影响酶活力的因素的曲线分析

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资源描述

11.催化剂加快反应速度的本质原因:降低反应活化能★反应活化能:反应物进入活化状态所需的能量。(类似于跨栏时栏的高度)(只调节能够反应的反应速度)催化剂能降低反应活化能,提高活化分子百分数,因此加快了反应速度。即:在催化反应中,只需较少的能量就可使反应物进入活化态。★某反应在不同情况下的反应速度不同,本质原因是反应活化能的不同。★酶与无机催化剂相比,活化能水平被降得更低,显示出高效性。自由能反应过程[活化分子]过渡态(活化态)初态反应物S平均能量水平较低终态产物P反应前后自由能之差酶催化过程的活化能(酶使活化能更低)非催化过程的活化能催化后活化能的减少值无机催化剂2比较:酶与无机催化剂相同点:①改变反应速度,但本身的质、量不变;【但是,所有酶都必须参与反应过程!】②只能催化热力学允许进行的反应;③加快v,缩短达到平衡的时间,但不改变平衡点;④降低活化能,使v加快。不同点:①高效性;②专一性(酶对底物);③多样性;④易变性;⑤反应条件的温和性;⑥酶活性受到调节、控制;⑦有些酶的活性需要辅助因子。3影响酶促反应速度的主要因素反应速率:单位时间内生成物的增加量,或底物的消耗量=酶活力=酶的催化效率底物浓度酶酶浓度酶活性温度抑制剂或激活剂等pH竞争性抑制可逆(降低酶活性,但不使酶变性)抑制剂作用机制(形成氢键)非竞争性抑制不可逆使酶永久性失活(抑制剂与酶共价连接)4酶活性易受多种因素制约,常用坐标图来表示.在解读坐标图题型时,要注意以下要点:●看坐标轴含义——了解两个变量的关系●看曲线走势——掌握变量的增减快慢特征与意义●看特殊点——理解特殊点的意义(起止点、拐点、交叉点)●看不同曲线的异同——理解曲线之间的内在联系与区别酶作用曲线5反应速度的测定:▲测定反应速度时,可以测定产物增加量或底物减少量。▲如果底物过量,则测定底物减少量不容易精确,而产物从无到有,便于测定,只要方法灵敏。据图分析回答:▲如何计算反应速度(v)?△浓度V==斜率t▲描述反应速度变化的特征:v只是在最初一段时间保持恒定,随着时间延长,v逐渐下降直到0。▲反应速度下降的原因是什么?底物浓度的降低,产物浓度的增加,pH或温度的变化等。产物浓度时间反应速度时间?最初阶段最初阶段6关于酶的常见曲线图【关注坐标轴的含义】1.催化剂加快反应速度的本质原因:降低反应活化能。2.开始时的反应物总量、酶浓度均不变。时间——产物浓度;时间——反应物浓度。每图再增加:①酶浓度增加一倍;②反应物浓度增加一倍。3.底物浓度——反应速度。再增加:①酶浓度增加一倍;②加入竞争性抑制剂;③非竞争性抑制剂4.酶浓度——反应速度。再增加:①底物浓度增加一倍;②温度降低10℃;③反应开始时加入一定量的不可逆抑制剂。5.温度——酶活性。再增加:①嗜冷微生物、嗜热微生物的酶【加酶洗衣粉、TaqDNA聚合酶】②人体内呼吸作用酶活性与环境温度;6.pH——唾液淀粉酶活性。再增加:①胃蛋白酶;②肠肽酶。7●描述曲线①的特征(分段、准确);解释曲线变化的原因(底物浓度降低,产物浓度增加,可能pH或温度发生变化等)●在①的基础上,酶浓度增加一倍的曲线【②】●在①的基础上,反应物浓度增加一倍的曲线【③】☆4条竖线提示:斜率、拐点的变化。①②③反应物浓度时间改变纵坐标含义●比较①与②●比较①与③产物浓度时间①②③2.开始时的反应物浓度、酶浓度均不变。时间——产物浓度;时间——反应物浓度。每图再增加:①酶浓度增加一倍;②反应物浓度增加一倍。8描述曲线特征:(当酶浓度、温度和pH恒定时)在底物浓度很低的范围内,反应速度与底物浓度成正比;继续增加底物浓度,反应速度增加转慢;达到最大后保持不变。解释:酶数量一定时,底物浓度越大,形成的酶—底物复合物越多;达到一定程度后,有限的酶全部与底物结合而达到饱和。BC段有限的酶被饱和,反应速度达到最大,再增加底物浓度,底物浓度并不影响酶的活性。底物浓度反应速率OABC···3.底物浓度——反应速度9②酶浓度增加1倍,曲线发生怎样的变化?如图的红色曲线。【理解走势、斜率、拐点等特征性变化】相同底物浓度下,酶浓度越高,形成的酶—底物复合物越多,v越大;酶浓度越高,使酶饱和需要的底物浓度越大。