血培养的意义及操作规范血培养概念:采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测.检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.如有细菌,则极有可能为致病的细菌.进一步进行鉴定/药敏试验.血培养检测的意义根据培养结果:选择正确的抗感染治疗方案或调整经验治疗方案判断感染性疾病的类型评价疗效及预后正确采取感染控制措施•是否隔离•减少院内感染血液及无菌体液是最有意义的病原学检测标本。完整的血培养过程医师开出医嘱三级报告:为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果护理人员收集送检样本实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物问题:血培养的指征是什么?怀疑患者有血流感染的症状有:–不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃)–白细胞增多(>10,000/ul),粒细胞减少(<1,000ul)–休克,寒颤,僵直–严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染,…)–心率异常加快–低血压或高血压–呼吸频率加快怀疑血流感染时应常规行血培养发热要做血培养!问题:怀疑血流感染,何时采血最佳?采集血培养样本的最佳时间?答案:尽可能在寒战或开始发热时采血在接受抗生素治疗前采血如已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养问题:应该采几套血液标本?应该采几份血液标本?答案:每位患者每次采血最少2套,3套更好儿童类似于成人,应在24小时内采2-3次血培养初发患者,绝不能只采1套标本Cockerill,CID2004血培养套数与阳性检出率(%)65%80%96%99%问题:标本须间隔多久采集?标本须间隔多久采集?答案:从不同部位,同时或短时间内采集2-3套血培养,因为体内巨噬细胞吞噬系统会在15~30min内清除掉进入人体内的细菌当怀疑感染性心内膜炎或其他的血管内感染(导管相关性)菌血症和真菌血症时,则间隔采血,每隔1----2小时采血一次,2套——3套血培养。问题:应该采集多少血液?要采集多少血液?答案:采血量是影响灵敏度最关键因素成人一份标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采两份标本,即40ml。儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量<1%总血量下,一般为1-3ml采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染采血量与检出率的关系血培养物每增加1毫升,成年人真性菌血症阳性检出率增加3%BDBACTEC每个瓶都清晰显示最佳采血量利用瓶身刻度准确采血问题:如何进行消毒与标本采集?血培养的采集:无菌操作血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。所以要最先采集血培养标本。污染率的指标是3%(100份标本里只能有不到3个标本出现污染)75%乙醇擦拭静脉穿刺部位,等待30秒1-2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm.用75%乙醇消毒60秒(脱碘),待酒精挥发干燥后采血.注意:对于碘过敏的患者,只能使用75%乙醇消毒60秒,待酒精挥发干燥后采血.细菌是干死的,不是淹死的皮肤消毒程序(三步法):培养瓶的消毒程序:1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。3.自然待干。4.将标本注入培养瓶内。5.颠倒混匀标本与肉汤,以避免血液凝集。(儿童采血量少,更应注意颠倒混匀)细菌是干死的,不是淹死的使用蝶翼针采血1皮肤消毒2培养瓶消毒3标注采血量4准备采血针5静脉穿刺6负压采血血培养瓶的接种顺序•如果用注射器采血,应先接种厌氧瓶避免空气进入。•如果用蝶形针采血,应先接种需氧瓶,以免装置里的空气送到厌氧瓶中。•如果抽取的血液少于推荐量,血液应先足量接种需氧瓶,剩余的血液应该接种在厌氧瓶中。我院常用血培养瓶采集标本前:于室温保存,切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使用。采集标本后:尽快送微生物室,如无法及时送检,应置于室温,不能置于冰箱或温箱,以免影响检出。树脂需氧瓶含溶血素厌氧瓶树脂儿童瓶分枝杆菌瓶及真菌瓶关于采血的一些问题:1、血培养采血建议从外周静脉采,不建议采动脉血,为什么?——对检出结果无明显差异,但动脉穿刺危险性较大2、常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血,为什么?——污染菌或定植菌的可能性较大,除非怀疑CRBSI3、如果需要从导管处取血,初段血或导管内的补液是否需要弃去?——不能弃去,以便于判断污染菌、定植菌或病原菌4、如果用注射器采血,采好后注入血培养瓶之前是否需要更换针头?——无需更换,对提升阳性率无统计差异,增加了针刺伤的几率结论:怀疑血流感染,应做血培养至少应采集2套血培养,每套包括需氧及厌氧培养每次应抽取足量的血液每一套血培养瓶应该从身体的不同部位采取所有的血培养瓶上都表明患者的情况(包括日期、时间、采样位置和诊断)