第五章芳胺及芳烃胺类药物的分析

第五章芳胺及芳烃胺类药物的分析TheAnalysisofAromaticaminesandAromaticalkylamines芳胺类药物指氨基直接与苯环相连。芳胺类*:酰胺类、对氨基苯甲酸酯类苯乙胺类氨基醚衍生物芳烃胺类药物指氨基在烃基侧链上。1.结构特点：NHR1R3R4CR2O苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。第一节芳胺类药物的分析一、酰胺类代表药物有：NHCOCH3OHNHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3.HCl对乙酰氨基酚盐酸利多卡因2．性质：※利多卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）①水解后可发生重氮化反应具有酰胺结构—共性。水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。③碱性利多卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应。②与FeCl3反应具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。④紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。二、对氨基苯甲酸酯类CH2NOOR具有对氨基苯甲酸酯基本结构。具有游离的芳伯氨基。1．结构特点：代表药物有：NH2COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNH2COOCH2CH3COOCH2CH2N(CH3)2NH(CH2)3CH3.HCl盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因2．性质：①具有芳伯氨基，发生重氮化或重氮化-偶合反应②碱性具有脂烃胺侧链—碱性，能与生物碱沉淀试剂发生反应。③具有酯的结构，容易水解。④紫外吸收具有苯环结构，有紫外吸收。三、鉴别反应1、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2TS发生重氮化反应，再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。具有潜在芳伯氨基，如对乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应。※盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀。COOCH2CH2N(CH3)2NH(CH2)3CH3NaNO2H+COOCH2CH2N(CH3)2N(CH2)3CH3NO2、三氯化铁反应具有酚羟基（如对乙酰氨基酚），可与FeCl3TS作用显蓝紫色。3、与生物碱沉淀试剂反应具有烃胺侧链，与生物碱沉淀试剂反应.根据沉淀颜色或测定沉淀熔点进行鉴别。常用生物碱沉淀试剂：氯化金试液,碘试液,碘化汞钾试液,苦味酸试液等。4、与重金属离子反应CHClTSCONaCuSO3324黄色转溶于蓝紫色中利多卡因细小的亮绿色利多卡因HCoCl2(1)．与铜离子的反应(2)．与钴盐反应5．羟肟酸铁的反应NH2CONHCH2CH2N(C2H5)2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2H2O2FeCl3NH2CONOCH2CH2N(C2H5)23Fe具有酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。具有酰胺结构的药物羟肟酸羟肟酸铁6、水解产物的反应(1)．苯佐卡因的鉴别试验NH2COOC2H5+NaOHNH2COONa+C2H5OHC2H5OH+I2+NaOHCH3I+HCOONa+H2O黄色(2).盐酸普鲁卡因的鉴别试验NH2COOCH2CH2N(C2H5)2.HClNH2COOCH2CH2N(C2H5)2NaOHNaOHNH2COONa+HOCH2CH2N(C2H5)2可使湿润的红色石蕊试纸变蓝HClNH2COOHHCl白色NH2COOH.HCl三杂质检查1、对乙酰氨基酚杂质检查对乙酰氨基酚中除检查酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、炽灼残渣等一般杂质外，还需要检查：乙醇溶液的澄清度与颜色、有关物质（对氯乙酰苯胺）、对氨基酚等特殊杂质。对乙酰氨基酚以对硝基氯苯为原料合成。ClNO2水解NO2OH还原NH2OH乙酰化NHCOCH3OH(1)．乙醇溶液的澄清度与颜色对乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有颜色，则说明有杂质存在。生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色。（2）有关物质（对氯乙酰苯胺）ClNO2水解NO2OH还原NH2OH乙酰化NHCOCH3OH副反应副副反应还原乙酰化ClNHCOCH3对硝基氯苯为原料合成对乙酰氨基酚时，如发生这样的副反应就能够引入对氯乙酰苯胺。副反应ClNH2TLC法①样品液上清液离心溶解乙醚样品（对乙酰氨基酚）ml5g1②对照液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）③分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）⑥限量:%005.0%1005000,000,12005040④点样量样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l⑤判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品与对照品主斑点Rf值相同的斑点比较,不得超过其大小与颜色。(3)．对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚☆检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。OHNa2[Fe(CN)5NO]+H2NNa2[Fe(CN)5H2NOH]+H2OOH-检查方法：样品(1.0g)甲醇(12)碱性Na2[Fe(CN)5NO]放置30对照(对乙酰氨基酚对照品1.0g+对氨基酚50g)操作同样品比较限量：0.005%四、含量测定1．