分光光度.ppt

分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定铁邻二氮菲吸光光度法测定铁一、实验目的二、实验原理三、试剂及仪器四、实验步骤五、注意事项六、数据处理一、实验目的掌握吸光光度法中确定最大吸收波长的方法。掌握采用分光光度计进行定量分析的实验技术。了解分光光度计（722N型）的构造和使用方法。实验原理朗伯—比耳定律：bcACu2+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Hg2+、Mn2+、Zn2+等离子也能与phen生成稳定配合物，在少量情况下，不影响Fe2+的测定，量大时可用EDTA掩蔽或预先分离。二、实验原理在pH2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的橘红色配合物Fe(phen)32+pH=5显色，max＝508nm，＝1.1×104Lmol-1cm-1Fe+3Fe)2+3(NNNN2+2Cl4HO2HN2FeHClOH2NH2Fe22223实验原理光度计的主要部件：光源单色器检测系统吸收池、显示装置光源单色器比色皿光电元件显示装置三、试剂及仪器试剂：10g·mL-1铁标准溶液0.15％邻二氮菲10％盐酸羟胺溶液1molL-1HAc－NaAc未知浓度铁试液722N型分光光度计仪器仪器容量瓶吸量管容量瓶移液管722N分光光度计的使用722N型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。它以碘钨灯为光源，光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm，波长精度2nm，吸光度显示范围为0~1.999，试样架可置四个吸收池。开机安装好仪器后，检查样池位置，使其处在光路中（拉动拉手应感应到每档的定位），关好样品室门，打开仪器电源开关，预热10分钟，即可进行测量。打开样品室门，将方式定于透光率档，按0%T进行机械调零。比色皿从蒸馏水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿中注入溶液向比色皿内注入少量试液，润洗三次，然后注入3/4至4/5的试液，用滤纸片擦干外壁所挂水珠。将比色皿按顺序放入样品池。注意光面对光源。吸光度测量在样品池中放置空白液与样品。按需要调节波长旋钮，使显示窗显示所需波长。使空白溶液位于光路中，按方式选择键使透光率指示灯亮，按100%T键调100%，至窗口显示100%。吸光度测量打开样品室门，观察显示是否为0.0，否则按0%T键调零。重复上两步，直至仪器稳定。将样品置入光路，放到吸光度档，从显示屏上读取吸光度。四、实验步骤标准系列溶液及未知溶液的配制：在7个50mL容量瓶中，用吸量管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL10g·mL-1铁标准溶液,10.0mL铁试液，再分别加入1mL盐酸羟胺，2mLphen溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，每加入一种试剂后都要摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min。实验步骤吸收曲线的制作和测量波长的选择：取标准系列中4号瓶溶液（即6.0mL铁标液），用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标液）为参比溶液，在440～560nm之间，每隔2～10nm测一次吸光度。以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与关系的吸收曲线。选择测定Fe的最大吸收波长。14实验步骤标准曲线的制作：用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在所选择的波长下，依次测量各标准系列溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。123456实验步骤试液中铁含量的测定：同样条件下测量未知试液吸光度。从标准曲线上查出并换算原试液中铁的含量(g·mL-1)。17五、注意事项每加入一种试剂均需将溶液摇匀；注意勿将标准试剂玷污；标准系列的次序不能搞混；改变波长后，光度计应重新调100%；仪器开盖预热。六、数据处理测量波长的选择：/nm440450460470480490495500502504A/nm506508510512514520530540550560A数据处理吸收光谱图的绘制：最大吸收波长/nmA0max数据处理标准系列及未知液的测定：编号234567A数据处理标准曲线的绘制及试液中铁含量的测定：AgmL-10Axcx下次实验过氧化氢含量的测定