金黎明-第7章-巴比妥类镇静催眠药物的分析

药物分析PharmaceuticalAnalysis主讲教师：金黎明电话:[phone]E-mail:[e-mail]versity复习苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质与检查第四节含量测定第五节体内药物分析（自学）KEYWORDSepinephrinenon-aqueoustitrimetrysodiumnitrite下列苯乙胺类药物，可与三氯化铁试剂显翠绿色，再滴加氨试液即变紫色，最后变成紫红色的是A．肾上腺素B．盐酸甲氧明C．盐酸异丙肾上腺素D．盐酸克伦特罗E．盐酸苯乙双胍练习与思考下列苯乙胺类药物，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是A．硫酸苯丙胺B．盐酸甲氧明C．盐酸异丙肾上腺素D．盐酸克伦特罗E．盐酸苯乙双胍练习与思考练习与思考有三瓶药物分别为肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素，请采用适当的方法将三者区分开。肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是：A．水杨醛B．间氨基酚C．对氨基酚D．酮体E．苯甲酸练习与思考盐酸甲氧明中检查的特殊杂质是：A．酮体B．间氨基酚C．对氨基酚D．酮胺E．苯甲酸练习与思考ChP2010收载的苯乙胺类原料药可采用溴量法测定含量的有：A．盐酸去氧肾上腺素B．重酒石酸间羟胺C．盐酸麻黄碱D．盐酸甲氧明E．苯甲酸练习与思考练习与思考ChP2010收载的苯乙胺类拟肾上腺素药物中，除（）外，均要求进行有关物质检查，其中（）选择薄层色谱法，（）用纸色谱法，而其他药物均采用（）检查有关物质。盐酸克伦特罗盐酸去氧肾上腺素盐酸苯乙双胍高效液相色谱法练习与思考非水溶液滴定法测定苯乙胺类药物含量，常用的溶剂为（），滴定液为（）。当药物的碱性较弱，pKb为10-12时，宜选（）作为溶剂，pKb12时，应用（）作为溶剂。为了消除药物中盐酸对滴定的干扰，可加入过量的（）溶液。冰醋酸高氯酸冰醋酸与醋酐的混合溶液醋酐醋酸汞冰醋酸练习与思考ChP2010中，盐酸克伦特罗原料药采用亚硝酸钠法测定含量，用（）方法指示终点。永停滴定法练习与思考简述溴量法测定苯乙胺类药物的基本原理。第七章巴比妥类镇静催眠药物的分析第一节巴比妥类药物的结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质检查第四节含量测定第五节巴比妥类药物的体内药物分析（自学）第一节巴比妥类药物的结构与性质巴比妥酸的5，5－取代物1，5，5－取代物C2位硫取代物母核：巴比妥酸，丙二酰脲的结构CCNHCNHCOOOR1R2123456CCCONONCOH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONCOH5C2HH苯巴比妥(barbital)(phenobarbital)典型药物戊巴比妥CCCONONCONaC2H5CHCH2CH2CH3CH3H异戊巴比妥钠CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3(pentobarbital)典型药物(amobarbital)CCCONONCONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥钠(secobarbital)硫喷妥钠HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3典型药物(thipentalsodium)巴比妥类药物结构:丙二酰脲性质：丙二酰脲类反应应用：鉴别、含量测定1,3-二酰亚胺鉴别弱酸性苯环、丙烯基、S鉴别含量测定各有特性结构决定性质1，3-二酰亚胺基团，能发生酮式-烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离OR2R1HOONHNOR2R1HONNOR2R1HOONNOR2R1HOONNOH++H-H-H++pK1=8pK2=121.弱酸性CONHCNCOOHR1R2+NaOHCONHCNCOONaR1R2+H2O弱酸性弱碱性白色结晶易溶于有机溶剂易溶于水H+用于：分离、鉴别、检查和含量测定。