第五章消毒与灭菌第一节卫生消毒的基本概念第二节物理消毒与灭菌第三节化学消毒灭菌法第四节影响消毒灭菌的因素大纲要求:掌握消毒与灭菌的基本概念熟悉特殊环境条件下消毒的概念熟悉物理及化学消毒与灭菌方法熟悉影响消毒与灭菌效果的因素了解消毒剂的污染问题及消毒剂杀菌效果的改进熟悉常用消毒剂的作用机制第一节消毒灭菌基本概念1.消毒:指杀灭或清除传播媒介上病原微生物,但不包括芽胞。用以消毒的化学药物称为消毒剂。2.灭菌:是指杀灭或清除传播媒介上一切微生物。灭菌保证水平SAL灭菌处理后单位产品上存活微生物的概率。一般为10-63.无菌:是指不存在任何活微生物。4.无菌操作:指在无菌状态下的操作。5.防腐:是指防止或抑制病原微生物或其他有害微生物生长繁殖,以防止其腐败的处理。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂,低浓度为防腐剂。6.抗菌指杀灭或阻止微生物生长繁殖及其活性的过程。7.抑菌用物理或化学方法抑制或妨碍细菌生长繁殖及其活性的过程。一些特殊的的消毒概念1.医院消毒:是指杀灭或清除医院环境中和物体上污染的病原微生物的过程。2.疫源地消毒:是指对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒。3.随时消毒:是指有传染源存在时对其所处环境及时进行的消毒。4.终末消毒:是指传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。5.预防性消毒:对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行的消毒。6.工业消毒:在工业生产中防止产品染菌所进行的消毒。7.生物消毒:利用某种生物来杀灭或清除病原微生物的方法称为生物消毒法。如粪便和垃圾的发酵,利用嗜热细菌繁殖产生的热量杀灭病原微生物。第二节物理消毒灭菌法消毒、灭菌的方法一般可分为:热力灭菌法辐射杀菌法物理学方法滤过除菌法超声波杀菌法干燥和低温抑菌法等化学方法一热力灭菌法分类:干热和湿热灭菌法两类1.干热灭菌法A焚烧:B烧灼:C干烤:D红外线:2.湿热灭菌法A巴氏消毒法:61.1-62.8℃经30min,或71.7℃经15-30秒钟,常用于消毒牛乳和酒类等B煮沸法:水温100℃经5min能杀死一般细菌的繁殖体。芽胞要煮沸1-2h。C流通蒸气法:10O℃,蒸15-30min,可杀死细菌的繁殖体,但不能杀死芽胞D间歇灭菌法:10O℃蒸15-30min,或75-80℃30-60min,每日一次,连续三日,也可达到灭菌的目的E高压蒸气灭菌法:是最有效的灭菌法。通常在1.05kg/cm2锅内温度可达121.3℃,维持15-30min,即可达灭菌目的.115℃,25min,132℃,4min。湿热与干热灭菌效果的比较热型温度(℃)时间布层内的温度(℃)灭菌效果(h)20层40层100层湿热90-105.33101101101.5完全干热130-1404867270.5不完全湿热比干热灭菌好的原因:1细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固、变性2湿热穿透力强3湿热蒸气有潜热存在,水蒸汽凝固成水,释放潜热,迅速提高被灭菌物体的温度。干热灭菌160℃需1小时,湿热121℃仅需15分钟。二、辐射杀菌法1紫外线:机理:其波长在200-280nm有杀菌作用,其中以240-280nm最强,这与细菌DNA吸收光谱一致。细菌DNA吸收紫外线后,使一条DNA链上两个相邻胸腺嘧啶共价结合成二聚体,改变了DNA的分子构型,干扰了DNA的复制和转录,导致细菌变异或死亡作用:用于不耐热物体表面和空气消毒。对人体皮肤、眼睛有损伤作用,使用时应注意防护2电离辐射:包括X射线和γ射线机制:这些射线可将原子或分子放出电子变成离子。如水分子电离可产生H+和OH-,这些离子有很强的还原与氧化作用,能直接杀伤细菌;也可与液体中的氧分子结合形成H2O2,从而使细菌损伤或死亡用途:一次性塑料制品消毒;食品消毒,不破坏营养成分三、滤过除菌法机制:是用滤菌器机械过滤的方法将液体中或空气中的细菌除去作用:主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液以及空气的除菌。如:生物安全柜中使用的高效过滤器,过滤效果达99.9%。四、超声波杀菌法超声波:是不被人耳感受高于20千周/秒的声波作用:可裂解多细菌,尤其对G+更敏感目前主要用于粉碎细胞,提取细胞组分或制备抗原等五、干燥与低温抑菌法作用:干燥法常用于保存食物,浓盐或糖渍食品可使细菌脱水,造成生理干燥,使细菌生命活动停止。