药物分析第三章

第三章药物的杂质检查杂质指存在于药物中的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。总结来说，杂质就是：1.有毒副作用的物质2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质简言之:任何影响药品纯度的物质。第一节药物中杂质的来源及其种类一、杂质的来源（一）药物纯度的概念药物的纯度即药物的纯净程度，是反映药品质量的一项重要指标。含有杂质是影响药物纯度的主要因素。因此纯度检查通常又称为杂质检查。注意：药物纯度与化学纯度的区别化学试剂纯度不考虑生理作用，杂质限量只是从可能引起化学变化对使用影响来限定。药物纯度从用药安全、有效和药物稳定性的影响考虑。比如：BaSO4（可溶性钡盐检项）药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯等。二、药物杂质的来源1.生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物（2）试剂、溶剂、催化剂类（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质(C6H10O5)x+H2OH+(C6H10O5)yC12H22O112C6H12O6H2O,H+淀粉糊精麦芽糖葡萄糖葡萄糖制备过程中产生杂质酸度：水解试剂带入乙醇中不溶物：水解中间体(糊精)SO32-：产品用H2SO3漂白可溶性淀粉：水解不完全2.贮藏过程中产生水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等贮藏过程中产生外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引起药物产生例如：麻醉乙醚醛及有毒的过氧化物O1、在药物生产过程中引入杂质的途径为（ABCD）A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质二、杂质的分类（一）、按性质分类1.影响药物稳定性的杂质如：金属离子会催化氧化还原反应2.毒性杂质如药物中含有重金属和砷盐的过量存在3.信号杂质本身一般无害，但其含量的多少可以反应出药物的纯度水平，因此称其为“信号杂质”。如氯化物、硫酸盐的等属于信号杂质。（二）.按来源分类1.一般杂质一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。2.特殊杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。如：阿司匹林中的水杨酸、甲硝唑中的2-甲基-5-硝基咪唑等。注意：药典中各药物品种项下规定的杂质检查项目，是指正常生产和贮存中可能产生并需控制的杂质。药典中未规定检查的杂质，一般有以下几种情况：—在正常生产和贮藏过程中不可能引入；—含量甚微或临床限量允许较宽，对人体和药物质量无不良影响；—有些药物中可能含有某些杂质，对其认识尚不够，有待积累资料，也可暂缓订入检查项下。凡药典未规定检查的杂质，一般不需要检查，但遇特殊情况如检验某药物时发现性状和反应不正常，应根据需要进一步追踪、检查。若药厂在生产上改变了原料或方法，也应根据实际情况检查其他可能引入的杂质。三、药物的杂质检查方法杂质的限量是指药物中所含杂质的最大允许量称为杂质限量。通常用百分之几（%）或百万分之几（ppm10-6）来表示。允许杂质存在的最大量杂质限量=—————————×100%供试品量（一）对照法当供试品（S）中所含杂质的量是通过与一定量杂质标准溶液进行比较来确定时，杂质的最大允许量可由杂质标准溶液的浓度（C）与体积（V）的乘积获得，上式又可以表达为：标准溶液的浓度×标准溶液的体积杂质限量=—————————————×100%供试品量或C×VL=————×100%S该法应该注意平行原则，即供试溶液和对照溶液应在完全相同的条件下反应。如加入的试剂、反应的温度、放置的时间均应相等，这样的结果才有可比性。注意①单位一致②稀释倍数③表示方法（%，ppm）应用示例一对乙酰氨基酚中氯化物检查取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml时，加热溶解后冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查氯化物（中国药典，附录ⅤⅢA），所发生的浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml（10μg/mlCl）制成的对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少?解：C×V10×10-6×5.0L=——×100%=——————×100%S2.0×25/100=0.01%应用示例二磷酸可待因中吗啡检查取本品0.10g，加盐酸溶液（9→1000）使溶解成5ml，加亚硝酸钠试液2ml，放置15分钟，加氨试液3ml，所显颜色与吗啡溶液[取无水吗啡2.0mg加盐酸溶液（9→1000）使溶解100ml]5.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量为多少?解：C×V2.0/100×5.0L=——×100%=——————×100%S0.10×103=0.1%应用示例三葡萄糖中重金属检查取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，依法检查重金属（中国药典附录ⅤⅢH），含重金属不得过百万分之五。取标准铅溶液多少ml?（每1ml相当于10μg的Pb）解：L×S5×10-6×4.0V=————=——————=2.0mlC10×10-6习题1：检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为（B）A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10gg0.2%100%0001.01012%1006LcVS已知：c＝1g/ml＝1×106g/mlV＝2mlL＝0.0001%习题2：检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？（D）•0.2mlB.0.4ml•C．2mlD.1mlE.20mlml110100.1101066cSLV（二）灵敏度法在供试品溶液中加入试剂，在一定条件下反应，以不出现正反应为合格。