1.弱酸性(1)巴比妥类药物的水解主要是酰亚胺基团的性质，与碱溶液共沸就可以水解生成氨气，生成的氨气可使红色石蕊试纸变蓝。反应式如下：CONHCNCOOHR1R2+5NaOH+2Na2CO3COONaR1R2+2NH32.水解反应(2)巴比妥类药物钠盐的水解本类药物钠盐的水溶性比较大，在吸湿的情况下也能水解。水解的速度与温度和pH值有关。室温和pH10以下时水解较慢，pH11以上随着碱度的增加水解速度也随之加快。OR2R1HONNONaR2R1R2R1CCOONaCONHCONH2CHCOONa+2NH3H2OH2O3.与金属离子的反应（丙二酰脲基团）(1)与Ag+的反应可溶性一银盐不溶性二银盐白色↓CONHCNCOCR1R2ONa+AgNO3+Na2CO3CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg(2)与Cu2+的反应巴比妥类+铜吡啶试液吡啶紫色或紫色↓硫喷妥钠+铜吡啶试液吡啶绿色NCCOCONNHCOR1R2CCOCONNHCOR1R2CuNSS(3)与Co2+的反应在无水的条件下进行，无水甲醇或乙醇。钴盐为醋酸钴、硝酸钴或氧化钴；碱以有机碱为好，一般采用异丙胺。紫堇色(4)与Hg2+的反应NHNOOHR1R2OOR2R1HOONNOR2R1ONN+Hg(NO3)2-HNO3HgNO3HgNO3HgNO3NNOR1R2O+NH3+H2OHgOHNNOR1R2OOHOHONH4-++HNO3白色氨试液中溶解4.与香草醛的反应丙二酰脲基团中氢比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。加乙醇后，其反应产物可转变为紫色→蓝色。A.H2SO4液(0.05mol/L,未电离)B.pH10碱液(一级电离)C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离)巴比妥类药物的紫外吸收光谱λ(nm)2902702502300.51.01.5AABC1,5,5-三取代巴比妥类药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。5.紫外吸收光谱特征硫喷妥的紫外吸收光谱HCl溶液(0.1mol/L)NaOH溶液(0.1mol/L)5.紫外吸收光谱特征6.薄层色谱行为特征一般采用对照品比较法，要求供试品主斑点应与对照品斑点一致。7.显微结晶（1）药物本身的晶型巴比妥类药物的酸性水溶液可析出相应巴比妥类药物的特殊结晶。巴比妥：长方形苯巴比妥：球形→花瓣状巴比妥苯巴比妥硫酸铜-吡啶试液十字形紫色结晶浅紫色细小不规则的或类似菱形的结晶（2）反应产物的晶型二、鉴别试验（一）丙二酰脲鉴别反应（二）特征基团反应（三）特征熔点行为（四）吸收光谱特征(一)丙二酰脲鉴别反应这一鉴别试验已经收载在中国药典附录中的“一般鉴别试验”项下。包括银盐反应和铜盐反应，分别生成沉淀和呈色反应。（二）特征基团反应1.利用硫元素的鉴别试验NHNOOSNaH3CCH3H3C+Pb2+NaOHNHNOOSH3CCH3H3C2PbPbS硫代巴比妥类与巴比妥类的区别白色黑色（二）特征基团反应2.利用不饱和取代基的鉴别试验司可巴比妥钠原理：含丙烯基，可发生加成或氧化反应OHONNNaOCH2CH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO+I2II（碘、溴）（高锰酸钾）①与碘试液反应（二）特征基团反应3.利用芳环取代基的鉴别试验黄色苯巴比妥423SOHKNOa.硝化反应b.硫酸-亚硝酸钠反应苯巴比妥与NaNO2-H2SO4反应生成橙黄色→橙红色c.甲醛-硫酸反应苯巴比妥与甲醛-H2SO4反应生成玫瑰红色产物。区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。(三）特征熔点行为巴比妥类的钠盐＋酸→游离巴比妥类药物↓→过滤→洗涤→干燥→测熔点（四）吸收光谱特征一种有效而可靠的定性分析手段。《中国药典》收载的巴比妥类药物几乎都采用红外分光光度法（标准图谱对照法）作为鉴别手段。三、特殊杂质检查特殊杂质：在特定药物的生产和贮存过程中引入的杂质。药物中特殊杂质的检查主要是根据药物和杂质在物理、化学性质上的差异来进行的。1.