低温可使细菌新陈代谢减慢,故常用于保存细菌菌种。六、等离子体与脉动强光等离子体等离子体为物质的第四态,由气体电离产生,含离子、电子和未经电离的中性粒子组成,对微生物有良好的杀菌作用。脉动强光强光脉冲波消毒技术是用相当于地面日光2万倍强度的白色光线作短暂的脉冲式照射,以达到消毒目的。第三节化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法利用化学消毒药物杀灭病原微生物的方法。化学消毒剂用于消毒的化学药物。化学消毒剂从状态上可分为液体消毒剂、固体消毒剂和气体消毒剂三大类,从杀菌作用可分为三种:1、高效消毒剂是指能杀灭各种细菌、真菌及病毒,包括细菌芽孢的消毒剂,故称灭菌剂。常用的高效消毒剂有过氧化物类(过氧乙酸、过氧化氢、臭氧等)、醛类(甲醛、戊二醛)、环氧乙烷、含氯消毒剂(有机氯类、无机氯类)等。2、中效消毒剂是指能杀灭细菌繁殖体、真菌和病毒,但不能杀灭细菌芽孢的消毒剂,如乙醇、酚类等。3、低效消毒剂指只能杀灭部分细菌繁殖体、真菌和病毒,不能杀灭结核杆菌、细菌芽孢和抗力较强的真菌和病毒的消毒剂,如新洁尔灭、洗必泰等。化学消毒与灭菌法:定义:是用化学药品进行消毒的方法。作用机制;①使菌体蛋白质变性或凝固,②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性,导致细菌死亡。理想的消毒剂应具备的条件:杀菌普广、有效浓度低、作用速度快、性质稳定、易溶于水、无色无臭、消毒后易除去、毒性低、无刺激、无致突变、无致癌作用、不易受有机物、酸、碱与其他物理或化学因素影响,对物品无腐蚀;不易燃烧爆炸,使用安全,价格低廉,便于运输,可大量供应。一.消毒剂的主要种类、浓度及用途1酚类:作用:高浓度使菌体蛋白凝固,低浓度破坏细菌的细胞膜,使胞质内容物渗出浓度:石炭酸为2%-5%、来苏为2%用途:地面、器具表面和皮肤的消毒2醇类:常用乙醇和异丙醇作用机制:损伤细胞膜,使菌体蛋白变性,灭活酶类浓度:乙醇70%-75%用途:主要用于皮肤的消毒、外科洗手和器械(体温计)等的浸泡3重金属盐类:作用机制:(1)使细菌发生变性和沉淀(2)使细菌的酶活性丧失种类、浓度与用途:(1)1%硝酸银新生儿滴眼,预防淋球菌感染(2)2%红汞用于皮肤、粘膜和小创伤的消毒(3)0.05-0.01%升汞,非金属器皿的消毒4氧化剂:机制:(1)靠氧化作用,灭活酶类(2)使蛋白质变性种类和用途:(1)0.1%高锰酸钾,皮肤、尿道、水果等(2)3%过氧化氢,创伤、皮肤粘膜消毒(3)2%-2.5%碘酒,皮肤消毒(4)0.2ppm-0.5ppm氯,饮水和游泳池消毒(5)10%-20%漂白粉,地面、厕所与排泄物消毒5表面活性剂:机制:(1)损伤细胞(2)灭活酶类(3)蛋白质沉淀种类和用途:(1)0.05%-0.1%新洁尔灭,皮肤粘膜消毒、浸泡手术器械(2)0.05%-0.1%杜灭芬,伤口冲洗,金属器械、塑料、橡皮类消毒6烷化剂(醛类)机制:使菌体蛋白和核酸的烷基化种类、浓度及作用:(1)10%甲醛,物品表面、空气消毒(2)2%戊二醛,精密仪器、内窥镜等消毒缺点:对人体有一定的毒性,且有的有致癌作用,如β-内脂7.气体消毒剂指在使用时为气体状态的消毒剂种类:环氧乙烷、甲醛、臭氧、过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯等。环氧乙烷是目前使用最多的低温灭菌剂。用途:不宜用一般方法灭菌的物品均可。但不能用于食品消毒。注意:环氧乙烷易燃易爆,必须在密闭的环氧乙烷灭菌器内进行消毒。对人有一定毒性。二消毒剂的应用1病人的排泄物:等量的20%漂白粉5%石炭酸或2%来苏、搅拌均匀,作用2小时2皮肤:2.5%碘酒、70%酒精、2%红汞3粘膜:1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等4饮水:氯气、漂白粉5厕所:生石灰6空气:甲醛熏蒸7手:2%来苏、2%碘酊、70%酒精第四节影响消毒灭菌的因素消毒剂的性质、浓度与作用时间使用消毒剂的浓度应按所含主要杀菌成分的浓度计算,不能以商品原药作为100%计算稀释浓度。微生物的种类与数量温度一般温度越高消毒效果越好湿度空气的相对湿度(RH%)对气体消毒剂影响显著。酸碱度如戊二醛在碱性条件下可提高杀菌能力,但易聚合。含氯消毒剂最适杀菌PH6-8,<4易分解。季铵盐类最适杀菌PH9-10,对甲醛影响不大。化学拮抗物质如蛋白质、油脂类有机物,氯消毒剂、季铵盐类受有机物影响较大。穿透力物理因子电离辐射、微波、湿热穿透力强;紫外线弱;化学因子环氧乙烷、戊二醛穿透力强,甲醛气体弱。