亚硝酸钠滴定法①原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。RCOOHNHArHOHNHCORAr22OH2NHAr]H[6NOAr22HClZn2OH2NaClCl]NAr[HCl2NaNONHAr2222②操作中的主要条件＊重氮化反应属于分子反应＊滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定＊反应速度受多种因素影响第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。Ar-NH2NOCl（慢）N|Ar-N-NO（快）Ar-N=N-OH[Ar-N2]+Cl-重氮盐（快）ⅰ．反应速度与药物结构的关系NaClHNOHClNaNO22OHNOClHClHNO22氯化亚硝酰重氮化反应机制：a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如HSO3COOH2NOXNH2..X吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。b.当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。ROR供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。ⅱ．反应速度与酸及酸度的关系a.酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是HBr＞HCl＞H2SO4OHNOBrKHBrHNO212溴化亚硝酰OHNOClKHClHNO222K1比K2大300倍用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反应速度，需加入KBr（催化剂）。KClHBrKBrHCl产生HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。b.盐酸的用量理论上:芳胺∶盐酸＝1∶1mol实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol原因：＊强酸性可加速反应＊重氮盐在酸性下稳定＊酸性下避免副反应发生。如盐酸量增加，则反应向左进行。如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。[ArN+N]Cl－+H2NArArNNNHAr+HCl如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定结果。ⅲ．反应速度与滴定时温度的关系一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下处进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。32到近终点时把滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。标准溶液在液面下加入，可避免NaNO2挥发。ⅳ．反应速度与滴定速度的关系重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度就更慢了。所以，每加一滴标准液后，要搅拌1~5分钟后再判断终点。③指示终点的方法重氮化滴定法指示终点的方法有:永停法电位法外指示剂法内指示剂法我国药典主要采用永停滴定法指示终点ⅰ．永停法原理：在被测溶液中插入两个相同铂电极，在两个电极间加10~200mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A－9/格）。当用NaNO2滴定时，在终点前回路中没有电流，电流计指针指零。当到达滴定终点时，由于溶液中有微过量的NaNO2，使得在两个电极上发生氧化还原反应阳极：OHNO2eHHNO2eHHNO2OHNO2导致在两电极间有电子流动，从而回路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。阴极：ⅱ．电位法在被测溶液中插入甘汞-铂电极，到达滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2使电位产生突跃，从而指示终点。USP采用这个方法指示终点。ⅲ．外指示剂法淀粉-KI糊剂或试纸OH2NaCl2KCl2INOHCl4KI2NaNO2222遇淀粉显蓝色原理：当达到滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉显蓝色。使用方法：滴定时，把淀粉-KI试液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上划，如果立即出现蓝色即已到滴定终点。外指示剂法的缺点：由于滴定的溶液是强酸性，KI遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。方法难掌握。ⅳ．内指示剂法内指示剂法指示终点，操作简便，但生成重氮盐一般都带有颜色，干扰指示剂颜色变化的观察，尤其是颜色很深时，更是这样。在重氮化滴定法中，内指示剂法应用不是很广泛。第二节苯乙胺类药物分析一．结构特点HOHOCHOHCH2NHR具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。如在苯环3、4位上有羟基取代，则为儿茶酚胺类药物。代表药物HOHOCHCH2NHCH3OHHOHOCHOHCH2NH2肾上腺素去甲肾上腺素二．性质：1.易被氧化邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色。3.具有旋光性具有手性碳原子，具有光学活性。2.显碱性具有烃胺侧链，显弱碱性。能与酸成盐。三．鉴别试验1.氧化反应)(222]O[IorOH棕色聚合聚合物放置肾上腺素红　肾上腺素极微红色无色同样条件下去甲肾上腺素反应速度极慢or区别肾上腺素和去甲肾上腺素。2.三氯化铁反应：在0.1mol/L盐酸中与Fe3+显翠绿色，加氨试液后，显紫色或紫红色四、肾上腺素中肾上腺酮的检查（讲过）五、含量测定（一）非水溶液滴定法（二）溴量法第三节氨基醚衍生物类药物的分析CHOCH2CH2N(CH3)2HCl盐酸苯海拉明一.代表药物1.结构2.性质①白色结晶性粉末②水中极易溶解,醇或氯仿中易溶,乙醚或苯中极微溶.③见光分解④酸性溶液中易分解.⑤紫外吸收二、鉴别1、与硫酸反应：显色2、水解反应：3、与硝酸银反应形成白色凝乳状沉淀4、紫外、红