苯巴比妥的特殊杂质检查OHCl[]ONa[],CH3ONaC=OH2NH2N)((I)C2H5-C[]C2H5BrCOOC2H5COOC2H5COOC2H5COOC2H5-CHHCl[],C2H5ONaOC2H5OC2H5O=CCOOC2H5COOC2H5-C=C-ONa-CH2COOC2H5C2H5OH,H2SO4CH2CONH2NHNOHOH3CH3COHONN[水解]酯化[]，缩合酸化[]，[]消除乙酰化环合酸析乙酰化主要是控制副产物苯基丙二酰脲。苯基丙二酰脲是由于中间体（Ⅱ）的乙基化反应不完全，而与脲素缩合生成的。其酸性比苯巴比妥强，能使甲基橙指示剂呈红色。方法：在一定量苯巴比妥供试液中，加入甲基橙指示剂不得显红色（1）酸度（指示剂法）NHNOOOHHC6H5（2）乙醇溶液的澄清度主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性杂质中间体Ⅰ杂质在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性进行检查。方法：溶液应澄清供试品加热回流乙醇min3ml5g0.1（3）中性或碱性物质中性或碱性物质是由中间体（Ⅰ）形成的酰胺、酰脲或分解产物等杂质，不溶于氢氧化钠试液但溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，溶于氢氧化钠试液，故采用提取重量法测定其含量。min1g0.1ml255mlOHml10NaOH2振摇供试品乙醚mg3h1105ml/53残渣过滤醚层℃干燥次次水洗（杂质）2.司可巴比妥钠的特殊杂质检查+HBrNaOCH2[]NaOH,C2H5ONa,CH3COCH3CH3CHBrCH2Br,NaOH[]CH3CH3NNOHOCH3CH3NNOHOHOHOHH[]+HH2NCONH2,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H5HCCH3CH3CH2CH2CH[]CH3CH2CH2CHCH3,C2H5ONaCOOC2H5COOC2H5CH2OHONNCH3CH3CH3CH3CH2NaONNOHO缩合环合丙烯化成盐（1）溶液的澄清度此项检查主要是控制水不溶性杂质，巴比妥类药物的钠盐极易溶于水，因此本品的水溶液应澄清，否则表明含有水不溶性杂质。需注意的是，因本品的水溶液易与空气中的二氧化碳作用，而析出司可巴比妥，故进行该项目检查时，溶解样品的水应新沸放冷以消除水中二氧化碳的干扰。2.司可巴比妥钠的特殊杂质检查（2）中性或碱性物质检查的杂质是合成过程中产生的中性或碱性副产物以及司可巴比妥钠的分解产物，如酰脲（Ⅰ）、酰胺（Ⅱ）类化合物。NaOCH2CH3CH3NNOHOCH2=CHCH2CH3CH2CH2CHCONHCONH2COONaH2OCCH3CH2=CHCH2CHCONHCONH2CH3CH2CH2CHCH3CH3CH3CH2CH2CHCH2=CHCH2CHCONH2(Ⅰ)(Ⅱ)2.司可巴比妥钠的特殊杂质检查四、含量测定银量法溴量法巴比妥类药物的含酸碱滴定法量测定方法紫外分光光度提取重量法HPLC法、GC法电泳法（一）银量法优点：操作简便，专属性较强。缺点：受温度影响较大；以溶液出现浑浊来指示终点难以观察。1.原理：巴比妥类一银盐二银盐↓Na2CO3AgNO3终点：电位法（Ag－玻璃电极系统）AgNO3司可巴比妥钠含不饱和键，与溴定量地发生加成反应NaOCH2CH3CH3NNOHOOHONNCH3CH3CH2NaO+Br2BrBr（定量过量）Br2+2KI2KBr+I2（剩余）I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6（二）溴量法近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，将滴定的结果用空白试验校正呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。常用的方法如下：1.在水－乙醇混合溶剂中滴定基于本类药物在水中的溶解度较小，滴定时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行，这样可避免反应中产生的弱酸盐易于水解而影响滴定终点。常以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。（三）酸碱滴定法（酸量法）2.在胶束水溶液中滴定表面活性剂是一种所谓“