黑木耳多糖的分离纯化及药理作用生物技术及应用

1江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）SNL/QR7.5.4-3黑木耳多糖的分离纯化及药理作用专业生物技术及应用学生姓名邹广海班级06生物技术及应用（1）学号061401116指导教师刘远完成日期2009年6月3号附1：2成绩评议学号061401116姓名邹广海题目黑木耳多糖的分离纯化及药理作用指导教师建议成绩：评阅教师建议成绩：答辩小组建议成绩：院答辩委员会评阅意见及评定成绩：答辩委员会主任签字（盖章）：年月日附2：3毕业设计（论文）任务书姓名邹广海学号061401116班级06生物技术及应用（1）题目黑木耳多糖的分离纯化及药理作用设计(论文)主要内容1.讲述了黑木耳多糖各种提取分离纯化的方法2.综述了多糖的药理作用重点研究问题1.黑木耳多糖的粗提方法2.黑木耳多糖的分离方法3.黑木耳多糖的纯化方法4.黑木耳多糖的药理作用糖主要技术指标粗提、分离、纯化粗提其它要说明的问题黑木耳多糖的作用机理还没完善现阶段对黑木耳多塘的分子量测定研究很少指导老师意见指导教师签字：年月日附3：4指导教师意见对论文的简短评价：1.指出论文存在的问题及错误2.对创造性工作评价3.建议成绩优良中及格不及格指导教师签字年月日评阅教师意见对论文的简短评价：1.指出论文存在的问题及错误2.对创造性工作评价3.建议成绩优良中及格不及格评阅教师签字年月日附4：5答辩小组评议意见学号061401116姓名邹广海题目黑木耳多糖的分离纯化及药理作用答辩小组意见：1、对论文的评价2.建议成绩等级优良中及格不及格3.需要说明的问题答辩小组长签字年月日江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）第1页1摘要：本文讲述了黑木耳多糖的常用粗提方法和特殊粗提方法。介绍了黑木耳粗多糖经去蛋白和脱色处理后，最后分别采用沉淀法，色谱柱法，有机溶剂浸提法，膜分离法纯化多糖。综述了黑木耳多糖的保健药理作用。关键词：黑木耳多糖；提取；分离纯化；保健药理.Abstract:ThisarticledescribesthecommonlyusedAuriculariapolysaccharidecrudeextractcrudemethodsandspecialmethods.IntroducedbyAuriculariaPolysaccharidetoproteinandafterdecolorization,respectivelyFinally,theuseofprecipitation,columnmethod,organicsolventextraction,membraneseparationandpurificationofpolysaccharide.Auriculariaauriculapolysaccharidereviewedpharmacologicaleffectsofhealthcare.Keywords:Auriculariaauriculapolysaccharide;extraction;isolationandpurification；Healthpharmacology江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）第2页2目录1引言..............................................................32黑木耳的营养价值..................................................33黑木耳多糖的提取、分离和纯化......................................33.1黑木耳多糖的粗提...............................................33.1.1热水浸提法................................................33.1.2稀碱浸提法................................................33.1.3酸浸提法..................................................43.1.4酶解提取法................................................43.1.5超声波提取法...............................................43.1.6微波辅助提取法.............................................43.1.7超临界流体萃取............................................43.2黑木耳多糖的分离.............................................43.2.1Sevag法..................................................53.2.2三氟三氯乙烷法.............................................53.2.3三氯醋酸法................................................53.3脱色.........................................................53.4黑木耳多糖的纯化.............................................53.4.1沉淀法...................................................53.4.2凝胶柱色谱法..............................................53.4.3纤维素阴离子交换剂柱色谱法.................