消毒剂使用和消毒效果验证.

消毒剂使用及效力验证2007.42能消除以细胞繁殖形态出现的微生物污染的化学物质。消毒剂的习惯定义：3消毒剂的分类定义（USP291072）抗菌剂（Antiseptic)化学杀菌剂(ChemicalDisinfectant)清洁剂(CleaningAgent)消毒剂(Disinfectant)卫生洗涤剂(SanitizingAgent)杀孢子剂(SporicidalAgent)灭菌剂(SterilantAgent)4化学主份类别举例醛类杀孢子剂2％戊二醛醇类一般消毒剂，抗菌/病毒70%异丙醇、75％酒精含氯和次氯酸钠杀孢子剂0.5%次氯酸钠酚类一般消毒剂500µg/g氯甲酚、氯二甲酚臭氧杀孢子剂8％气体重量过氧化氢气态灭菌剂，液体杀孢子剂，抗菌剂4µg/g，10％～25％溶液，3％溶液替代缩二胍抗菌剂0.5%氯己定（洗必泰）过氧乙酸液态/气态灭菌剂0.2%，1µg/g环氧乙烷气态灭菌剂600µg/g季铵盐类一般消毒剂，抗菌剂200µg/g苯扎氯铵（洁尔灭）β-丙内酯杀孢子剂100µg/g5消毒剂配制按供应商的使用说明进行配制和储存纯化水、注射用水洁净室及相关受控环境使用，应进行除菌过滤。温度提高，杀菌效力增大。效力验证时，在常温下配制。6影响消毒剂效力的因素：pH温度，浓度材质和附着物质溶剂（水）接触时间微生物的类型和数量7消毒剂作用机理钝化胞内酶活性，影响细胞的正常代谢酚类阻断物质运输通道季铵盐类（＋电荷），附着于细胞膜特定部分（－电荷）破坏微生物细胞（膜）的结构和功能醛类、含氯、过氧化物8微生物对消毒剂的耐受性形成生物膜粘性多糖物质消毒剂的相互作用中和反应固有耐受性和概率残存致死剂量9微生物抗力由小到大排列一般为：细菌繁殖体真菌繁殖体真菌孢子病毒分枝杆菌细菌芽孢10消毒剂的选择需控制的微生物的类型和数量市售消毒剂的抗菌谱消毒剂的品牌浓度、使用方法和接触时间待消毒物体的材质和对消毒剂的兼容性可能影响杀菌效力的表面有机物数量反复使用，对设备表面的腐蚀程度对操作者的安全性和清洁剂/其它消毒剂的相容性交替使用方案和对产品的影响11消毒剂验证的目的：通过特定的微生物与某消毒剂在规定的使用浓度下，接触规定的时间后，对微生物进行培养、计数，考察消毒剂的消毒/杀菌效果。12消毒剂验证的内容：使用中稀释检测（use-dilutiontests)对不同浓度下，对消毒剂的效力进行筛选针对不同标准菌株和环境微生物，确认接触时间表面挑战试验（surfacechallengetests)使用标准菌株和典型环境分离微生物选择合适的浓度和接触时间，进行试验获得挑战微生物数量下降的对数值对使用新消毒剂前后环境微生物的检出频率和数量进行统计学评估（无菌生产区域、GMP要求）13消毒剂验证步骤：第一步：在实验室对代表细菌在规定的使用浓度和规定的作用时间进行确认。第二步：应用不同材质的载体，进行模拟试验第三步：完成验证报告，形成SOP。14验证用菌种：金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌、沙门氏菌、大肠埃希菌、枯草杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、环境分离菌。菌种选择的原则:代表性,普遍性,标准菌种。(环境中常见的污染菌)。菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。验证菌种：15挑战微生物(USP29)AOAC挑战菌典型环境分离菌杀菌剂：大肠埃希菌ATCC11229金黄色葡萄球菌ATCC6538铜绿假单胞菌ATCC15442杀菌剂：藤黄微球菌，表皮葡萄球菌，杰氏棒杆菌，泡囊假单胞菌杀真菌剂：白色念珠菌ATCC10231或2091产黄青霉ATCC11709黑曲霉菌ATCC16404杀真菌剂：产黄青霉，黑曲霉菌杀孢子剂：枯草芽孢杆菌ATCC19659杀孢子剂：球形芽孢杆菌，苏云金芽孢杆菌16准备性试验（一）选择适合的中和剂Letheen肉汤、D/E中和肉汤（酚类，季铵盐类）、TAT肉汤基础＋吐温20＋卵磷脂＋胰蛋白胨消毒剂中和剂醇类稀释或吐温80戊二醛甘氨酸和亚硫酸氢钠次氯酸钠硫代硫酸钠氯己定吐温80和卵磷脂氯化汞及其它汞制剂硫乙醇酸季铵盐类吐温80和卵磷脂酚类稀释或吐温80和卵磷脂17D/E中和肉汤（每升）配方胰蛋白胨5g酵母膏2.5g葡萄糖10g硫乙醇酸钠1g硫代硫酸钠6g亚硫酸氢钠2.5g吐温805g卵磷脂7g溴甲酚紫0.02g最终pH7.60.2于25℃18准备性试验（二）中和剂毒性将10～100CFU的微生物加入到中和剂中薄膜过滤，冲洗，培养，计数与菌液对照组比较，回收率应70％19准备性试验（三）中和效力将消毒剂和中和剂混合（记录时间）加入10～100CFU微生物薄膜过滤，冲洗，培养，计数与菌液对照组比较，回收率应70％20验证方法-薄膜过滤法菌悬液和消毒剂直接混合，在不同的时间间隔条件下过滤，培养后评价。21验证准备：-测试菌液准备增菌过夜，并调整至106～108CFU/ml-消毒剂稀释至规定浓度。分装10ml于若干无菌试管中；试管上标注消毒时间：如“1分钟组”，“5分钟组”，“10分钟组”或其他要求的时间段。-配制中和剂（分装100ml，300ml）22验证步骤（1）：-接种接种各验证菌种至盛有待验证消毒剂的试管（使接后浓度104CFU/ml)，混合均匀，并立即开始计时。-中和、过滤将消毒剂倾入100ml中和剂中，混合，稀释（如需要），过滤，然后用100ml中和剂清洗滤膜，滤过3次。-阳性对照用无菌水代替消毒剂，步骤同上。23验证步骤（2）：培养和计数取下滤膜放入规定的培养基平板，在规定的温度、时间培养后，记数。和阳性对照相比，微生物数量下降应至少3个对数值（细菌芽孢至少2个对数值）。24验证步骤（3）：表面挑战试验根据设施的实际情况，选择不同材质的载体。玻璃，不锈钢，塑料薄膜，乳胶，墙面涂料，地面材质接种，并确认实际数量接触杀菌、中和、过滤……25正确使用消毒剂（1）1.稀释消毒剂时应用纯化水、注射用水2.设备使用后作彻底清洁3.将环境常见菌列入验证范畴4.轮换使用不同的消毒剂，消毒剂间要用无菌水充分清洗26正确使用消毒剂（2）1.使用消毒剂的人员要接受相关的培训2.严格遵守“人流”、“物流”的途径3.消毒的SOP：配制、使用、纠正、防护等4.供应商的审核和确认27消毒剂的文件-标准操作规程SOP-消毒剂配制记录-消毒剂使用记录-消毒剂标签……消毒剂文件，应该等同与原始记录。28800-820-0865