如：纯化水中检查氯化物，是在50ml水中加入硝酸与硝酸银试液，不得发生浑浊。特点：不需要对照品（三）比较法主要是含量测定，测定杂质的绝对含量，如测定吸收度，pH值等。使用此方法时，须注意平行原则。即供试品和标准溶液应在完全相同的条件下反应，所加入的试剂、反应的温度、放置的时间等均应相同。只有这样，反应的结果才有可比性。特点：准确测定杂质的含量。第二节一般杂质检查法掌握：一般杂质检查规则《药品检验标准操作规范》规定：1.遵循平行的原则①仪器的配对性如纳氏比色管应配对（如颜色、长度），刻度线高度相差不超过2mm；砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致。②对照品和供试品要同步操作2.正确的取样及供试品的称量范围≤1g时不得超过±2%，＞1g时不超过±1%。3.正确的比色、比浊法。4.检查结果如果不符合规定或者在限度边缘时应对供试品管和对照品管各再进行复检二次。1.氯化物的检查（对照法）（1）原理利用氯化物在硝酸银酸性溶液中与硝酸银试液发生作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯化银浑浊液比较，浑浊的度不得更大。HNO3药物：Cl-+AgNO3—→AgCl↓（白色混浊）HNO3对照品：NaCl+AgNO3—→AgCl↓（白色混浊）)(AgClAgNOCl3HNO3白色混浊供试品稀HNO310mlH2OAgNO31ml标准溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml暗处放置5min(避免AgCl分解)（3）注意事项1.标准氯化钠溶液应为临用前配制，浓度为10ug/ml的Cl-，氯化物浓度以50ml中含50μg～80μg的Cl-（相当于标准氯化钠溶液5.0ml～8.0ml）2.硝酸加入避免杂质干扰检查，（除去CO2+3、SO2-4、C2O4-2、PO3-4的干扰），加速氯化银的形成，以50ml中含有稀硝酸10ml为宜。（1）加速AgCl浑浊的形成（2）产生较好乳浊的形成（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成3.供试液和对照液生成的是白色浑浊而不是白色沉淀。4.避光暗处放置5分钟，因为氯化银见光易分解。5.比浊的方法是置黑色背景下，自上而下观察。6.温度的影响：30～40℃产生浊度最大且恒定，但作为浊度检查，供试品和对照品可在室温下平行操作。7.供试品如带颜色，通常采用消色法处理。（1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。（2）内消色法：倍量法8.其它干扰物质存在时，必须在检查前除去（1）有机药物的氯化物检查：溶于水的，直接检查；不溶于水的，多数采用加水振摇，使氯化物溶解，滤除不溶物或加热溶解，放冷析出沉淀，滤过，取滤液检查。（2）检查有机氯，进行有机破坏，使有机氯转变为无机氯化物后检查。（3）检查碘化物或溴化物中的氯化物时，选择适当方法去除干扰后再检查。习题1：药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（B）A.硫酸B.硝酸C.盐酸D.醋酸E.磷酸2.采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化银浑浊反应B．消除某些弱酸盐的干扰C．消除碳酸盐干扰D．消除磷酸盐干扰E．避免氧化银沉淀生成3.检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10µgCl－/ml）5～8ml的原因是（D）A.使检查反应完全B.药物中含氯化物的量均在此范围C.加速反应D.所产生的浊度梯度明显E.避免干扰4.当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（AB）A．内消色法B．外消色法C．比色法D．差示比浊法E．差示可见分光法5.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（ABC）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察二、硫酸盐检查法（对照品法）（1）原理硫酸盐与氯化钡在HCl酸性溶液中，生成硫酸钡沉淀，与一定量的标准硫酸钾溶液在同样条件下生成的浑浊比较，浊度不得更大。HCl药物：SO2-4+Ba2+—→BaSO4↓（白色浑浊）HCl对照：K2SO4+BaCl2—→BaSO4↓（白色浑浊）（2）测定条件1.标准硫酸钾浓度为100ug/ml的SO2-4，适宜比浊的浓度范围为每50ml溶液中含0.1mg～0.5mg的SO2-4。2.反应应在酸性条件下进行，且以50ml供试液含稀盐酸2ml为宜。3.供试液和对照液生成的是白色浑浊而不是白色沉淀。4.比浊的方法是置黑色背景下，自上而下观察。（三）讨论1.盐酸的加入避免碳酸钡、磷酸钡沉淀生成，以50ml含盐酸2ml，pH约为1为宜。2.供试溶液不澄清，用含盐酸的水洗涤滤纸中的硫酸盐后，过滤，如供试品有色，处理方法同氯化物检查法。习题：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（D）A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液E.以上都不对三、铁盐检查法（一）原理硫氰酸盐法（对照法）Fe3++[6SCN-]→Fe（SCN）3-6（红色）利用铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁络合离子，与一定量的标准铁溶液在同样条件下生成红色进行比较。（二）操作方法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml,移置于50ml纳氏比色管，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，加水稀释至约35ml后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量使成50ml，如显色，立即与标准铁溶液一定量按相同方法制成的对照溶液比较。（三）讨论1.标准铁溶液的要求。标准铁溶液每1ml相当于10μg的Fe3+。比色时以50ml溶液中含10μg～50μgFe3+为宜。2.加入过量的硫氰酸铵的作用，为氧化剂，氧化供试品中的Fe2+为Fe3