辽阳职业技术学院制药微生物第6节常见病原性细菌球菌葡萄球菌链球菌淋病奈瑟球菌辽阳职业技术学院制药微生物球菌辽阳职业技术学院制药微生物一、葡萄球菌属(Staphylococcus)葡萄球菌广泛分布于空气、饲料、饮水、地面及物体表面。人及畜禽的皮肤、黏膜、肠道、呼吸道及乳腺中也有寄生。致病性葡萄球菌常引起各种化脓性疾患、败血症或脓毒败血症。当污染食品时,可引起食物中毒。辽阳职业技术学院制药微生物一般特征典型的葡萄球菌为圆形,直径0.5~1.5um,排列成葡萄串状,无芽胞,无鞭毛,有的形成荚膜或黏液层。辽阳职业技术学院制药微生物在脓汁中或生长在液体培养基中的球菌常呈双球或短链排列。辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物用青霉素可诱导成L型。革兰氏阳性,但衰老、死亡或被白细胞吞噬以及耐青霉素的菌株呈阴性。需氧或兼性厌氧,触酶阳性,氧化酶阴性,无运动力。可在普通培养基、血琼脂等生长,不在麦康培养基生长。最适温度35~40℃。最适pH7.0~7.5。致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色素,不着染培养基。辽阳职业技术学院制药微生物分类过去按产生的色素分为3种:金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌。1974年葡萄球菌属分为3种:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。《伯吉氏系统细菌学手册》(1986)则将本属细菌分为20多种。其中常见的动物致病菌有金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌厌氧亚种、中间葡萄球菌及猪葡萄球菌。辽阳职业技术学院制药微生物大多数从人分离的金黄色葡萄菌菌株,可根据噬菌体分型,分为22个型,但是动物的分离株不能用人的标准噬菌体满意地分型。辽阳职业技术学院制药微生物三种葡萄球菌的主要生物学性状性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色凝固酶+--葡萄糖++-甘露醇+--溶血素+--耐热核酸酶+--A蛋白+--磷壁酸类型核糖醇型甘油型两者兼有噬菌体分型多数能不能不能致病性强弱无辽阳职业技术学院制药微生物金黄色葡萄球菌形态、培养及生化特性与属的特征相一致。需注意的是脓汁、乳汁、液体培养的染色片中常见双球或短链排列的球菌,易误认为链球菌。辽阳职业技术学院制药微生物在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落,直径1~2mm,有时可达4~5mm。菌落颜色依菌株而异,初呈灰白色,继而为金黄色、白色或柠檬色。致牛乳腺炎以及耐药菌株常为深黄色。色素的形成依培养条件而异,通常在22℃或在固体培养基中含有糖、牛乳或血清等,产生色素较多;有O2及CO2环境下易形成色素。辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物在血液琼脂平板形成的菌落较大,产溶血素的菌株多为病原菌,在菌落周围呈现明显的B溶血。辽阳职业技术学院制药微生物在普通肉汤生长迅速,初浑浊,管底有少量沉淀,轻轻振荡,沉淀物上升,旋即消散。培养2~3d后可形成很薄的菌环,在管底则形成多量黏稠沉淀。辽阳职业技术学院制药微生物生化反应生化反应并不恒定,常因菌株及培养条件而异。多数能分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸而不产气。致病菌株多能分解甘露醇。还能还原硝酸盐,不产生靛基质。辽阳职业技术学院制药微生物抵抗力在无芽孢菌中,葡萄球菌的抵抗力较强。在干燥的脓汁或血液中可存活2~3个月,80℃30min才能杀死,煮沸可迅速使它死亡,3%~5%石碳酸3~15min即可致死,70%乙醇在数分钟内杀死本菌。对碱性染料敏感,浓度为1:100000~1:300000的龙胆紫可抑制其生长繁殖,故临床上应用1%~3%龙胆紫溶液治疗葡萄球菌引起的化脓症,效果良好。1:20000洗必泰、消毒净、新洁尔灭,1:10000度米芬可在5min内杀死本菌。辽阳职业技术学院制药微生物药物敏感性葡萄球菌对磺胺类、青霉素、金霉素、土霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感,但易产生耐药性。某些菌株能产生青霉素酶,或携带抗四环素、红霉素等基因,因而对这些抗生素产生耐药性。辽阳职业技术学院制药微生物致病性及毒力因子金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶,故致病性强。