第八章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析

一、基本结构与典型药物R1CHCHNHR2OHR3*盐酸苯乙双胍盐酸克仑特罗盐酸麻黄碱硫酸沙丁胺醇OHCHR1OHCH2NHR2*1.弱碱性：烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性。游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。2.酚羟基特性：易氧化变色，可与FeCl3反应;3.光学活性：多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光性。4.UV5.IR一、与三氯化铁、甲醛-硫酸的反应药物三氯化铁甲醛-硫酸肾上腺素翠绿色,加氨试液显紫色→紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素翠绿色,加碳酸氢钠试液显蓝色→红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红→橙红→深棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色,加新制碳酸氢钠液,显蓝紫色→红色棕色→暗紫色硫酸沙丁胺醇紫色,加新制碳酸氢钠液,显黄色浑浊加盐酸(pH=3~3.5)盐酸异丙肾上腺素盐酸去氧肾上腺素加酒石酸氢钾饱和液(pH=3.56)重酒石酸去甲肾上腺素在中性或酸性条件,红色,放置可变为棕色多聚体肾上腺素I2药物I2+Na2S2O3无色微红色淡紫色+I2Na2S2O3红棕色脂肪族伯胺的专属反应HOCHOHCHCH3NH2CH(OH)COOHCH(OH)COOH重酒石酸间羟胺水溶解亚硝基铁氰化钠试液丙酮数滴，碳酸氢钠少量△红紫色重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基四、双缩脲反应—侧链有氨基醇结构我国药典规定，利用紫外特征吸收光谱进行鉴别的药物见下表：P226用于红外吸收光谱的药物有：盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸苯乙双胍、盐酸麻黄碱、硫酸沙丁胺醇药物溶剂浓度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸间羟胺水0.10272盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸伪麻黄碱水0.50251,257,263例1：下列苯乙胺类药物中，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是A硫酸苯丙胺B盐酸甲氧明C盐酸异丙肾上腺素D盐酸克仑特罗E盐酸苯乙双胍例2：下列药物中，可显双缩脲反应的是A盐酸多巴胺B盐酸麻黄碱C苯佐卡因D对氨基苯甲酸E氧烯洛尔例3：下列药物中，可显Rimini反应的是A盐酸多巴胺B盐酸麻黄碱C苯佐卡因D对氨基苯甲酸E重酒石酸间羟胺例4：下列药物中，属于苯乙胺类药物是A盐酸利多卡因B氨甲苯酸C盐酸克仑特罗D苯佐卡因E乙酰水杨酸例5：盐酸去氧肾上腺素常用的鉴别反应有A重氮化-偶合反应B三氯化铁显色反应C双缩脲反应D氧化反应ERimini反应例6：肾上腺素可选用的鉴别方法有A重氮化-偶合反应B三氯化铁显色反应C制备衍生物测定熔点D氧化反应E氯化反应例7：下列药物中，中国药典（2010年版）采用三氯化铁反应鉴别的有A盐酸去氧肾上腺素B盐酸丁卡因C肾上腺素D盐酸普鲁卡因E盐酸多巴胺1.重酒石酸肾上腺素2.肾上腺素3.盐酸麻黄碱4.盐酸去氧肾上腺素A与甲醛-硫酸反应显玫瑰红-橙红-深棕红的变化过程B加碘试液产生明显红棕色C与亚硝基铁氰化钠反应D与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色CBDA一、酮体检查肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素等都是由相应的酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易带入酮体杂质，故这些药物均要检查酮体。OHOHCH2NHCH3COOHOHHCH2NHCH3COHH2Pd利用酮体在紫外310nm处有最大吸收，而药物本身在此波长几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体。UV法例中国药典（2010年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：取本品，加盐酸溶液（9→2000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波长处测定，吸光度不得过0.05，已知酮体在310nm波长处的百分吸收系数为453，肾上腺素在该波长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。%06.0%1001010.2110014530.05%100100%3%11WVLEAcm肾上腺酮二、光学纯度的检查P226盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇－TLC盐酸苯乙双胍-PC盐酸氨溴索－HPLC采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查检查方法：纸色谱法（PC）分离后，甲醇萃取，紫外-可见分光光度法于232nm波长处测定吸光度，控制吸光度以控制有关双胍的量供试样品制备：本品→流动相溶解（1mg/ml）对照样品制备：供试品溶液→对照溶液（0.01mg/ml）系统适用性样品：本品→甲醇溶解→加甲醛溶液→加热→吹干溶剂→用水和流动相溶解→HPLC分析（R＞4）色谱条件：RP-HPLC0.01mol/lNH4H2PO4-CH3CN(50:50);248nm分析：对照溶液主成分峰为满量程的20％~25%，记录至主成分峰保留时间的2倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。Mainpeak例：中国药典（2010年版）规定下列药物需检查特殊杂质是1.盐酸普鲁卡因2.肾上腺素A对氨基苯甲酸B酮体C对氨基酚D间氨基酚E酮胺AB原料：非水溶液滴定法、溴量法制剂：提取酸碱滴定法、高效液相色谱法、紫外分光光度法一、非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性弱碱类药物及其盐的含量测定1.基本原理当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸2.Ch.P.(2010)：尽量避免使用醋酸汞,通过选用酸度较强溶剂方法替代.一般采用半微量法。中国药典（2010年版）的第一法：精密称取供试品适量〔约消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）8ml〕，加冰醋酸10～30ml使溶解，加各品种项下规定的试液（醋酐或醋酸汞试液）指示液1～2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定。