防治药剂对小菜蛾内分泌干扰效应研究

福建农林大学硕士学位论文防治药剂对小菜蛾内分泌干扰效应研究姓名：刘文静申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：顾晓军;魏辉20090401防治药剂对小菜蛾内分泌干扰效应研究作者：刘文静学位授予单位：福建农林大学相似文献(10条)1.期刊论文付丽君.尤民生.戴小华小菜蛾感染球孢白僵菌后血淋巴游离氨基酸的测定-华东昆虫学报2001,10(1)通过高效液相色谱(HPLC)对感染球孢白僵菌后小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量进行测定,结果表明染菌后小菜蛾幼虫体内氨基酸含量明显低于对照组,主要是由于菌株在虫体内营养生长消耗了虫体内的养分所致;小菜蛾幼虫体内具有菌株营养生长所必需的氨基酸,因此可以认为小菜蛾是白僵菌的敏感寄主;各处理组间各种游离氨基酸在量上存在一定的差异,是由于不同发育阶段的虫体与菌株及不同类型菌株营养生长所必需的游离氨基酸含量不同所造成的.2.学位论文张志春多胺对小菜蛾行为和卵黄蛋白合成的影响2006多胺（Polyamines）如腐胺（putrescine）、亚精胺（spermidine）及精胺（spermine）是一类带正电荷的小分子脂肪族化合物，广泛存在于原核和真核细胞内。目前的研究表明，多胺对生物大分子的合成，细胞的生长、分化等有重要的调节作用，可参与调节昆虫的生长发育等多种生理过程。但由于昆虫生理过程及多胺代谢过程的复杂性，多胺对昆虫生理过程的调节机理还不清楚。因此，研究多胺在小菜蛾行为及卵黄蛋白合成中的作用，对于进一步明确多胺生理功能，阐明多胺参与昆虫生理过程的机理具有重要意义。本文以小菜蛾PlutellaxylostellaL.为研究对象，通过行为选择反应、触角电位（EAG）反应以及触角可溶性蛋白变化的研究，探讨了多胺在小菜蛾行为选择过程中的功能；在建立了昆虫体内多胺的高效液相色谱（HPLC）测定方法的基础上，研究了外源多胺和激素与小菜蛾蛹期多胺代谢的相互关系；最后通过电泳和免疫技术，分析了多胺和激素与小菜蛾卵黄蛋白合成之间的关系。主要研究结果如下：（1）多胺对小菜蛾行为的影响与对照蒸馏水相比，小菜蛾在交配前和交配后对精胺（spm）、亚精胺（spd）和腐胺（put）这3种多胺均有明显的趋性反应，但对3种多胺两两之间的选择则无显著差异；在对3种多胺和甘蓝BrassicaoleraceaL叶汁之间的选择中，除未交配雄蛾对腐胺有明显的趋性（与甘蓝叶汁比较）和交配后雌蛾对甘蓝叶汁有明显的趋性（与精胺比较）外，其他均没有显著差异。结果表明多胺对小菜蛾具有引诱作用。与对照蒸馏水比较，小菜蛾在交配前和交配后对spm、spd和put这3种多胺均有明显的EAG反应；但与甘蓝叶汁相比，除对0.1％spd的EAG反应和未交配小菜蛾雌蛾对0.1％put的EAG反应明显较高，对其它浓度多胺的EAG反应明显较低；对不同浓度多胺之间的比较发现，小菜蛾对低浓度（0.1％）多胺的EAG反应明显高于对高浓度（1％）多胺的EAG反应。3种多胺（put、spd和spm）和多胺抑制剂2-氟甲基鸟氨酸（DFMO）处理？明显改变了未交配和己交配小菜蛾对甘蓝叶汁以及不同浓度多胺（put、spd和spm）的EAG反应。与spm和put相比，spd对小菜蛾触角活性的影响最大。与丙酮对照相比，多胺和DFMO处理后，雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应也明显改变，put和spd处理后明显减弱了雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应，DFMO稍微减弱，而spm则增强了雄性小菜蛾对雌性性信息素的EAG反应。进一步研究表明，3种多胺和DFMO处理后影响小菜蛾触角可溶性蛋白的合成，而且经过spd处理后，雌性小菜蛾触角中出现了一条110kD左右的特异带。