素正丁醇OOH（二）性质2019/8/1844嘧啶环——伯氨噻唑环——季铵可与酸成盐与生物碱↓→↓含量测定——非水碱量法4、碱性2019/8/1845荧光消失蓝色荧光硫色素正丁醇）（环合HCNFeKOHNaOHVitB6321]O[OHCh.P.二、鉴别试验（一）硫色素反应2019/8/1846VitB14242HgIH]B[HgIK淡黄H+2KIIIHI]B[2红色H+H+白色硅钨酸OH4WO12OHSiO]B[23222白色扇形苦酮酸H+(二）沉淀反应2019/8/1847PbSNaSVitBAcPbNaOH　OHNHAgNOAgCl白3HNOHNO蓝淀粉试纸KIMnOClHS元素反应Cl-反应（三）其他反应2019/8/1848三、含量测定HClOClOBHClOHClClBAcHg）（喹哪啶红－亚甲蓝（紫红→天蓝）（一）非水溶液滴定法原料2019/8/18490.1337.27216.86/CMTnmgml%WFTVV%空样含量2019/8/1850（二）UV法2019/8/1851片剂、注射剂=421%cmE11（每片）相当于标示量的%=1%1100%100cmADWEW标示量A=CL规格g/片g/100ml稀释体积gCh.P.1%1cmE2019/8/1852（每ml）相当于标示量的%=1%1100%100cmADEV标示量规格g/mlml2019/8/1853260页维生素B1片的测定20片，总重2.5413g，取片粉0.5802gW100ml5ml100ml246nm，A=0.685，标示量=10mg/片求标示量%？规定95.0~105.0%，合格否？=421%cmE112019/8/1854260页维生素B1注射液的测定2ml200ml5ml100ml246nm，A=0.512，标示量=25mg/ml求标示量%？规定95.0~105.0%，合格否？=421%cmE112019/8/18551VitB铁氰化钾异丁醇硫色素荧光NaOH（三）硫色素荧光法1、原理2、方法与计算激发波长λex365nm发射波长λem435nmF=KC2019/8/1856标准对照法（1）样——0.2μg/ml（2）对照——0.2μg/ml（3）氧化试剂——1.0％铁氰化钾4.0ml＋3.5mol/LNaOH（4）测定方法2019/8/1857NaOH氧化试剂异丁醇3ml3ml3ml3ml20ml→F对样品液5ml2份样空白液5ml1份对照液5ml2份对照空白液5ml1份20ml→F样空白20ml→F对空白20ml→F样2019/8/1858FFCFFC样样空白样对对对空白－＝－100%CDW样含量％＝2019/8/18593、特点（1）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于体液分析2019/8/1860第三节维生素C的分析654321OOHHOOCOHHCH2OHL－抗坏血酸一、结构与性质(一）结构内酯2019/8/1861OOHHOOCOHHCH2OH123456C3－OH的pKa=4.17C2－