药物对离体豚鼠回肠收缩的作用

药物对离体豚鼠回肠收缩的作用浙江大学医学院生理教研室张雄目的学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。观察药物acetylcholine(Ach、乙酰胆碱），histamine(His、组胺），BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）为工具药，初步分析以上药物的作用原理。原理（1）胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论：Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。原理（2）乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。原理（2）组胺：激动平滑肌细胞膜H1受体，通过激活G蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，导致平滑肌收缩。扑尔敏：H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。原理（3）氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆[Ba2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体，使平滑肌收缩幅度增高。材料豚鼠1只：WT为300g左右麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。台氏液，10-2g/L乙酰胆碱、1g/L硫酸阿托品、10-2g/L组胺，10-3g/L扑尔敏、10g/LBaCl2溶液。方法1.实验装置准备：打开恒温水浴37℃---加台氏液于麦氏浴槽中---95%O2+5%CO2持续通气（气泡一个个逸出为宜）。2.标本准备：击昏豚鼠---开腹---减取回肠---冲洗内腔---截取肠段---肠段两端对角穿线---固定于麦氏浴槽和换能器上。3.实验记录：打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）---零点设置---调节换能器张力2g---稳定10-30分钟（基线和收缩幅度稳定）•找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净，将回肠剪成1-1.5cm的几小段。标本准备（1）标本准备（2）取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。换能器肠管观察项目记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。加入10-2g/LAch0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1g/L阿托品0.2ml，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的Ach，观察并记录收缩曲线，换液。加入10-2g/L组胺0.3ml，作用明显时迅速换液。预先加入10-2g/L扑尔敏0.2ml，5min后（不换液）加入同量组胺，观察并记录收缩曲线，换液。加入10g/LBaCl2溶液1ml，当作用达到最高点，加入1g/L阿托品0.2ml，观察并记录收缩曲线。实验结果Ach换液Ach阿Ach换液His换液扑HisBacl2阿(每次换液后稳定15min)稳定20min注意事项注意保持肠管通畅，勿使其封闭。不要把药物直接滴加到回肠上。每次加的台氏液量保持相等。加的台氏液量必须预先加热到37℃。药物作用明显后，尽早冲洗。每次换液后稳定10－20min。实验结果（1）曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时间点。对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入表格。实验结果（2）表3.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响组别标本数基础张力（g）收缩幅度（g）乙酰胆碱阿托品+乙酰胆碱组胺扑尔敏+组胺BaCl2BaCl2+阿托品实验报告1.针对实验数据，进行结果描述总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体豚鼠回肠有什么作用。2.讨论和结论分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2对离体豚鼠回肠平滑肌的作用机理。3.参考文献如：[1]陆源，夏强.生理科学实验.浙江大学出版社，2004，245-247