第七章_苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析

Pharmaceuticalanalysis第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析主讲：张婷婷教学要求掌握:苯乙胺类拟肾上腺素药物的结构和性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物药物的鉴别、检查和含量测定的原理和特点熟悉：主要苯乙胺类拟肾上腺素药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度了解：影响苯乙胺类拟肾上腺素药物稳定性的主要因素，体内样品与临床监测2Pharmaceuticalanalysis芳香胺类：Pharmaceuticalanalysis3例：苯佐卡因，盐酸普鲁卡因例：肾上腺素，盐酸麻黄碱例：对乙酰氨基酚，盐酸布比卡因第一节结构和性质Pharmaceuticalanalysis4共性：结构特点：•具有苯乙胺的基本结构，临床上用作升压、平喘、充血治疗等•结构中的苯环常被活泼的酚羟基所取代，并具有碱性的脂肪乙胺侧链，因此易被氧化变质Pharmaceuticalanalysis5R1HCOHHCR3HNR2HXR一、典型药物与结构特点：Pharmaceuticalanalysis6HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2HClHO盐酸异丙肾上腺素Pharmaceuticalanalysis7一、典型药物与结构特点：盐酸麻黄碱盐酸苯乙双胍盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇H2SO42HOCH2OHCHOHCH2NHC(CH3)3ClH2NClCHOHCH2NHC(CH3)3HClCHOHCH2NHCNHCNH2NHNHHClCCCH3OHNHCH3HHHCl二、主要理化性质1、酚羟基特性邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合显色；在空气中易氧化，在碱性溶液中更易变色。2、弱碱性烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性；游离碱难溶于水，其盐可溶于水3、旋光性手性碳原子，具有光学活性。4、紫外吸收根据苯环取代基的电负性，最大吸收波长以254nm为中心红移或者蓝移；紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。Pharmaceuticalanalysis8*第二节鉴别试验Pharmaceuticalanalysis9一、与铁盐、甲醛硫酸的反应Pharmaceuticalanalysis10药物三氯化铁甲醛-硫酸肾上腺素翠绿色,加氨试液显紫色→紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素翠绿色,加碳酸氢钠试液显蓝色→红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红→橙红→深棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色,加新制碳酸氢钠液,显蓝紫色→红色棕色→暗紫色硫酸沙丁胺醇紫色,加新制碳酸氢钠液,显黄色浑浊二、还原性反应酚羟基易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色。Pharmaceuticalanalysis11重酒石酸去甲肾上腺素酒石酸氢钾饱和液pH3.56碘试液放置5min硫代硫酸钠溶液为无色或仅显微红色或淡紫色肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素明显的深红棕色或紫色与上面相同的实验条件三、氨基醇的双缩脲反应盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。盐酸去氧肾上腺素的鉴别：乙醚层不显色，可与盐酸麻黄碱区别Pharmaceuticalanalysis12+Na2SO4+2NaCl+4H2O+CuSO4+4NaOH2NHCH3OCH3NHCH3OH3CCuNH2+CH3OHH3CCl-乙醚层紫红色水层蓝色四、脂肪伯胺的Rimini试验Pharmaceuticalanalysis13脂肪伯氨基的专属反应，可用于鉴别。重酒石酸间羟胺溶解亚硝基铁氰化钠试液丙酮，碳酸氢钠△红紫色60℃，五、吸收光谱的特性Pharmaceuticalanalysis14•我国药典规定，利用紫外特征吸收光谱进行鉴别的药物如下表所示：药物溶剂浓度(mg/ml)λmax(nm)吸收度(A)盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280硫酸特布他林0.1mol/L盐酸0.1276重酒石酸间羟胺水0.1272硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克仑特罗0.1mol／L盐酸0.03243,296盐酸伪麻黄碱水0.5251,257,263•红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别。习题：最佳选择题：下列药物中，可显双缩脲反应的是A盐酸多巴胺B盐酸麻黄碱C苯佐卡因D对氨基苯甲酸答案[]Pharmaceuticalanalysis15B习题：最佳选择题：下列药物中，可显Rimini反应的是A盐酸多巴胺B盐酸麻黄碱C对氨基苯甲酸D重酒石酸间羟胺答案[]Pharmaceuticalanalysis16D习题：多项选择题：盐酸去氧肾上腺素常用的鉴别反应有A重氮化-偶合反应B三氯化铁显色反应C双缩脲反应DRimini反应答案[]Pharmaceuticalanalysis17BC第三节特殊杂质及其检查法Pharmaceuticalanalysis18OHOHCH2NHCH3COOHOHHCH2NHCH3COH一、酮体杂质的检查来源：肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素等都是由相应的酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易带入酮体杂质，故这些药物均要检查酮体。Pharmaceuticalanalysis19H2Pd原理：利用酮体在紫外310nm处有最大吸收，而药物本身在此波长几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体Pharmaceuticalanalysis20一、酮体杂质的检查例：中国药典（2010年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：取本品，加盐酸溶液（9→2000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波长处测定，吸光度不得过0.05，已知酮体在310nm波长处的百分吸收系数为453，肾上腺素在该波长处无吸收。