法医病理学检材的提取固定

法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法1范围本标准规定了法医病理学检验检材的剖验提取、固定、固定液选择及配制以及检材的包装、送检的方法和步骤。本标准适用于各级公、检、法、司及院校系统进行司法解剖的病理学检验。2总则在法医病理学组织细胞检验、组织化学检验、免疫荧光及超微结构等项检验中，检材的提取、固定、送检正确与否，直接关系到鉴定结论的准确性和正确性。本标准的制定是为了法医病理学检材的提取、固定、送检有一个统一的方法及步骤，为今后复核和法医病理学的发展及国际交流奠定基础。3法医病理学检材的提取要求、方法和步骤3．1法医病理检材提取前要求详细了解记录：死者姓名、性别、年龄、民族、住址、工作单位、职业、生前健康状况、详细案情及死亡过程和症状，提取住院病历或门诊治疗情况和详细的现场勘验情况。3．2为了保证法医病理检验鉴定结论的准确性，要求：组织细胞学检验鉴定检材的提取应在死亡后48h内进行，特殊情况下冬季不超过72h，春秋季不超过48h，夏季不超过24h。存放在冷箱内的尸体不超过72h，冰柜内保存结冰的尸体96h，最长时间不过一周。免疫组织化学、电镜等项检验鉴定检材的提取应在12～24h以内进行。3．3剖验时要详细检查、记录拍照尸表损伤病变和剖验脏器的表面、切面的损伤和病变，记录损伤和病变的部位、数量、形态、大小、范围、色泽、硬度等情况(大小以cm表示)。脏器剖验检查的原则是：实质性脏器主要注意检查表面和切面损伤和病变；空腔性脏器主要注意检查浆膜和粘膜有无损伤和病变、管壁有无增厚及狭窄等。3．4尸表损伤和病变检材提取的方法和要求3．4．1颈部损伤检材提取的方法：经详细的检验记录拍照后“T”字形切开胸腹腔，按照尸体解剖规定的方法开颅。胸、腹腔脏器及大脑剖验后，分层切开颈部组织检查，提取检材。3．4．2电流斑的提取方法：对直径小于3cm～4cm的损伤，在损伤边缘正常组织1cm处完整切取。如多处相同损伤应提取4处以上。直径大于4cm的损伤，在不破坏尸体外观情况下，也可整个提取。如不能整个提取，可跨损伤的最大直径切取lcm宽的条状组织两块，并要求两端均带有1cm的正常组织，切取时避免挤压和金属类工具接触损伤，以免局部组织受压变形和影响金属元素分析的准确度，提取损伤的同时应提取周围正常组织，以利作金属元素分析的空白对照使用。剖验提取后，除留做金属元素分析的损伤和空白对照组织不能放入固定液外，应按元素分析的要求包装送检。做病理组织细胞学检验的检材应立即放入固定液固定。3．4．3其他体表损伤和病变的提取方法和原则：病变或损伤均应带有周围1cm的正常组织，能完整提取的应尽量提取整个损伤或病变区。3．5胸腔脏器检材的提取方法3．5．1心脏检材提取方法：切开前胸壁暴露胸腔时，应注意勿损伤颈部静脉，“Y”字形剪开心包，观察心包液的颜色和量。原位检查心脏外形和出入心脏的大血管是否正常。心包膜与心外膜有无粘连及损伤等。然后靠心包最顶部剪断出入心脏的大血管，将心脏取出。顺血流方向切开心脏，测心脏重量和心房心室厚度，放入固定液内固定。如疑心脏有空气栓塞时，剪开心包检查后，将心包腔内灌满水，然后在水面下剪开右心房和右心室，如有气泡逸出，即是空气栓塞的证据。3．5．2肺脏检材的提取方法：观察双侧肺是否对称，有无肺萎陷、肺不张，胸膜有无粘连、胸壁和肺有无损伤和出血，胸腔内有无积液积血。然后连喉、气管、支气管、肺一并取出，沿气管后壁下中线自上而下剪开气管至肺门检查。检查肺表面有无损伤、出血和其他病变，用手触摸肺各叶是否有实质性病灶。用长刀从肺的长轴自外侧面对准肺门方向，由上而下有力作一纵切面，检查左右肺各叶切面有无异常，双手挤压切面有无泡沫状液体溢出，检查肺门淋巴结有无肿大，测量肺重量。如肺有损伤或病变的情况下，可按要求切开全部提取固定。3．5．3疑有先天性心血管畸形，应将肺和心脏一并取出检查，必要时，在不破坏病变的基础上切开肺和心脏固定。3．