常引起两类疾病,一类是化脓性疾病,例如动物的创伤感染、脓肿、蜂窝织炎、乳腺炎、关节炎、败血症和脓毒败血症等。另一类是毒素性疾病,被葡萄球菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物毒力因子葡萄球菌的某些细胞壁结构具有毒力因子的作用,如葡萄球菌蛋白A、荚膜、纤连素结合蛋白,但是最主要的毒力因子还是毒素及酶。辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物微生物学诊断小猫试验标本脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素,溶血,生化反应毒素检查辽阳职业技术学院制药微生物发生食物中毒时,将从剩余食物或呕吐物分离的葡萄球菌接种到普通肉汤中,置30%CO2培养40h,离心沉淀后取上清液,100C℃30min加热后,注入幼猫静脉或腹腔内,l5min到2h内出现寒战、呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状,表明有肠毒素存在。采用ELISA法可快速检测微量的肠毒素,应用DNA探针杂交技术则可直接检出肠毒素的阳性菌株。辽阳职业技术学院制药微生物1.侵袭性疾病主要引起化脓性炎症。葡萄球菌可通过多种途径侵入机体,导致皮肤或器官的多种感染,甚至败血症。(1)皮肤软组织感染主要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等。(2)内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等,主要由金葡菌引起。(3)全身感染如败血症、脓毒血症等,多由金葡菌引起,新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。所致疾病辽阳职业技术学院制药微生物2.毒性疾病由金葡菌产生的有关外毒素引起(1)食物中毒进食含肠毒素食物后1~6小时即可出现症状,如恶心、呕吐、腹痛、腹泻,大多数病人于数小时至1日内恢复。(2)烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人,开始有红斑,1~2天有皮起皱,继而形成水疱,至表皮脱落。由表皮溶解毒素引起。(3)毒性休克综合征由TSST1引起,主要表现为高热、低血压、红斑皮疹伴脱屑和休克等,半数以上病人有呕、腹泻、肌痛、结膜及粘膜充血,肝肾功能损害等,偶尔有心脏受累的表现。(4)假膜炎肠炎本质是一种菌群失调性肠炎,病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜所覆盖,该假膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成。人群中约10~15%有少量金葡菌寄居于肠道,当优势菌如脆弱类杆菌、大肠肝菌等因抗菌药物的应用而被抑制或杀灭后,耐药的金葡菌就乘机繁殖而产生毒素,引起以腹泻为主的临床症状。辽阳职业技术学院制药微生物加强卫生宣传教育,讲究个人卫生,皮肤创伤应及时处理,注意中西医结合,合理用药避免滥用抗生素防治原则辽阳职业技术学院制药微生物二、链球菌属(Streptococcus)链球菌种类很多,在自然界分布甚广,水、尘埃、动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等都有存在,有些是非致病菌,有些构成人和动物的正常菌群,有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。辽阳职业技术学院制药微生物形态与染色链球菌呈圆形或卵圆形,直径小于2.0pm,常排列成链状或成双。一般致病性链球菌的链较长,非致病性菌株较短。肉汤内对数生长期的链球菌,常呈长链排列。革兰氏阳性,老龄的培养物或被吞噬细胞吞噬的细菌呈现阴性。除个别D群菌外,均无鞭毛。A群等的一些菌株有菌毛。A、B、C群等多数有荚膜。辽阳职业技术学院制药微生物化脓性链球菌StreptococcuspyogenesDividingstreptococci辽阳职业技术学院制药微生物链球菌辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物培养特性大多数为兼性厌氧菌,少数为厌氧菌。最适生长温度37℃,pH7.4~7.6,致病菌营养要求较高,普通培养基中生长不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。