（2）多胺和激素对小菜蛾蛹期多胺含量的影响建立了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱（HPLC）快速测定昆虫体内多胺含量的方法：以C〈'18〉（250×4.6mm，5μm）为固定相，甲醇和水为流动相，梯度洗脱，柱温40℃，流速1mL／min，荧光检测波长：激发波长（EX）:280nm，发射波长（Em）:515nm，测得put、spd和spm3者回收率分别为98.7％、99.2％、97.8％，回归方程线性良好（r值均大于0.99），分析时间为16min。小菜蛾蛹期3种多胺（put、spd和spm）的代谢呈现明显的动态变化；外源多胺及DFMO处理后对蛹体内3种多胺的代谢产生了明显的影响，进一步分析表明这种影响具有一定的时效性；保幼激素类似物法尼醇和20-羟基蜕皮酮（20E）对蛹体内3种多胺的合成具有一定的促进作用，而在相同的发育阶段，20E的促进作用总体上要高于法尼醇的效应。（3）多胺对小菜蛾产卵量的影响饲喂put、spd和spm水溶液后，小菜蛾产卵量明显低于蔗糖对照，但明显高于不取食任何食物的产卵量；饲喂put和蔗糖的混合溶液后，小菜蛾产卵量极显著高于蔗糖对照，spd和蔗糖混合溶液及spm和蔗糖混合溶液则显著高于蔗糖对照，且处理组各时期的产卵量均高于蔗糖对照，产卵期均延长。（4）多胺对小菜蛾卵黄蛋白合成的影响SDS-PAGE电泳实验证实，小菜蛾卵黄蛋白由2个120kD左右、1个80kD和1个65kD4个亚基组成；免疫反应证明，卵黄蛋白在雌性4龄幼虫和成虫中均存在，而在雄性小菜蛾幼虫、蛹、成虫以及雌性3龄幼虫体内均不存在，说明小菜蛾卵黄蛋白合成起始于4龄幼虫。建立了小菜蛾卵黄蛋白的火箭免疫电泳检测法，在此基础上研究了多胺、保幼激素类似物法尼醇和20E对小菜蛾卵黄蛋白合成的影响。结果表明：3种多胺（put、spd和spm）处理后明显促进了小菜蛾卵黄蛋白的合成，在大部分发育阶段，处理组本体内卵黄蛋白的含量明显高于对照丙酮，且峰值提前；而经DFMO、法尼醇和20E处理后明显抑制了小菜蛾卵黄蛋白的合成，在大部分发育阶段处理组体内卵黄蛋白向含量均低于对照丙酮，且迅速合成时间明显推后。3.学位论文王楠外源多胺对小菜蛾生长发育及体内多胺含量的影响2007多胺(polyamines)是指含有两个或两个以上氨基的化合物如腐胺(putrescine)、亚精胺(spermidine)及精胺(spermine)是一类带正电荷的小分子脂肪族化合物，广泛存在于原核和真核细胞内。前人的研究表明，多胺对生物大分子的合成，细胞的生长、分化等有重要的调节作用，可参与调节昆虫的生长发育等多种生理过程。但由于昆虫生理过程及多胺代谢过程的复杂性，多胺对昆虫生理过程的调节机理还不清楚。因此，研究多胺对于小菜蛾幼虫生长发育、体内保护酶及多胺含量的影响，对于进一步明确多胺生理功能，阐明多胺参与昆虫生理过程的机理具有重要意义。本文以小菜蛾PlutellaxylostellaL．为研究对象，在研究3种常见多胺与小菜蛾幼虫取食量及生长发育影响的基础上，系统分析了多胺与小菜蛾保护酶活力以及外源多胺和激素类似物对小菜蛾幼虫体内多胺代谢之间的相互关系。主要研究结果如下：(1)多胺对小菜蛾幼虫取食量的影响利用坐标纸面积法测定了多胺处理后小菜蛾3龄幼虫的取食量。结果表明，经过0.5％，1％和2％浓度的腐胺(put)、亚精胺(spd)和精胺(spm)3种多胺在处理后，小菜蛾3龄幼虫的取食量极显著高于对照蒸馏水处理；在本实验条件下，同一种多胺的不同浓度对小菜蛾幼虫的取食量无明显影响；而在相同的浓度条件下，在处理前的24h，3种多胺之间无明显差异；但在24h之后，经过spm处理后小菜蛾3龄幼虫的取食量极显著高于put和spd处理。(2)多胺对小菜蛾幼虫生长发育的影响在室内条件下研究了不同多胺0.5％，1％和2％浓度处理后对小菜蛾幼虫存活，化蛹率，蛹重及羽化率的影响．结果表明，经腐胺处理后，小菜蛾幼虫的存活率和化蛹率极显著或显著高于对照蒸馏水处理组；亚精胺处理后，其存活率和化蛹率显著高于对照蒸馏水处理组；但腐胺和亚精胺处理后对小菜蛾的蛹重和羽化率以及精胺处理对小菜蛾的存活率，化蛹率，蛹重和羽化率均无显著的影响。(3)多胺对小菜蛾幼虫体内保护酶活性的影响研究了0.5％，1％和2％浓度的不同多胺处理后对小菜蛾幼虫体内保护酶系活性的影响。