第二章药物的鉴别试验-PowerPoint演示文稿

药物分析甄汉深注：甄---音“真”zhen普通高等教育“十五”国家级规划教材药物分析供药学类专业用第五版刘文英主编人民卫生出社2003年7月普通高等教育“十五”国家级规划教材中药制剂分析供中药类专业用中国中医药出社2003年１月第二章药物的鉴别试验一、概述药物的鉴别试验（identificationtest）是根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物化学方法来判断药物的真伪。二、鉴别实验的项目（一）性状药物的性状（description）反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度和物理常数等。1、外观2、溶解度3、物理常数物理常数是鉴定药品质量的重要指标。其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。（二）一般鉴别试验一般鉴别试验（generalidentificationtest）是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。对无机药物是根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应；对有机药物则大都采用典型的官能团反应。1、有机氟化物2、有机酸盐3、芳香第一胺类4、托烷生物碱类5、无机金属盐6、无机酸根（三）专属鉴别试验药物的专属鉴别试验（specificidentificationtest）是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。三、鉴别方法（一）化学鉴别方法1、呈色反应鉴别法2、沉淀生成反应鉴别法3、荧光反应鉴别法4、气体生成反应鉴别法5、测定生成物的熔点（二）光谱鉴别法1、紫外光谱鉴别法2、红外光谱鉴别法红外光谱法是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。主要用于组分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。（三）色谱鉴别法1、薄层色谱鉴别法瑞士CAMAGSCANNER3薄层扫描仪岛津CS-9000双波长薄层扫描仪2、高效液相色谱鉴别法气相色谱鉴别法3、纸色谱鉴别法（四）生物学法（五）药物鉴别方法新动向1、仪器方法用于药物的鉴别数量大大增加，尤其是红外光谱法和高效液相色谱法。2、制剂广泛采用IR法鉴别。3、鉴别条目简练，选择专属的方法进行鉴别，平均每个品种收载2条左右。四、鉴别试验条件鉴别试验的目的是判断药物的真伪。（一）溶液的浓度（二）溶液的温度（三）溶液的酸碱度（四）试验的时间（五）干扰成分的存在五、鉴别试验的灵敏度（一）反应灵敏度和空白试验在一定的条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为反应的灵敏度（sensitivity）。它以两个相互有关的量，即最低检出量（minimumdetectablequantity）（又称检出限量）和最低检出浓度（minimumdetectableconcentration）（又称界限浓度）来表示。所谓空白试验，就是在供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其他试剂均同样加入而进行的试验。（二）提高反应灵敏度的方法1、加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集2、改进观测方法附一、折光率测定法定义：利用测定物质的折光率来进行定性定量的分析方法，叫折光法。折光率是用折光计来测定的，常用阿贝折光计测定。（一）折光的一般原理：光线自一种透明介质进入另一个透明介质的时候，由于两种介质密度不同，光进行的速度发生变化，所以，光线就发生如图折射：i光疏物质（）光密物质（）界面法线入射线折射线i为入射角为折射角v1为在（）中的传播速度V2为在（）中的传播速度折光的一般原理n=________=______SinⅰSinv1v2i=900c法线入射线折射线临界角阿贝折射仪的原理n=________=_______1SincSin900Sincnn=-----------------------=----------------=--------（二）、影响折光率的因素1、Tnn2、nn;3、压力（对于液体和固体影响不显著4、与溶液的浓度有关（Cn）入射角的正弦入射角的正弦vv11sinisini折射角的正弦折射角的正弦SinrSinrvv22（三）、折光计1、其准确度可达±0.00022、测定折光率的范围在1.3000~1.70003、测定用的折光计需能读数至0.0001。（四）、折光法在药物分析中的应用1、鉴别与纯度检查2、定量1）、标准曲线法2）、折光率测定法C=（n-n。）/FC药物溶液的浓渡（g/ml，%）;n一定温度下（通常为20℃）测得的折光率;n。为同温度下水的折光率;（20℃时n。=1.3330）F为折光率因素----药物溶液的浓度每增减1%时，其折光率的增减数。0n1n2n3n4n5nxc1c2c3c4c5cx折光率测定法：标准曲线法例1：KCl溶液，在于20℃时测得其折光率为1.3564，溶剂（水）在20℃的折光率为1.3330。已知KCl的折光率因素（F）为0.00117求KCl溶液的浓度。解：1.3564-1.3330C=—————————=20（g/ml，%）0.00117答：KCL溶液的浓度为20%。采用同温度溶剂的折光率来校正折光率：解：查26℃时水的折光率为1.3324。1.3460-1.3324C=______________________=10.38（%）0.00131答：碘化钾浓度为10.38%。例2：在26℃测得KI溶液的折光率为1.3460。已知：KI的F为0.00131。求其浓度。采用温度每增加1℃时，溶液折光率的差数来校正：根据实验测定的结果，一般药物的水溶液，若以20℃为标准，温度每升高1℃，其折光率较20℃时减小0.0001；每降低1℃，折光率较20℃时增加0.0001,故水溶液可用此进行校正。例如：在26℃时测得KI溶液的折光率为1.3460，已知：KI的F为0.00131,求溶液中KI的浓度。解：将26℃时的折光率换为20℃时的折光率26-20=6℃每增高1℃，折光率较20℃时减小0.0001。增高6℃时折光率减少了：0.0001×6=0.0006故20℃时折光率为1.3460+0.0006=1.34661.3466－1.3330C=________________________=10.380.00131答:KI溶液的浓度为10.38%二、旋光度测定法：具有旋光性的物质一般分为两大类：1）、具有晶格的物质。2）物质的分子具有不对称结构。（一）：旋光性与比旋光度（或称比旋度）：偏振面沿顺时针方向旋转的旋光物质,叫右旋。通常以“+”或“d”表示。沿反时针方向旋转的旋光物质叫左旋，通常以“—”或“I”表示。此种旋转在一定的条件下，有一定度数，称为“旋光度”，用符号“”表示。自然光自然光偏振光片偏振光片偏振光偏振光供试品管供试品管偏振面转偏振面转或称尼科或称尼科（含旋光性物质的溶液（含旋光性物质的溶液））过了一定过了一定尔棱镜尔棱镜的角度的角度旋光法的一般原理旋光法的一般原理（二）、影响旋光度因素1、温度[]t3、溶剂4、浓度5、液层厚度（三）、旋光法在药物分析中应用1、定性与杂质检查2、溶液的含量测定1）标准曲线法2）比旋光度法2、波长[]4455xx33221100CC11cc22cc33cc44ccxxcc55cc旋光法的定量方法-------标准曲线法例如：用2分米长测定管，在20℃时测葡萄糖注射液的旋光度为+9.80。，计算该葡萄糖注射液的浓度。解：按药典规定葡萄糖（无水品）的比旋度为[]D=52.75。（取+52.50。~53.00。）的平均值）现已知L=2dm=9.80。则：1001009.80C=————=——————=9.29（%）[]DL52.75220202020计算所得含水葡萄糖的浓度,葡萄糖注射含量是按结晶葡萄糖（C6H12O6•H2O）计算的。故下列计算结果应为：MC6H12O6•H2O198.179.29×——————=9.29×—————=10.22（%）MC6H12O6180.17即:葡萄糖注射液中含葡萄糖的含量为10.22%。直按取样测定时，本题计算也可按中国药典规定，将乘以1.0426即得供试品中每100ml含C6H12O6•H2O的克数:9.8×1.0426=10.22（%）。