在血液琼脂平板上长成直径0.1~1.0mm,灰白色,表面光滑,边缘整齐的小菌落。多数致病菌株具有溶血能力,溶血环的大小和类型因菌株而异。B、D群的一些菌株可产生橙红或黄色色素。血清肉汤中生长,初呈均匀浑浊,后因细菌形成长链呈颗粒状沉淀管底,上清透明。辽阳职业技术学院制药微生物生理生化特性辽阳职业技术学院制药微生物分类目前链球菌属共有30多种,比较常见的有10余种。还可根据抗原构造、溶血特征分类。分类辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物按溶血能力分类根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为甲、乙、丙三类,在鉴定链球菌的致病性方面有一定的意义。甲型溶血链球菌在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环,红细胞未溶解,血红蛋白变成绿色。这种细菌致病力不强,多为条件性致病菌。辽阳职业技术学院制药微生物乙型溶血链球菌菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全溶解。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。丙型溶血链球菌菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。辽阳职业技术学院制药微生物溶血性链球菌辽阳职业技术学院制药微生物致病性致病性链球菌可产生各种毒素或酶,可致人及马、牛、猪、羊、犬、猫、鸡、实验动物和野生动物等多种疾病。链球菌的不同致病菌株,分别可产生溶血素、链激酶(又名溶纤维蛋白酶),链道酶(又名链球菌脱氧核糖核酸酶),透明质酸酶等,其性质与作用与葡萄球菌的酶类似。辽阳职业技术学院制药微生物链球菌引起人类多种疾患,A族占90%以上,在致分为化脓性、中毒性和变态反应三类。1.化脓性炎症由皮肤伤口侵入,引起皮肤及皮下组织化脓性炎症,如疖痈,蜂窝组织炎、丹毒等。沿淋巴管扩张,引起淋巴管炎,淋巴腺炎,败血症等,经呼吸道侵入,常有急性扁桃腺炎、咽峡炎,并蔓延周围引起脓肿、中耳炎、乳突炎、气管炎、肺炎等。不卫生接生,经产道感染,造成“产褥热”。2.猩红热由产生致热外毒素的A族链球菌所致的急性呼吸道传染病,临床特征为发热、咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑。所致疾病辽阳职业技术学院制药微生物3.链球菌感染后疾病主要是病原菌引起的变态反应疾病风湿热由A族链球菌的多种型别引起,临床表现以关节炎、以肌炎为主。急性肾小球肾炎多见于儿童和少年,大多数由A族12型链球菌引起。临床表现为蛋白尿、浮肿和高血压。也是一种变态反应性疾病。辽阳职业技术学院制药微生物4.其他疾病B族链球菌又称无乳链球菌(Streptococusagalactiae)当机体免疫功能低下时,可引起皮肤感染、心内膜炎、产后感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。甲型(草绿色)链球菌人类口腔和上呼吸道的正常菌群,若心脏瓣膜已有缺陷或损伤,本菌可在损伤部位繁殖,引起亚急性细菌性心内膜炎。在拔牙或摘除扁桃体时,寄居在口腔、龈缝中的草绿色链球菌可侵入血流引起菌血症。变异链球菌为厌氧菌,可引起龋齿。辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物辽阳职业技术学院制药微生物抵抗力本属细菌的抵抗力不强,对热较敏感,煮沸可很快被杀死,常用浓度的各种消毒药均能杀死。对青霉素、磺胺类药物敏感。免疫性链球菌的抗原结构比较复杂,机体感染后有多种抗体产生,已知抗M蛋白的抗体具有保护作用,M蛋白有多种抗原型,各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。辽阳职业技术学院制药微生物微生物学诊断根据不同的疾病,取适当的病料(脓汁、乳汁、血液、组织)作涂片染色、显微镜观察,见革兰氏阳性、成对或链状排列的球菌,可作初步诊断。在链球菌败血症羊、猪等动物组织涂片中,往往呈双球状,具荚膜,以瑞氏或姬姆萨染色比革兰氏染色清楚,与巴氏杆菌两极染色不同,而在腹腔或心包液等组织液中则呈长链,但荚膜不如组织涂片中明显。辽阳职业技术学院制药微生物如需确诊,则需用血液琼脂平板分离培养,观察菌落、溶血等特征,并进行生理生化试验。若要作病原菌的定群或定型,则要用群、型特异性血清,作血清学试验。近几年已将分子生物学手段用于致病性链球菌的检测。辽阳职业技术学院制药微生物链球菌感染的防治原则与葡萄球菌相同。链球菌主要通过飞沫传