6腹腔脏器提取方法3．6．1先观察腹腔有无积液和出血、腹腔脏器的位置是否正常、肝脾的大小及有无损伤及异常。疑有胰腺损伤或病变时，应先检查胰腺周围有无出血及脂肪坏死。3．6．2脾脏检材的提取方法：用剪刀分离大网膜后提起脾脏切断脾门部血管，将脾脏提出，测量脾脏的大小、重量。检查脾被膜及切面有无异常。用刀循脾的长轴，对脾门切第一刀，依次作3～4个切面。3．6．3小肠、结肠的检材提取的方法：将小肠和肠系膜推向左下方，暴露出十二指肠腹膜固定段，在此用线结扎空肠头部位，剪断分离肠系膜，小肠全部分离后，分离结肠回盲部及升结肠腹后壁腹膜组织后，切断横结肠、大网膜，再分离降结肠腹后壁组织，在结肠与直肠交界处上5cm结扎剪断。将小肠和大肠全部取出。然后左手拿镊子固定空肠头部，同时右手将肠剪的钝端插入肠腔内，剪开肠腔。3．6．4胃和十二指肠检材的提取方法：结扎胃上、下两端后，在结扎线外剪断提出胃，沿胃大弯剪开胃，检查胃内容物及胃粘膜有无异常(注意保存胃内容物做毒化分析)。然后纵行剪开十二指肠，检查十二指畅粘膜有无异常，暴露十二指肠乳头后，轻压胆囊观察有无胆汁排出。3．6．5胰检材的提取方法：应先从胰尾部分离周围软组织，逐渐将胰腺分离取出。取出后将胰腺多做横切面检查或从胰头部作一纵切面，观察有无异常，在切面上找出胰总管，插入探针，并沿探针将胰管切开．检查胰管的大小、内容物和管壁的情况，有病变或损伤时可全部提取固定。检材取出后应立即放入固定液内固定。3．6．6肝脏胆囊检材的提取方法：用剪刀剪开总胆管和肝内的左右分枝。然后切断肝十二指肠韧带、总胆管、门静脉和肝动脉，在肝的横隔面切断镰状韧带及肝三角韧带肝静脉和下腔静脉联合将肝取出。用镊子提起胆囊，用剪刀沿胆囊壁细心地与肝组织分离，分离后剪开胆囊，检查胆囊管是否阻塞，有无结石，粘膜有无炎症、出血增厚等情况。用长刀对着肝的左右叶自表面最凸中部向肝门作第一刀切面，然后再平行切四刀，检查切面有无异常，根据损伤或病变的情况可增加取材的数量或全部将切后的肝提取固定。3．6．7肾上腺和肾脏检材的提取方法：剪开左腰部腹膜，分开左肾上极周围脂肪组织，将左肾上腺小心分离取出。右侧肾上腺在肝和右肾上极之间，采取时，应将肝向左上方推起，并用刀分离小部分该处的肝脏以暴露右侧肾上腺。检查双侧肾上腺是否对称，表面有无出血，切面皮髓质有无异常。然后分别将两侧肾脏周围脂肪囊切开分离，将两侧肾取出。有泌尿系统疾病或损伤时，需了解肾输尿管和膀胱的关系时，将肾握在手内，将肾门的血管和输尿管加于食指和中指间，用长刀自肾凸面由上而下向肾门切去，作一切面检查肾盂，有无结石、炎症及粘膜出血。被膜是否易剥离，检查切面皮质厚度，皮髓质是否分界清晰，有无梗死损伤和出血、血管有无狭窄和硬化，测量大小和重量，按照本标准的规定提取检材、有病变或损伤时可根据情况决定。3．6．8腹主动脉和下腔静脉检材提取的方法：主动脉应同心脏一直到髂外动脉分枝处一起分离取出。可沿弓部于前壁剪开，直到髂动脉。观察内膜有无病变及小动脉开口处的情况。下腔静脉可自髂部剪开，向上检查腔内是否有血栓等情况，根据情况和需要决定检材提取的部位和数量。3．7盆腔脏器检材提取的方法3．7．1睾丸和副睾的检材提取方法：取睾丸和副睾时，可先扩大腹股沟管内口，一手推挤睾丸向上，一手用力拉精索向上，切断下端连系阴囊的睾丸带，即可取出睾丸。剪开鞘膜腔，注意鞘膜腔内是否有积液，量多少，检查睾丸和副睾表面有无出血和损伤，测量大小、重量和硬度，然后用刀纵切睾丸和副睾，观察切面有无异常。3．7．2子宫及附件检材提取的方法，切断子宫固定韧带，依次分离子宫圆韧带下缘以及附件周围的疏松结缔组织，然后切断阴道和子宫颈间的联系，取出子宫及附件。然后将剪刀一臂伸入子宫腔内，自子宫颈部直至子宫底部，由此向左右二侧剪开子宫角部，使切口成“Y”字形。注意检查子宫壁层有无异常，子宫腔内有无妊娠改变、子宫内膜有无异常等情况。检查子宫附件有无异常。3．