第六章芳酸类药物的分析

第六章RCOOH羧酸COOH芳酸苯甲酸类苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONa常见的芳酸及其酯类药物CH2H2NCOOH氨甲苯酸HOCOOC2H5羟苯乙酯COOHSO2(CH3CH2CH2)2N丙磺舒（pKa3.4）NH(CH2)3CH3H2NO2SCOOHO布美他尼常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类COOHOH水杨酸（pKa2.98）COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COONaOHNH2对氨基水杨酸钠双水杨酯?COOHOOOH贝诺酯OCOCH3COONHCOCH3其他芳酸类药物ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯第一节结构与性质一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐共同点：苯环、羧基不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）二、性质（一）物理性质（1）固体具有一定的熔点（2）溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。（二）化学性质1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸；—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强2.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。3.UV4.IR5.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。6.色谱法—制剂分析第二节鉴别试验一、FeCl3反应具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物紫堇色铁配位化合物～6pH43FeClOHArOHR直接：水杨酸、双水杨酸酯、对氨基水杨酸钠其分子结构中均具有酚羟基，在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液作用，生成紫堇色的配位化合物，可供鉴别。间接：阿司匹林、贝诺酯其分子结构中均无游离酚羟基，与三氯化铁试液不发生显色反应。但其水溶液加热，或较长时间放置，或加少量碱，由于部分水解产生具有酚羟基的水杨酸，也可与三氯化铁试液作用。•阿司匹林ChP（2010）•[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。•苯甲酸的碱性水溶液或苯甲酸钠的中性溶液，与三氯化铁试液作用生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。米黄色钠盐丙磺舒～30.60.5FeClpHNaOH二、重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄～猩红色萘酚OH-NH2R直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯三、水解反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸CONa32阿司匹林分子结构中具有酯键，与碳酸钠试液共热，水解生成水杨酸钠和醋酸钠，放冷后用稀硫酸酸化，析出白色的水杨酸沉淀，并产生醋酸的臭气，可供鉴别。可溶于醋酸铵（测定熔点），水杨酸白色双水杨酯稀盐酸NaOH•氯贝丁酯分子结构中具有酯键，在碱性溶液中可与盐酸羟胺作用生成异羟肟酸盐，在弱酸性条件下与三氯化铁试液作用生成紫色的异羟肟酸铁，可供鉴别。•羟苯乙酯的乙醇液煮沸后加硝酸汞，生成沉淀，上清液呈红色。1.分解产物的反应苯甲酸钠可分解生成苯甲酸，苯甲酸具有升华性，可供鉴别。如将苯甲酸钠置于干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，随即在试管内壁上端凝结成白色升华物。苯甲酸苯甲酸钠42SOH四、特殊反应24HNO32SOSONaNaOH3丙磺舒2.氧化反应含硫的药物3.异羟肟酸铁反应紫色异羟肟酸铁异羟肟酸盐氯贝丁酯弱酸性盐酸羟胺3NaOHFeCl六、IR五、UV第三节特殊杂质检查一、阿司匹林中水杨酸的检查1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）阿司匹林中游离水杨酸的检查①杂质来源a.生产过程中反应不完全OHCOOH(CH3CO)2OH++COOHOCOCH3b.贮存过程中阿司匹林水解COOHOCOCH3H2O+OHCOOHCH3COOH+紫堇色（有酚羟基）②检查原理阿司匹林+Fe3+×（无酚羟基）水杨酸+Fe3+2.检查方法对照法反应原理水杨酸与高铁盐反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查1.杂质来源原料残存、脱羧产生2.检查方法ChP（2010）含量测定法（双相滴定法）。利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚杂质限量。三、羟苯乙酯中有关物质的检查BP（2011）反相TLC四、甲芬那酸中特殊杂质的检查铜盐有关物质五、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查GC第四节含量测定一、酸碱滴定法1.直接滴定法pKa3～6终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolS阿司匹林ChP（2010）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后,加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O滴定度（T）：指每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。dDcCbBaA(mg/ml)MabCTB滴定度的计算：被测药物（B）与滴定液（A）之间按一定的摩尔比进行反应：（1）测定方法及计算反应摩尔比为1∶1（2）讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言。②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（局部碱性过大，不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定例称取阿司匹林供试品0.3955g，溶于中性乙醇，用酚酞为指示剂，以氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）滴定到终点时，消耗氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）21.56ml，每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。计算阿司匹林的百分含量。99.7%%10010003955.01.01015.056.2102.18%100%WTVF含量2.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林USP（33）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的硫酸滴定液（0.25mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰原料药含量测定结果的计算A、直接滴定法%100%WFTV含量B、剩余滴定法T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数V——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml）V0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml）F——浓度校正因子w——供试品的质量标准实测ccF%100)V%0WFTV（含量3.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片氯贝丁酯如阿司匹林片的测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O第二步水解后剩余滴定水解：COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）©2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O优点:本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰剩余滴定：片剂含量测定结果的计算%100/%100%片）标示量（）平均片重（）供试品重（）测得量（标示量每片含量标示量gggg剩余滴定法%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT例取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法测定。供试品消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）23.84ml，空白试验消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）39.88ml。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。求此片剂的标示量%。%4.99%1003.0105840.310003484.005.005015.0)84.2388.39(02.18%100%0标示量）（标示量WWFVVT二、亚硝酸钠滴定法具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物Cl-+22+2+++ArNH2NaNO2HClArNNNaClH2O例:对氨基水杨酸钠三.双相滴定法芳酸碱金属盐如苯甲酸钠ChP(2010)COONa+HClCOOH+NaCl水—乙醚溶剂：水——乙醚取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰四、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法丙磺舒片Ch.P（2010）取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200ml量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。%11cmE片剂，紫外分光光度法的吸收系数法%100100%%11标示量标示量WWVDLEAcm例.VitB1片UV法含量测定：取本品20片(规格10mg/片)，精密称得重量1.4070g，研细，精密称取0.1551g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，在246nm