说出曲线几段的限制因素。③请举出两种能够影响这一曲线形状的因素。酶浓度、温度和pH等底物浓度反应速率OABC···思考:①限制OA段的因素是底物浓度;限制BC段的因素是酶浓度。10底物浓度反应速度酶浓度增加一倍;【红线,注意斜率和拐点变化】底物浓度反应速度温度或PH改变;【红线,注意斜率和拐点变化】113.底物浓度——反应速度(酶浓度不变)再增加:加入竞争性/非竞争性抑制剂O底物浓度反应速率②③①●竞争性抑制剂与底物竞争性地与酶的活性部位结合。它既与酶结合,又与酶分离,即酶与竞争性抑制剂的结合是可逆的。竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂与底物的相对浓度。增加底物浓度,使反应液中的底物分子%增大,进而使v不断接近vmax,即竞争性抑制剂可以通过增加底物浓度来降低抑制剂与酶结合的概率,以缓解抑制。因此②表示竞争性抑制剂加入后的情形,随底物浓度的增加抑制作用逐渐减弱并接近正常的最大反应速度。曲线③属于非竞争性抑制剂作用情形,类似于不可逆抑制剂霸占酶。因此,存在非竞争性抑制剂相当于降低了酶的浓度,曲线斜率变小,很快达到最大。12▲某些抑制剂能可逆地与酶结合和分离。可逆抑制剂可分为竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂。①竞争性抑制剂与底物结构相似,都结合在酶活性部位上,从而阻止酶与底物的结合。★可通过增加底物浓度而解除抑制。VVmax无抑制剂底物浓度加竞争性抑制剂●使v下降的原因:酶(E)与抑制剂(I)结合,使部分酶被抑制剂占据而不能再同时与底物结合,但EI不能生成产物。●增加底物浓度,使反应液中的底物分子%增大,进而使v接近vmax。【E总】=【E游离】+【ES】+【EI】●例如:喝酒能治疗甲醇中毒。因为甲醇与乙醇竞争性结合酶的活性部位。竞争性抑制剂竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂与底物的相对浓度。改变S/I的比值可证明之。抑制剂——能与酶结合并降低酶活性的分子13解读:加入竞争性抑制剂;【蓝线】底物浓度反应速度酶浓度限制vV受底物浓度限制底物浓度反应速度●竞争性抑制剂既与酶结合,又与酶分离。●竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂与底物的相对浓度。●增加底物浓度,使反应液中的底物分子%增大,进而使v不断接近vmax。●可通过增加底物浓度而解除抑制。竞争性抑制剂14②非竞争性抑制剂与底物结构毫无关系,其结合的部位不是酶活性部位,酶与非竞争性抑制剂结合后改变了活性部位的空间结构,使酶不能与底物结合。只要有非竞争性抑制剂存在,总有相应数量的酶不能与底物结合,损失“无法弥补”,结果与不可逆抑制剂的效果相似。加非竞争性抑制剂无抑制剂Vmax底物浓度Vmax变小●●非竞争性抑制剂“损失”掉的酶★非竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂的浓度。增加底物浓度并不能克服抑制。15解读:非竞争性抑制剂.【紫线】底物浓度反应速度酶浓度限制vV受【底物】限制●只要有非竞争性抑制剂存在,总有相应数量的酶被霸占而不能与底物结合,相当于降低了酶的浓度。●损失“无法弥补”,结果与不可逆抑制剂的效果相似。●非竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂的浓度。●增加底物浓度并不能克服抑制。底物浓度反应速度非竞争性抑制剂“损失”掉的酶16抑制剂【C1P60】17●有些酶必需在有激活剂的条件下才具有活性。下列是有关某种酶的实验,处理方式及结果如下表及图所示。根据结果判断,叙述不正确的是A.甲物质是该酶的激活剂B.35分钟后试管Ⅱ中底物已被消耗殆尽C.该酶在80℃的环境下已经失活D.该酶在中性环境中的活性比在弱碱性环境中高●如图表示某种酶在不同处理条件(a、b、c)下催化某反应时,反应物的体积和反应时间的关系,解读此图可获得的信息是A.a、b、c表示温度,则abcB.a、b、c表示酶的浓度,则abcC.a、b、c表示底物的浓度,则abcD.a、b、c表示pH,则abc18●青霉素为何能够阻止细菌的繁殖?