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2002年武汉大学935分子生物学考研真题科目名称：分子生物学科目代码：935一、填空：（每空1分，共40分）1．测定蛋白分子量的主要方法是（），而要较准确测定DNA分子量的方法是根据DNA分子量的大小而采取不同的方法，分子量＜5×106时用，分子量＝(5－100)×106时用（），分子量大于100×106时用（）。2．长度为20um的DNA分子，其长与宽的比是（），该DNA分子含有（）碱基对。3．细菌中，体内DNA重组需要RecA、RecB参加，RecA起（）作用，RecB起（）作用。4．许多蛋白质能解开DNA双螺旋，32-prote重要性质（）和（），所以能使DNA变性。5．Meselson-Stahl实验中用的E.coli长时间在15N中培养后转入14N中。转入14N培养基中之后，1/2、1世代时，总DNA中15N15N，15N14N，14N14N的比例如下：（本题共两分）6．原核生物转录水平的调控方式主要有①（）②（）③（）和④（）。7．一个plasmid载体含有一个大肠杆菌Lac操纵子的promotor-operator和外源基因，则这个基因的表达可以这样来控制，向培养基加入（）则转录开始，要使转录停止，可以加入（）。8．紫外线诱导的胸腺嘧啶二聚体的修复可以通过四种途径进行，它们是（）、（）、（）、和（）。其中（）和（）是对模板进行修复，而（）修复引起突变。9．在基因表达调控中，常常涉及顺式调控因子和反式调控因子，顺式调控因子是指（），反式调控因子是指（）。10．（）蛋白负责特定基因的开关。在数百种来源于原核和真核的DNA-结合蛋白中发现以下几种结构花式（motif）。它们是（），（），（）和（）。它们通常以（）和（），深入到DNA双螺旋的大沟中与DNA相互作用。11．逆转病毒即使本身并没有病毒癌基因，也可以致癌，当病毒cDNA整合于（）时病毒cDNA中（）能激活细胞的原癌基因的表达。12．P53一种重要的抑癌蛋白，它的两个主要功能是（1）（）（2）（）。P53的两个等位基因中只要其中一个变异就可能使癌发生，这是因为P53蛋白是（）的形式存在和行使功能的。13．细胞快速适应高浓度胞外信号的途径是（）。二、选择：（每题2分，共20分）1．关于遗传密码的论述，哪些是正确的？（）A．在通用密码中，AUG是唯一的兼职密码生B．生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度，从而进行翻译水平上的调控C．无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器，都共用一套遗传密码D．在体外无细胞合成系统中合成多肽，起始密码子不存在时也能合成多肽2．关于遗传密码的论述，哪些是正确的？（）A．在通用密码中，AUG是唯一的兼职密码生B．生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度，从而进行翻译水平上的调控C．无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器，都共用一套遗传密码D．在体外无细胞合成系统中合成多肽，起始密码子不存在时也能合成多肽3．DNApolymerasel的哪个活性是使DNA复制保持忠实性的关链因素？（）A．聚合活性B．5＇-3＇外切活性C．3＇-5＇外切活性D．逆转录酶活性4．一个λphage感染它的溶源菌时，下列情况将发生（）。A．进入正常的噬菌体循环产生50个左右的噬菌体粒子B．λ-DNA可以环化但不复制C．细菌细胞将被杀死D．原噬菌体将被割离E．λ-DNA将不能注入5．下面的部分二倍体中，哪些表型是组成型地合成β-半乳糖苷酶？（）6．关于真核基因表达调控特点的论述哪些是正确的？（）A．真核基因组基因数目多、大多数含内含子、且与组蛋白及非组蛋白结合形成核小体及其超螺旋等结构影响基因活性B．转录在核内、翻译在细胞质中进行，绝大多数mRNA的形成要通过RNA是否被运输来控制基因表达C．真核mRNA寿命长，为翻译水平的调控提供了较大的余地D．真核基因表达调控可在DNA水平的调控（拷贝数、重排）、转录水平、转录后水平（RNA加工和运输）和翻译水平等多层次调控E．原核基因表达调控活动范围比真核更大7．人们为研究某一目的基因的结构，打算用基因工程的办法得此基因，请你在正面载体中选一最合适的载体（）。A．表达载体B．分泌性载体C．克隆载体D．转移载体E．穿梭载体8．当培养基中不存在糖时，正面哪一种是galoperon上结合的蛋白质情况？（）A．结合有CAP-cAMP和RNA聚合酶两种蛋白质B．不结合蛋白质C．结合有阻遇蛋白和CAP-cAMP蛋白9．正面关于真核生物启动子的叙述，哪些是正确的？（）A．真核生物有三种RNA聚合酶，它们利用同一种启动子B．DNApolymeraseII利用的启动子只有一种类型C．RNApolymeraseI利用的启动子分两部分：40～-＋5和-165～-4010．人们打算克隆并鉴定一个分子量为36-45kb的真核单拷贝基因，首先必须使用下边哪套系统，然后再进行鉴定？（）A．用cosmid为载体建立基因文库B．用pBR322为载体建立基因文库C．用M13为载体建立基因文库D．用λCharon4A为载体建立基因文库11．与细菌中发现的转录调控相比，真核细胞中的转录调控有以下区别，其中哪一项是错误的？（）A．真核RNApolymerase单独不能起作用B．真核基因在转录前，需多种转录因子（generaltranscriptionfactors）先在启动了上装配成复合物C．起始复合物装配过程包括许多步骤，每个步骤都受到调控信号或调控因子的影响D．在真核中大多数基因调控蛋白不能在离开它们所影响的基因相当远的地方起作用三、问答：（40分）1．简述（或绘图说明）真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程（15分）2．简述（或绘图说明）色氨酸操纵子弱化的机制（15分）3．在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质，这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族（5分）4．