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机能实验学莆田学院机能实验室林丽珊消化道平滑肌生理特性及药物对离体肠肌的作用林丽珊制作试验目的1、观察哺乳类动物消化道平滑肌的一般特性；2、观察不同药物对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并分析其机理。实验对象豚鼠（350g左右）。实验用品洛氏液，“A”、“B”液，阿托品，苯海拉明，氯化钡，恒温装置，麦氏浴槽，张力换能器，MS4000U生物信号定量记录分析系统，氧气及胆球，手术线，手术缝针，持针钳，水浴锅，铁支架，量筒，烧杯，培养皿，手术器械等。实验方法标本制作1、用木槌猛击豚鼠枕部致昏迷；2、剖开腹腔，找到回盲部；3、离回盲部2~3cm处剪取回肠约20~30cm；4、置于通氧的37℃左右的洛氏液中轻轻漂洗，并分成数段（每段2cm左右），置上述洛氏液备用。实验装置1、检查并调试恒温装置，连接仪器，张力换能器的插头接于CH2；2、麦氏浴槽内盛入37℃的洛氏液20ml并恒温；3、将连于增氧器的头皮针插于麦氏浴槽底部的排水管中并缓慢通气。（1~2个气泡/秒）4、固定标本。（1）取回肠一段，两端均用缝针穿线。（2）一端缝线固定于“L”形弯钩底部，另一端连接于张力换能器。（3）调节换能器高度使肠段保持约1g前负荷的张力（调零后进行）。张力换能器麦氏浴槽L形弯钩增氧器管软件操作1、启动MS4000U系统；2、控制面板调整参数如图所示。3、自动调零：张力传感器的负荷为零时，点击“自动调零”。（随后加前负荷1g）4、点击“传感器失调校正”。5、资料存储，进入记录状态。实验项目观察温度对肠平滑肌运动的影响1、将浴槽内的洛氏液温度维持在37℃，记录肠段运动作对照；2、用25℃的洛氏液更换浴槽内的37℃的洛氏液，记录肠段运动的变化。观察药物作用对肠平滑肌运动的影响每观察一个项目都应记录药前、药后的肠张力变化曲线过程并打好标记。每一个项目观察完毕，都应以洛氏液洗涤2次，待曲线恢复平稳后，再施行下一个项目。给药顺序1、加入1﹕1000的“A”液0.2ml于麦氏浴槽中，观察曲线变化；药物作用完全后，取37℃洛氏液洗涤2次；曲线恢复正常后，加入1﹕1000的“B”液0.3ml，观察曲线有否变化；观察完毕，换液洗涤。2、加入1﹕1000的“A”液0.2ml于麦氏浴槽中，作用达高峰时，立即加入1﹕1000的阿托品溶液0.2ml，观察曲线有否变化；曲线恢复后，再加等量“A”液，观察曲线有否变化；如另加入1﹕1000“B”液0.3ml，曲线有否变化？观察完毕，换液洗涤。3、加入1﹕10000“B”液0.3ml于麦氏浴槽中，作用明显时，立即加入1﹕10000苯海拉明溶液0.3ml，观察曲线变化；3~5min后，再加等量“B”液，观察曲线有否变化；另加入1﹕1000“A”液0.2ml，曲线有否变化？观察完毕，换液洗涤。4、加入1﹕100氯化钡溶液0.2ml，结果如何？待作用达高峰时（约15min），加入1﹕1000的阿托品0.2ml，观察有无对抗作用？如另加入1﹕1的苯海拉明0.3ml，有无对抗作用？部分药物作用机制阿托品——（-）M-R苯海拉明——（-）Ｈ１-R氯化钡﹟钡离子经钙通道进入胞浆膜内电位升高，平滑肌兴奋性增高，收缩频率增高；触发肌浆网释放钙离子，肌浆钙离子增加，收缩力增强；﹟氯化钡促进胆碱能神经释放乙酰胆碱使平滑肌收缩力增强；﹟钡离子阻断钾离子通道，钾离子内流减少，膜电位变小，兴奋性增高．实验结果剪辑与打印结束实验：点击“资料存储”，选择“停止存储”。重显资料：点击“资料重显”，打开所记录的文件，拉开重显框（左边框线右移）。剪辑文件：1、查找到编辑目标后，点击“图形冻结”，单击鼠标右键，选择“数据剪接”，按下鼠标左键，剪辑所需图形。2、给剪辑的文件命名并保存，再依次选取所需图形进行剪辑。3、剪辑完毕后，点击“资料重显”，选择“停止重显”。打印实验结果：点击“资料重显”，选择“开始重显”，打开剪辑文件名，选择第一通道进行打印。注意打印基线的调节。药物作用及机理分析以上实验结果说明了什么？你推测“A”液和“B”液各属于哪类药物？其作用机理是什么？注意事项标本保护1、注意温度、通气、洛氏液的成分及PH等各种条件是否合乎规定；2、制作标本过程中要动作迅速，不能较长时间脱离洛氏液；3、洛氏液中要供给氧气。“三不碰”1、肠段标本与张力换能器之间的连线要保持垂直，松紧适当，不与麦氏浴槽内壁相碰；2、操作过程中加药时，注射器及药液不与“连线”相碰；（也包括其他外力）3、加药时，药液不与麦氏浴槽内壁相碰。加量应准确如加入洛氏液及药液，应按规定量加入，以免影响药物浓度。换液时，应暂时停止记录（按空格键）切勿停止存储！！！清洗应充分清洗液存留时间应稍长一些。不浪费洛氏液保护换能器不宜随意牵拉，位置不能颠倒．1.处方与制剂2.有机磷酸脂类中毒与解救预习下次课内容：