青霉素为何对一般的人无害?但人又为何不能滥用抗生素?【阻止细菌繁殖的原因】:抑制细菌形成细胞壁的酶,即:是细胞壁合成酶的抑制剂。【无害的原因】:人没有合成细胞壁的酶。但青霉素对某些人来说是过敏原。【不能滥用】:①青霉素会杀死肠道中对人体有益的细菌,降低免疫力和维生素的供应;②增加了对病原菌的选择压力,加速了耐药性进化。●为何用含青霉素的选择培养基能筛选出酵母菌和霉菌等?青霉素是细菌细胞壁合成酶的不可逆抑制剂。真菌的细胞壁与细菌细胞壁的化学成分不同,合成细胞壁有关的酶也不同。青霉素对酵母菌和霉菌中合成细胞壁的酶不起作用。●不可逆抑制剂如很多毒气和有机磷农药能对乙酰胆碱酯酶产生不可能抑制作用,一旦被抑制,肌肉受到连续刺激将处于永久收缩状态。19酶浓度反应速率4.酶浓度——反应速度曲线解读::在底物足够大(足以使酶饱和),而又不受其他因素影响下,v与酶浓度成正比。酶浓度反应速度再增加下列曲线:①②③①底物浓度增加一倍;②温度降低10℃;③反应开始时加入一定量的不可逆抑制剂。20③反应开始时加入一定量不可逆抑制剂,使部分酶失活,当加入的酶量使重金属离子完全与酶结合后,继续加入的酶开始表现酶活力,此时v与酶浓度变化的直线关系不变。④温度降低10℃酶浓度反应速度②底物浓度增加1倍①底物浓度低③开始时加入不可逆抑制剂解释曲线①:相同底物浓度下,酶浓度与v成正比。因为:酶浓度越高,形成的“酶—底物”复合物越多④温度降低10℃,分子运动速度减慢,与酶结合的底物减少,v减慢。②底物浓度增加1倍,相同酶浓度下形成的“酶—底物”复合物越多21温度影响分子运动。温度高,则反应物自由能提高,与酶的接触机会多。但温度过高,酶变性失活。(超过60℃,大多数失活)思考:酶的最适温度是个体生长的最适温度吗?不一定。不同的酶对生长所起的作用可能不同,有的甚至起抑制或破坏作用。人体温的相对恒定有何意义?体温的相对恒定对于维持内环境稳定,保证新陈代谢等生命活动正常进行的必要条件。5.温度——酶活性解释①:较低温度范围内,温度越高,分子运动速度越快,与酶结合的底物越多,v越大。温度过高,酶逐渐失活。曲线终点则为0,因为高温使酶变性失活;但曲线起点不为0,因为低温下酶活性弱但不变性。温度酶活性曲线在最适温度两侧不对称,因为酶对高温很敏感。22温度酶活性●●●耗氧量/产热量/代谢强度203040温度(℃)温度酶活性嗜冷微生物,如加酶洗衣粉中的酶嗜热微生物如:TaqDNA聚合酶人体内细胞的呼吸作用酶活性与环境温度的关系人离体细胞的呼吸作用酶活性与环境温度的关系23●为何酸雨能杀死很多水生生物?酸雨改变了水环境的pH,影响了水生生物细胞内酶的活性和细胞膜的稳定性,甚至使包括酶在内的所有蛋白质变性失活,细胞死亡。6.pH——酶活性2468pH酶活性唾液淀粉酶肠肽酶胃蛋白酶●添加胃蛋白酶和肠肽酶(胰蛋白酶)的相应曲线。●解释唾液淀粉酶活性曲线:过酸、过碱都不可逆破坏酶的空间结构,使酶变性失活。●胃蛋白酶在小肠腔中能发挥催化作用吗?不能。因为小肠腔中的碱性环境使胃蛋白酶变性失活。像其它蛋白质一样,胃蛋白酶被胰蛋白酶和肠肽酶分解,最终变成氨基酸。●使酶变性失活的因素主要有:强酸、强碱、高温、紫外线、金属离子等【注意温度、pH与酶活性关系的异同】24●胰蛋白酶作用于一定量的某种物质(底物),温度保持37℃,pH保持在最适值,生成物量与反应时间关系如下图。(1)该酶作用的底物是蛋白质。(2)在140分钟后,曲线变成水平,这是因为底物量一定,底物已被消耗尽。(3)若增加胰蛋白酶浓度,其他条件不变,请在原图上画出生成物量变化的示意曲线。见上图(4)若酶浓度和其他条件不变,反应液pH值由2逐渐升高到10.则酶催化反应的速度将不变,原因是在pH2时酶已经失活。(5)右图中能正确表示胰蛋白酶对底物的分解速度和温度关系的是C25◆下左图表示某有机物加入相应的水解酶后,置于0℃至80℃环境中,有机物被分解的总量与温度的关系。据图判断把这

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