快速现场评价(ROSE)在肿瘤性疾病中的应用张朝顺中山市陈星海医院呼吸内科快速现场评价(ROSE,Rapidon-siteevaluation,玫瑰)技术介入呼吸病学快速现场评价(ROSE)系统(玫瑰系统)是以快速现场细胞学评价(ROSCE)实时地伴随介入操作,并据此调整介入操作的方式和手段;经ROSCE进行评价与质量控制后,取材以合适的渠道进入不同的跟进评价环节,并将部分取材送交平行科室与辅助科室在呼吸系统疾病的诊治中,ROSE是一种伴随于诊断性介入操作的极速细胞学判读技术,其“判读”内容包括:细胞形态、分类、计数、构成比、排列、相互关系、背景及外来物分析通用型平光“ROSE”平台ROSE操作流程介入操作:灌洗、钳取、穿刺等制片:印片法或喷片法迪夫快速染色(1分钟)显微镜下观察,现场评价一、现场细胞学和病原学的制片方式小外检组织块印片:用于多数经气管镜或胸腔镜黏膜活检与肺活检,经皮肺活检或其他经皮检到的组织块,还用于经支气管镜针吸活检(TBNA)到的条形组织块刷片:用于多数经气管镜刷片或用于其他较粘稠样品喷片:用于多数细针吸引(FNA),也用于经皮细针吸引肺细胞学活检或其他经皮检到的细胞学标本,还用于TBNA到的条形组织块以外的细胞学标本印片法喷片法二、现场细胞学和病原学的极速染色方式改良瑞氏染色或迪夫染色迪夫染色:A液30s→生理盐水清洗→B液45s→生理盐水清洗→吸水纸吸干玻片三、显微镜下观察四、常见恶性疾病的细胞学形态特点及其分型要点1.大细胞大:恶性细胞体积大,并且自身相比大小不等,最大恶性细胞是最小恶性细胞的2倍以上曲霉菌属的属间鉴别核大:核/浆比(N/C)增加,细胞核增殖较细胞浆快,N/C1/3正常,超过1/2提示恶性肿瘤可能;相比之下细胞浆少其他类型的真菌核仁大:核仁增大,大小不等,核仁最长直径(n)/核最长直径(N)(仁核比,n/N)0.25,提示为恶性肿瘤细胞2.角恶性细胞整体成角度:多边、多角、多瘤状、以及各种不规则形核成角度:奇形怪状,呈不规则圆形、肾形、芽状、结节状、以及各种不规则形,甚至突出于胞浆,呈牛眼状突出核仁成角度:奇形怪状,边缘不规则3.浓细胞浆浓:造成细胞整体浓染,胞浆浓染且不均细胞核浓:核染色质浓集不均,深染核仁浓:核仁深染,核仁有染色质网4.多细胞核多:双核、多核核仁多:数目增多,3~4个以上核染色体多:多倍体、异倍体、非整倍体5.厚核膜增厚:核膜增厚,核轮廓不清,退化,裸核由于核膜增厚,导致细胞膜菲薄,外缘不清,有撕破拉长或呈不规则突出,形成所谓“核膜厚浆膜薄”6.压癌细胞:相互拥挤,相互重叠,界限不清细胞核:核多,相互挤压核仁:增多,排列紊乱,相互融合挤压染色质:“边集”,向周边集中,形成所谓“压边”7.排列癌细胞:呈乳头状、腺腔状、葡萄状、桑葚状、花瓣状,肿瘤团状、镶嵌状、滤泡状等排列,或者形成三维结构;细胞有嵌入形成“枭眼”状,所谓的癌细胞“自吞噬”细胞核:畸形、大小不等,排列紊乱核仁:排列紊乱,相互融合核分裂:异常核分裂,不对称核分裂,多级核分裂染色体:排列紊乱,失掉极性,部分呈碎片样8.背背景见红细胞和坏死组织,恶性肿瘤出血坏死,形成所谓“阳性背景”;如伴感染,见中性粒细胞浸润五、常见恶性疾病细胞分型形态学特点鳞状细胞癌(分化较高)相当于表层鳞状细胞癌细胞瘤细胞整体:梭形、多角形、纤维、蛇形、蝌蚪形等,总之“不圆、多角、畸形明显”;但边缘较清楚胞浆呈“角化”,呈“均匀石膏样”,嗜酸为主,部分少浆,甚至裸核角化珠:一个大的类圆形癌细胞,环绕多个核,角化较明显胞核,染色质浓集(核染色深),核大小不规则,畸形明显坏死背景鳞状细胞癌(分化较高)鳞状细胞癌(分化较高)鳞状细胞癌(分化较低)相当于底层或中层鳞状细胞癌细胞,生长较活跃,角化不明显多数呈圆形或规则形成团或散在分布核畸形、核大染色质粗网状,分布不均核仁可见胞浆少,偏碱性,可重叠,外缘不清鳞状细胞癌(分化较低)腺癌瘤细胞较大:“类圆形”,成堆、成团分布,所谓失去组织结构的细胞碎片样排列(上皮细胞无序地拥挤在一起)多数呈圆形或规则形胞浆丰富、有空泡,总之呈“高分泌”样甚至“印戒样”,核增大排列特点:呈腺腔样、乳头样、葡萄样、桑葚样核呈圆形,较小,一边呈半月状者称印戒状染色质呈颗粒粗块状核仁大,3~5微米,清楚,1或2个胞浆丰富、偏酸性,胞浆内有空泡,胞浆内有圆形嗜酸性小体腺癌腺癌小细胞未分化癌瘤细胞小“没浆、没仁、鬼脸、镶嵌”,即胞浆少或裸核(高核浆比),核仁模糊不清,核染色质呈颗粒块状,不均匀分布,瘤细胞呈队列或镶嵌样排列(“脊椎样”排列),密集成团小细胞未分化癌大细胞未分化癌“个大、核大、仁大、浆少、镶嵌(三多一少伴镶嵌)”瘤细胞体积巨大,核大,核染色质丰富,呈粗颗粒状,核仁大,病理性核分裂常见;整体呈镶嵌样,胞浆少或中等量偏碱坏死常见大细胞未分化癌淋巴瘤肺部原发淋巴瘤少见,多为黏膜相关淋巴组织型结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT型),亦可为弥漫性大B细胞淋巴瘤及霍奇金淋巴瘤MALT淋巴瘤以大量小淋巴样瘤细胞为主,染色质浓集深染,分布不均,向细胞核外周集中,形成“鬼脸”或“空心”样改变;较多浆细胞分散分布于淋巴细胞中需与良性淋巴组织增生性疾病、低分化肿瘤、小细胞癌等鉴别,需流式及免疫组化染色辅助鉴别MALT淋巴瘤大细胞神经内分泌癌?小细胞癌合并鳞癌?大细胞神经内分泌癌?小细胞癌合并鳞癌?大细胞神经内分泌癌?小细胞癌合并鳞癌?大细胞神经内分泌癌?小细胞癌合并鳞癌?谢谢!