终点颜色以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定的结果用空白试验校正。(1)适用范围Kb﹤10-8的有机碱盐Kb为10-8~10-10选冰醋酸作溶剂Kb为10-10~10-12选冰醋酸和醋酐作溶剂Kb﹤10-12选醋酐作溶剂3.(2)酸根的影响HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3＊水中酸强度相等。＊HAc中酸强度不相同.HClO4＞HBr＞H2SO4＞HCl＞HNO3＞其它弱酸加HgAcHgX2硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可直接滴定。在冰醋酸中酸性不强，可直接滴定。因氧化指示剂，用电位法指示终点。无需处理，直接滴定。(3)滴定剂的稳定性◆水的膨胀系数是0.21×10-3/C◆冰HAc膨胀系数是1.1×10-3/C，较大，体积随温度变化较大，且还具有挥发性。测定样品与标定标准溶液时温度不同，应对浓度进行校正。超过10C时，则应重新标定。)(0011.01010TTCC常用电位法和指示剂法。Ch.P.收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。(4)终点指示方法(1)加醋酸汞试液的目的是消除盐酸的干扰。(2)在冰醋酸中加入适量的醋酐,目的是增加丁卡因的碱性,使滴定突跃明显。(3).为了消除非水滴定的误差,滴定结果用空白试验校正。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O++CH3COO-［B]HCl+Hg(Ac)2[B]HAc+HgCl2[B]HAc+HClO4[B]HClO4+HAc(4)非水滴定法属于半微量法。盐酸麻黄碱Ch.P.（2010）取本品约0.15g，精密称定，加冰醋酸10ml温热溶解，加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至翠绿色，并将滴定结果用空白试验校正HAClOBHABH4HClO4CCCH3OHNHCH3HH空样高氯酸滴定液冰醋酸空白样品VV测定方法（约8ml）半微量法溶剂冰醋酸滴定剂高氯酸(0.1mol/L)指示终点的方法电位法指示剂法本类药物的原料药多采用此法。1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定相当于［B］的有机酸盐可直接滴定。2.盐酸盐：如盐酸多巴酚丁胺、盐酸苯乙双胍、盐酸甲氧明相当于［B］的HX酸盐，需通过选用酸度较强的溶剂或加入醋酸汞试液后滴定。3.硫酸沙丁醇的测定相当于［B］的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。测定注意：加冰醋酸溶解样品后，应放冷的条件下再加入醋酐。注意滴定度。盐酸去氧肾上腺素及其注射液采用溴量法测定含量HOCHCH2NHCH3OH定量过量2Br3HOCHCH2NHCH3OHBrBrBrHBr3KBr2IKI2Br22剩余6423222OSNaNaI2OSNa2Iml/mg395.3667.2031.0ncMT计量取本品约0.1g,精密称定,置碘量瓶中,加水20ml使溶解,精密加溴滴定液(0.05mol/L)50ml,再加盐酸5ml,立即密塞,放置15min并振摇,注意微开瓶塞,加碘化钾试液10ml,立即密塞,振摇后,用硫代硫酸钠液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失,并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相当于3.395mg的C9H12NO2.HCl%100W395.31.0C)VV(0含量三、紫外分光光度法及比色法（一）紫外分光光度法盐酸甲氧明注射液精密量取本品适量（约相当于盐酸甲氧明100mg），置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在290nm的波长处测定吸光度，按C11H17NO3•HCL的吸收系数为137计算，即得。%11cmE三、紫外分光光度法及比色法（二）比色法盐酸克仑特罗栓具芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应AnmN测定盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓乙二胺萘基）（、盐酸三氯甲烷500max1HNaNO2对照法定量偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）-乙二胺。取本品20粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于盐酸克仑特罗0.36mg），置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷20ml使溶解，用盐酸溶液（9→100）振摇提取3次（20ml、15ml、10ml），分取酸提取液，置50ml量瓶中，用盐酸溶液（9→100）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（9→100）溶解并定量稀释制成每1ml中含7.2g的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml，分别置25ml量瓶中，各加盐酸溶液（9→100）5ml与0.1%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置3分钟，各加0.5%氨基磺酸铵溶液1ml，摇匀，时时振摇10分钟，再各加0.1%盐酸萘乙二胺溶液1ml，摇匀，放置10分钟，用盐酸溶液（9→100）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光光度法（附录IVA），在500nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得。四、HPLC盐酸异丙肾上腺素离子对反相高效液相色谱法外标法定量调节溶液pH为3.0±0.1，加入离子对试剂庚烷磺酸钠色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠1.76g，加水800ml使溶解）-甲醇（80∶20），用1mol/L磷酸溶液调节pH值至3.0为流动相；检测波长为280nm。取重酒石酸肾上腺素对照品适量，加含1%焦亚硫酸钠的流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg的溶液作为溶液（1），取盐酸异丙肾上腺素对照品适量，加0.1%焦亚硫酸钠溶液溶解并稀释制成每1ml中含0.02mg的溶液作为溶液（2），取溶液（1）1ml与溶液（2）18ml，混匀，作为系统适用性试验溶