................63.4.4有机溶剂浸提法............................................63.4.5膜分离...................................................63.4.5.1超滤.............................................63.4.5.2微滤..............................................64黑木耳多糖的药用保健作用...........................................74.1调节免疫功能.................................................74.2降血脂........................................................74.3降血糖........................................................74.4抗血栓........................................................74.5抗肿瘤........................................................74.6抗衰老作用....................................................74.7对动物运动机能的影响..........................................85讨论...............................................................85.1多糖提取方法比较.............................................85.2多糖分离过程有关问题..........................................85.2.1去蛋白方法的比较............................................85.2.2脱色处理注意点.............................................9参考文献............................................................10致谢.................................................................11江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）第3页31引言黑木耳(Auriculariaauriculajudae)营养丰富,食味鲜美,不但是营养价值很高的食用菌,而且是药用价值较高的药用菌,是世界公认的保健品。我国黑木耳资源丰富,为开发应用黑木耳提供了有利的条件。药用子实体,具有益气强身、补气血、润肺、止血、止痛、通便等功效。用于治疗高血压、血管硬化、月经、白带过多、便血、子宫出血、反胃多痰、吐血、便秘等[1]。吴瑞宪[2]对黑木耳的营养成分做了全面的分析,发现它富含大量的糖类和蛋白质,同时也是一种钙和铁含量较高的食品。大量研究表明黑木耳作为“生物应答效应物”(BiologicalResponseModifier,简称BRM)具有多种生理功能,而这些重要的生理功能都是与其多糖组分密切相关的。因此,黑木耳多糖备受人们青睐,对其研究也已成为近年来分子生物学、医药、食品科学等领域研究和开发应用的热点。本文就黑木耳的有效成之一—黑木耳多糖[3]的提取、分离纯化、及近年来国内外的研究进展作一综述。2黑木耳的营养价值现代食品分析表明，每100g干黑木耳中，含蛋白质10.6g、脂肪0.2g、碳水化合物65.5g、粗纤维7.0g、钙357mg、铁185mg、磷201mg及多种维生素和磷脂。蛋白质含量相当于肉类，钙含量是肉类的约20倍，铁含量为各种食品之最，是一种高蛋白质低脂的营养食品，因此，称为“素中之荤，菜中之肉”。黑木耳质地细嫩，滑脆爽口，味美清新，备受人们的喜爱，尤其适合不宜吃大荤大肉的高血压、高血脂和冠心病等患者食用，并可起到滋补强壮、扶正固本的保健功效[2]。3黑木耳多糖的提取、分离和纯化3.1黑木耳多糖的粗提黑木耳多糖是一种天然药物活性成分,为细胞内容物,提取时需要进行细胞破碎,从而使细胞壁将多糖成分释放出来。因而细胞破壁技术也就成了提取生物活性成分的关键。目前从黑木耳子实体中提取黑木耳多糖的技术常用的主要有:热水浸提法、碱浸提法、酶法、超声波法、微波法以及复合法。3.1.1热水浸提法热水浸提法是一种国内外常用的用于提取真菌类多糖成分的传统方法。陈艳秋等[3]采用热水浸提法对黑木耳子实体水溶性多糖的提取工艺进行了深入研究,并得出如下结论:黑木耳子实体干粉与水之比为1:50,在90℃水浴中抽提3.5h,提取液用70%乙醇醇析,在此工艺条件下多糖得率最高。之后,林敏等[4]同样采用此法提取黑木耳中的水溶性多糖,探索热水提取黑木耳多糖的最佳工艺条件,得出了与陈艳秋等人相近的结果。此法所需提取剂蒸馏水经济易得,但是需经多次浸提,得率仍然很低,而且费时费料。3.1.2稀碱浸提法包海花等[5]采用黑木耳粉用不同的提取剂(蒸馏水和1mol/LNaOH溶液)在其它条件相同的情况下对黑木耳进行提取时发现,后者的多糖含量比前者高出近3倍,且能节省时间和减少原材料及试剂的消耗。虽然碱处理使多糖含量增加,但寡糖含量则相对减少,且提取后液江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）第4页4体需要中和,程序繁琐[6]。3.1.3酸浸提法[7]:黑木耳置0.3mol/LHCl溶液中,于50℃加热1.5h,其他步骤同“热水浸提法”,得黑木耳多糖8.4g,收率为16.8%。3.1.4酶解提取法近年来,一些学者致力于酶法提取食药用真菌多糖的