8骨骼检材提取方法要求：对疑有造血系统疾病可提取三处以上的骨髓做组织细胞学检验，常取的部位有髂前上嵴、胸骨、肋骨、股骨等，要求取3cm厚的骨放入固定液内固定。3．9大脑的检材提取方法：开颅后，观察硬脑膜紧张度，沿正中线剪开矢状窦，检查其中有无血栓形成、出血及炎症等。沿颅骨的切线用剪刀将硬脑膜及大脑镰的前端自筛板处切断，用镊子夹起硬脑膜使之与蛛网膜分离，分离时应注意检查硬膜下腔内有无血肿、液体、脑膜动脉有无破裂等情况后，检查蛛网膜下腔内有无出血、炎性渗出，有无增厚。取脑时可用左手四指插入额叶与颅底之间，将额叶向上抬起，暴露嗅神经、视神经，靠近颅骨硬脑膜切断视神经，将大脑进一步向后牵拉，将颈内动脉和中脑的漏斗切断，然后切断动脉、神经和小静脉等，再用小刀将小脑天幕切断，切断三叉神经和其他脑神经，最后将刀尽可能深入到椎管切断椎动脉和第一对颈神经及脊髓，将大脑小脑取出。取出后详细检查大脑小脑表面，有无损伤、出血、脑回有无异常，并用手触摸大脑各部有无异常情况，检查有无脑疝形成和脑底动脉有无异常情况。测大脑的大小和重量后，提取整个大脑。3．10脑垂体的剖验检材提取方法：用剪刀、镊子分离蝶鞍内脑垂体周围软组织，将垂体取出，作一横切面，用卫生纸包后放入固定液。3．11脊髓检材提取方法：先将尸体俯卧位，背部朝上，在胸部下放一木枕，便于操作，然后作一切口至枕骨隆突，沿着椎体棘突至骶骨为止。剥离棘突上的软组织及椎弓上的骨膜和软组织等，用双板锯在棘突两侧，向下一直锯开，暴露出脊髓硬脊膜的大部分，但脊髓上段第一颈椎不必锯开，可自其下方将脊髓自椎管拉出，然后用剪刀在硬膜外剪断脊神经，可将整个脊髓连硬脊膜取出。取出后沿前后正中线剪开硬脊膜，检查硬脊膜和脊髓表面有无异常。剖验后可将全部脊髓放入固定液固定提取。4法医病理学检材提取的原则和方法4．1提取检材时，要严格按3.3的规定检验记录脏器表面和切面。病变及损伤的大小以长×宽×深或厚(cm)表示，测量脏器的大小以长×宽×厚(cm)表示，重量以g表示。4．2各脏器检材提取要求和原则：法医病理学检材提取，要求每具尸体检必须剖验。胸、腹腔和大脑在没有明显病变和损伤的情况下，要求提取整个心脏和大脑。其他脏器在无明显病变损伤时，可按照本标准的规定提取组织块，组织块的厚度应在1cm～2cm，除心脏和大脑提取外如其他脏器有严重损伤或病变时，要求在不破坏损伤和病变的基础上切开全部固定提取。4．3肺脏组织的切取：右肺上、中、下叶各取一块，上叶为小正方形，中叶为中正方形，下叶为大正方形。左肺两叶各取一块，上叶为小长方形，下叶为大长方形。每块组织厚应在lcm～2cm，切取时均需带有脏层胸膜。4．4肝脏组织切取：右叶二块切成正方形，左叶一块切成长方形。4．5脾脏组织切取：切取带有脾被膜组织一块。4．6胰脏组织切取：胰头部一块正方形，体部一块长方形，尾部一块三角形。4．7肾脏组织切取：双侧肾脏各取一块，包括皮质髓质，右肾切成正方形，左肾切成长方形。4．8脑垂体和肾上腺、甲状腺：全部提取，胸腺根据情况提取部分。4．9消化道组织提取：食管、胃、小肠、阑尾、结肠，可根据病变决定取材部位数量，一般情况下应各取组织一块，伸展将浆膜面粘附在纸上固定。4．10膀胱、前列腺、睾丸、子宫、卵巢、淋巴结、骨骼、脊髓均可根据情况决定提取。5法医病理学检材的固定液选择及配制方法5．1常用固定液的性质与作用：目前固定液虽然种类很多，但均有个自的优缺点，结合我们法医实际工作介绍几种常用固定液。5．1．110％的福尔马林：福尔马林即甲醛溶解于水的饱和溶液，是一种普遍应用较优良的常规固定剂，优点是对组织的渗透作用强，固定均匀，使脏器和组织变硬并增强弹性，不引起组织的严重收缩，染色优良，对脂类固定良好，疑有脂肪栓塞的案件首选福尔马林固定。缺点：福尔马林经日光或久放与空气接触后，被氧化自行分解产生甲酸而呈酸性。用酸性福尔马林固定含血液较多的组织或损伤出血灶，易使出血灶呈黑色或在组织内形成棕黑色的福尔马林色素沉淀。5．1．2为了避免福尔马林色素沉淀，可用pH7～7.4的磷酸盐缓冲液配制10％中性福尔马林固定液。此液不仅可以避免产