你正在进行Southernblot分析，并刚刚完成凝胶电泳部分，下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链，为了节约时间，你跳过这一步，直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上，你将标记好的探针与膜杂交，却发现放射自显影结果是一片空白，哪里错了呢？（5分）2009年武汉大学877分子生物学考研真题（A卷）及详解一、名词翻译与解释（共10小题，每小题4分，共40分）1．Regulatorygene答：Regulatorygene即调控基因，是编码能与操纵序列结合的调控蛋白的基因。调控蛋白分为阻遏蛋白和激活蛋白，与操纵子结合调控基因转录。2．Real-timePCR答：Real-timePCR即实时定量PCR，是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。可以在间隔相等的时间测反应物的浓度，获得相对较准确的数据，比较简便。3．Nicktranslation答：Nicktranslation即切口平移法，当双链DNA分子的一条链上产生切口时，E.coliDNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3＇羟基末端。同时该酶具有从5＇→3＇的核酸外切酶活性，能从切口的5＇端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3＇端补上核苷酸，从而使切口沿着DNA链移动，从而用放射性核苷酸代替原先无放射性的核苷酸，将放射性同位素掺入到合成新链中。4．Genericpromoter答：Genericpromoter即通用启动子。一个基因中有很多片断可能是与其他基因重复的，比如基因的通用启动子区域，可以使不同的基因通过同一个启动子启动表达。5．Histonecode答：Histonecode即组蛋白密码。组蛋白密码的假说提出了存在第二种类型人类遗传密码的可能，这种编码被称为“组蛋白密码”，是控制基因开启的“主开关”。组蛋白密码帮助控制了人类基因的表达。密码中的组蛋白是组成染色质的蛋白质。染色质则是包装在DNA外层的物质。通过组蛋白密码，不同修饰的组蛋白可以将基因组组织为活化和沉默区域。而且，这些区域可以通过细胞分裂传递。6．Proteomics答：Proteomics即蛋白质组学，源于蛋白质（protein）与基因组学（genomics）两个词的组合，是指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，在本质上是指在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识。7．Genetargeting答：Genetargeting即基因打靶，是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。基因打靶技术是一种定向改变生物活体遗传信息的实验手段，它的产生和发展建立在胚胎干（ES）细胞技术和同源重组技术成就的基础之上，广泛应用于基因功能研究、人类疾病动物模型的研制以及经济动物遗传物质的改良等方面。8．Singlenucleotidepolymorphism答：Singlenucleotidepolymorphism即单核核苷酸多态性，主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种。占所有已知多态性的90%以上。SNP所表现的多态性只涉及到单个碱基的变异，这种变异可由单个碱基的转换或颠换所引起，也可由碱基的插入或缺失所致。但通常所说的SNP并不包括后两种情况。SNP比较的不是DNA片段的长度，而是相同长度序列的单个碱基的差异。9．AlternativemRNAprocessing答：AlternativemRNAprocessing即选择性剪接（又称可变剪接），是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式（选择不同的剪接位点组合）产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同：或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者在相同的细胞中由于表达水平的不同而导致不同的表型。10．Replicon答：Replicon即复制子，是DNA复制时从一个DNA复制起点开始最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。例如E.coliphase及质粒DNA独立复制的单位均为复制子。二、简答题（共5小题，每小题10分，共50分）1．什么是DNA损伤？生物体DNA损伤与哪些因素有关？生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤，并进行DNA损伤修复？答：（1）DNA遭受自发的损伤或化合物及辐射的损伤，使其骨架断裂并改变其碱基的化学结构，称为DNA损伤。（2）影响因素：诱变剂、水解损伤、烷化（甲基化或乙基化）、氧化反应、辐射损伤：包括紫外辐射、γ射线、X射线等，碱基类似物如5-溴尿嘧啶。（3）修复机制①DNA损伤的直接逆转：光复活作用通过DNA光解酶断裂相邻嘧啶的共价键。②碱基切除修复通过多种糖基化酶切除碱基。③核苷酸切除修复酶的切割，UVR蛋白是紫外损伤修复需要的。④重组修复即双链断裂修复（DSB）途径，从姐妹染色体中取回序列信息，若无姐妹染色单体。则通过异源末端连接系统作用。⑤移损DNA合成：不修复损伤，使复制机器绕过受损部位。2．表观（epigenetic）遗传修饰包括哪些内容？并举一例说明其在基因的表达调控和染色体重塑等方面有哪些重要作用？答：（1）一个细胞发育过程中释放的信号引起临近细胞中特异基因的开启，诱导信号出现很短一段时间，基因却可以保持开启至很多代细胞，这种基因表达模式的遗传称为表观调节。核小体与DNA修饰时表观遗传的基础。（2）以某基因由于局部组蛋白甲基化而关闭为例。当该区域的染色体在细胞分裂是被复制，亲代的甲基化的组蛋白被均分至两个子代的双链DNA中，因此每个子代分子携带有一些甲基化的和非甲基化的核小体。甲基化的核小体募集带有染色质域的蛋白质，包括组蛋白甲基化酶，其可以甲基化临近未被修饰的核小体。而完全缺乏甲基化组蛋白的子链不能募集甲基化酶。因此染色质修饰状态可以世代维持。在哺乳动物细胞中，DNA甲基化有可能是基因组上沉默区域的主要标记。3．反式作用因子是直接或间接地识别或结合在各类顺式作