21大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子，通过比旋度测定控制药物的质量。ChP2010采用比旋度值进行光学纯度检查。手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体分离分析，目前常用的方法为色谱法和电泳法。Pharmaceuticalanalysis21二、光学纯度的检查三、有关物质的检查★TLC法:盐酸去氧肾上腺素★纸色谱法：盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查（Chp2010版）★HPLC法：大多数药物均采用此法肾上腺素中有关物质的检查（供试品溶液自身稀释对照法）Pharmaceuticalanalysis22习题：配伍选择题：A氨基酚和对氯苯乙酰胺B酮体C对氨基酚D间氨基酚E酮胺中国药典（2010年版）规定下列药物需检查特殊杂质是1.对乙酰氨基酚2.肾上腺素Pharmaceuticalanalysis23AB第四节含量测定Pharmaceuticalanalysis24此类药物含量测定总结：原料药含量测定多数采用非水溶液滴定法特殊药物：盐酸去氧肾上腺素→溴量法重酒石酸间羟胺→溴量法盐酸克伦特罗→亚硝酸钠法制剂的含量测定主要采用紫外—可见分光光度法和HPLCPharmaceuticalanalysis25一、非水溶液滴定法Pharmaceuticalanalysis26适用范围：•非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。常用的非水溶剂：•酸性溶剂：冰醋酸•碱性溶剂：DMF（二甲基甲酰胺）•两性溶剂：甲醇•惰性溶剂：氯仿，甲苯，丙酮一、非水溶液滴定法由于本类药物多为弱碱性，在水溶液中用酸滴定液直接滴定没有明显的滴定突跃，终点难以观测。而在非水酸性溶剂中,能够被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱强度显著增强。因此，弱碱性药物及其盐类原料药的含量测定，国内外药典多采用高氯酸非水溶液滴定法。Pharmaceuticalanalysis27(一)基本原理（置换滴定——强酸置换出弱酸）Pharmaceuticalanalysis28一、非水溶液滴定法注：当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA有机弱碱盐被置换出的弱酸（二）一般方法中国药典（2010年版）的第一法：精密称取供试品适量〔约消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）8ml〕，加冰醋酸10～30ml使溶解，加各品种项下规定的试液（醋酐或醋酸汞试液）指示液1～2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定。终点颜色以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定的结果用空白试验校正。Pharmaceuticalanalysis29一、非水溶液滴定法问题：氨基易被加入的醋酐乙酰化，使碱性显著减弱而不能被准确滴定。解决方法：在低温条件下加醋酐（三）问题讨论：1、适用范围：Kb10-8的有机碱8＜pKb＜10冰醋酸作溶剂10＜pKb＜12冰醋酸+醋酐pKb＞12醋酐醋酐解离生成的醋酐合乙酰离子[CH3CO+〃(CH3CO)2O]比醋酸合质子[H+〃CH3COOH]的酸性更强，更有利于碱性药物的碱性增强。Pharmaceuticalanalysis30一、非水溶液滴定法（三）问题讨论：2、酸根的影响无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞HSO4-＞硝酸＞其它弱酸（磷酸、有机酸）问题：大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物难溶于水且不稳定，故常制成盐酸盐。在测定有机碱的氢卤酸盐（如盐酸盐）时，置换出的HA是酸性较强的氢卤酸则反应不能进行到底，影响滴定终点。Pharmaceuticalanalysis31一、非水溶液滴定法均可置换一、非水溶液滴定法（三）问题讨论：2、酸根的影响解决方法：加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成在醋酸中难解离的卤化汞，消除氢卤酸对滴定的影响Pharmaceuticalanalysis32[B]HAc+HClO4［B]HCl+Hg(Ac)2[B]HAc+HgCl2[B]HClO4+HAc（三）问题讨论：3、滴定剂的稳定性问题：醋酸具有挥发性，且膨胀系数较大，因此温度和储存条件影响滴定剂的浓度。解决方法：标定与滴定时温度超过10度，应重新标定如未超过10度，应对浓度进行校正：N1=N0/[1+0.0011(t1-t0)]N：高氯酸的浓度t：温度0.0011：冰醋酸体积膨胀系数Pharmaceuticalanalysis33一、非水溶液滴定法（三）问题讨论：4、终点指示方法：电位法和指示剂法电位法：指示电极：玻璃电极参比电极：饱和甘汞电极指示剂：结晶紫，橙黄Ⅳ，萘酚苯甲醇，喹哪啶红，孔雀绿等注意：指示剂的终点颜色变化复杂，或滴定突跃不明显时，均需要用电位滴定法来确定。5、其他干扰：提取纯化有机碱后，再进行测定。Pharmaceuticalanalysis34一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法应用：1.游离弱碱药物测定:如吡啶类、苯并二氮杂卓类直接测定，根据碱性强弱不同选择不同的具体条件。2.HX酸盐类：如吩噻嗪类加醋酸汞3.硫酸盐类药物的测定有机碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至有机碱的硫酸氢盐。Pharmaceuticalanalysis35···2---+BH+ClO4BH+HSO4+(BH+)2SO4HClO4一、非水溶液滴定法应用：4.硝酸盐测定硝酸在冰醋酸介质中的酸性不强，滴定反应可以进行完全但是硝酸具有氧化性，可以破坏指示剂使其变色，无法指示终点。采用电位法指示终点。5.磷酸盐与有机酸盐磷酸与有机酸在冰醋酸介质中的酸性极弱，不影响滴定反应，可直接滴定。Pharmaceuticalanalysis36二、溴量法基本原理：Pharmaceuticalanalysis37HOHCOHCH2NHCH3+3Br2HOHCOHCH2NHCH3BrBrBr+3HBrBr2+2KI2KBr+I2I2+2Na2SO32NaI+Na2S4O6测定方法：取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴滴定液(0.1mol/L)50ml，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0