电生理与膜片钳技术简介

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易小璇华中科技大学生科1202班SchoolofLifeScience,HuazhongUniversityofScience&Tecnoligy.突触电生理记录electrophysiologicalrecording01020304神经电生理记录的方法MethodsofNeuroeclectrophysiologyRecording应用:海马突触可塑性研究Applyment:ResearchofHippocampusSynapticPlasticity突触前抑制VS.突触后抑制PresynapticInhibitiongvs.PostsynapticInhibition参考文献ReferencesCONTENT0201神经电生理记录的方法MethodsofNeuroeclectrophysiologyRecordingPARTONE1.细胞内记录(记录电压差)将记录电极插入神经元胞体内记录神经元膜内的电位变化记录到的神经电活动较为真实在离体记录中应用比较广泛,而在清醒动物中成功率较低03突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院2.细胞外记录(记录电压差)把记录电极插到被测神经元附近记录周围神经时,只能记录到动作电位能够保持细胞功能的完好广泛应用于检测清醒动物的神经元电活动04突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院3.膜片钳记录(记录离子电流)细胞贴附式:膜片钳技术中其它记录方法的基础。用微电极接触细胞膜,对微电极施加负压,对局部细胞膜上的离子电流进行记录。全细胞模式:在细胞吸附模式上给细胞膜进一步施加负压,将被封接膜片打穿,记录膜片以外部位的全细胞膜的离子电流。内面向外模式:在细胞吸附模式基础上,将形成巨阻抗封接的膜片微电极向上提起,使膜片从细胞体上被切割下来优点:露出的电流极少,能够正确地进行电压固定缺点:对细胞造成了不可避免的机械性刺激05突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院4.脑电图技术(记录电场)操作方便无损伤广泛运用于人类脑功能研究06突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院02应用:海马突触可塑性研究Appyment:ResearchofHippocampusSynapticPlasticityPARTTWO1.强迫游泳动物模型推测海马参与了大鼠强迫游泳测试中的习得性绝望07突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院强迫游泳动物模型抑郁症不动时间海马习得性绝望2.电生理实验记录EPSPschaffercollateral-CAl通路基线游泳15min,记录EPSP24h后游泳5min,记录刺激电极:定位于海马的Sehaffer侧枝。施加方波记录电极:定位于海马的CA1辐射层。记录EPSP连续记录至少40分钟的基线,然后进行强迫游泳15分钟同时记录大鼠的不动时间,大鼠取出后让大鼠体温恢复。记录EPSP。24时后强迫游泳5分钟,记录不动时间,大鼠取出后擦干且恢复体温后,再次记录兴奋性突触后电位至少两个小时。08突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院3.诱导内源性LTP强迫游泳训练之后诱导了短暂的突触抑制(大约持续16分钟),在60分钟之内反转成长时程增强。训练前给予NMDA受体的结抗剂氯胺酮可以阻断训练诱导的内源性突触增强09突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院4.排斥诱导外源性LTP没有经过强迫游泳训练的大鼠可以稳定诱导出长时程增强,而强迫游泳可以损伤长时程增强的诱导。10突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院5.结论11突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院强迫游泳中的习得性绝望可以在海马CA1脑区诱导出长时程增强。这种长时程增强可以排斥高频电刺激进一步诱导长时程增强这种长时程增强是受内源性的NMDA受体依赖的。03突触前抑制VS.突触后抑制PresynapticInhibitiongvs.PostsynapticInhibitionPARTTHREE突触前抑制VS.突触后抑制突触后抑制:突触后膜产生抑制性后电位,从而使后膜兴奋性下降。Cl-内流而使后膜超极化所导致。突触前抑制:B神经元轴突在产生动作电位前已经局部被A去极化,所以产生动作电位时膜电位变化幅度减小,释放的递质减少,C兴奋性后电位降低。12突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院04参考文献ReferencesPARTFOUR参考文献神经电生理记录的原理与方法_蓝永生。13突触电生理记录,易小璇,华中科技大学生命学院情绪记忆的海马突触可塑性机制研究_段婷婷电生理方法记录果蝇幼虫NMJ突触潜力_WendyImlach,BrianD.McCabe易小璇华中科技大学生科1202SchoolofLifeScience,HuazhonguniversityofScience&Tech.感谢各位聆听ThanksforListening

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