结果表明，3种多胺(腐胺，精胺，亚精胺)对小菜蛾幼虫体内SOD、POD活力有明显的影响，表现为处理组SOD和POD活力显著或极显著高于对照；但对幼虫体内CAT活力却无明显的影响；同种多胺的不同浓度对保护酶活力的影响也不存在显著差异：但同一浓度3种多胺处理之间不同时间段的SOD和POD酶活力的影响则存在一定的差异。(4)多胺和激素对小菜蛾幼虫体内多胺含量的影响利用高效液相色谱(HPLC)测定了多胺，多胺抑制剂DFMO及激素类似物法尼醇和20E处理后，小菜幼虫不同发育阶段体内及不同组织内多胺的含量。结果表明小菜蛾幼虫3种多胺(put、spd和spm)的代谢在不同的发育阶段呈现明显的动态变化；外源多胺及多胺抑制剂DFMO处理后对幼虫体内3种多胺的代谢产生了一定的影响，进一步分析表明这种影响具有一定的时效性；保幼激素类似物法尼醇和20-羟基蜕皮酮(20E)对幼虫体内3种多胺的合成具有一定的促进作用，在大部分的时间段激素类似物处理后幼虫体内3种多胺明显高于对照组。小菜蛾幼虫血淋巴，脂肪体，中肠及脑不同组织中均含有多胺，其中以血淋巴中的含量为最高。经过不同处理后，小菜蛾幼虫血淋巴中的spd和spm均显著低于丙酮对照组(P0.05)，其他组织内的多胺含量与丙酮对照相比无显著差异。4.期刊论文傅丽君.FULi-jun小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量测定-微量元素与健康研究2006,23(2)通过高效液相色谱(HPLC)对感染球孢白僵菌后小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量进行测定,结果表明小菜蛾幼虫血淋巴中含有17种游离氨基酸,其中蛋氨酸、苏氨酸、赖氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸的总浓度较高,为主要氨基酸.小菜蛾幼虫体内具有虫生真菌菌株营养生长所必需的氨基酸.5.学位论文郑小华糖基苯并吡唑杀虫剂的合成及其输导性2009氟虫腈是第一个商品化的苯并吡唑类杀虫剂，为了增加氟虫腈的水溶性和获得具有内吸输导特性的氟虫腈衍生物，根据导向农药理论和活性亚结构的拼接理论，以植物体内存在的单糖为导向基团，以氟虫腈的衍生物为活性基团，构建具有运输积累的导向农药分子。本文以氟虫腈为母体化合物，通过加成、消除等反应得到8个未经报道的化合物，其中4个氟虫腈类似物：化合物zhc—1、RCOBr、RCON3和铵盐物质REA。以植物体内天然存在的单糖为导向基团合成了4个单糖—氟虫腈偶合物——糖基氟虫腈：RGK、RAraK、RfruK和RbioK。化合物结构经1HNMR、13CNMR和MS确认，并将REA进行了单晶培养及X衍射测定。根据化合物空间结构和基团活性，初步分析了8个化合物形成的可能机理；将以上8个化合物进行生物活性测定，确定了对小菜蛾和亚洲玉米螟的毒力；并根据生物活性的结果讨论了化合物结构与生物活性的关系，最后检测了3个化合物在大豆和烟草植株体内的输导能力和积累性。生物活性测定结果表明：氟虫腈、zhc—1、RCOBr、RCON3、REA、RGK、RAraK、RfruK和RbioK对小菜蛾3龄幼虫48h的胃毒活性LC50值分别是12.34μg/mL、7.36μg/mL、48.32μg/mL、18.43μg/mL、500μg/mL、500μg/mL、500μg/mL、500μg/mL和500μg/mL；对亚洲玉米螟3龄幼虫48h的胃毒活性LC50值是4.34μg/mL、1.76μg/mL、8.29μg/mL、4.59μg/mL、20.66μg/mL、38.34μg/mL、224.94μg/mL、22.67μg/mL和25.21μg/mL。生物活性测定表明，化合物zhc—1在结构上属于希夫碱(Schiffbase)，与母体基团共同形成了一个大的共轭体系，其生物活性效果优异，具有很好的研究开发性：化合物RCOBr和RCON3的生物活性与母体氟虫腈相当，其结构具有良好的衍生潜力。氟虫腈与导向基团D—葡萄糖、D—阿拉伯糖、D—果糖和D—核糖偶联后，几乎完全丧失了对小菜蛾的毒杀活性，对亚洲玉米螟的毒杀活性也有所下降，推