第二章植物组织培养设备及其使用

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第二章植物组织培养设备及其使用1.灭菌设备:高压蒸气灭菌锅用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。工作原理:在密闭的蒸锅内,0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。使用方法:首先检查灭菌锅内是否有水,而且水刚好淹住加热器,然后放入灭菌材料,对称拧紧灭菌锅上的螺丝,关闭放气阀通电。待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。三次放气后,关阀再通电,压力表上升达0.1-0.15Mpa时,维持20min后,断电,待压力降至零时,打开入入气阀,取出灭菌材料。注意事项:①对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间;②对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好,高压灭菌20-30min;③高压灭菌前后的培养基,其pH值下降0.2-0.3单位。因此,调PH值时,可适当调高0.-0.3个单位。2.接种设备:无菌超净工作台用于培养材料的消毒及接种。使用前,将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启,灭菌15min后,关闭杀菌按钮,打开照明按钮,即可在上面进行操作。电炉推车酒精灯封口膜接种器具灭菌器培养瓶3.培养设备①带日光灯的培养架,主要用于接种后材料的培养。②恒温箱:又称培养箱,可用于原生质体和酶制剂的保温,也可用于组织培养材料的保存及暗培养。③摇床与转床:在液体培养基中,可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。4.驯化设备①温室②防虫网室5、其它辅助设备①培养基灌装机及洗瓶机③除湿机:使培养室的湿度保持在定的范围内。②空调机:用于接种室和培养室温度的控制。④烘箱:用于干燥洗净后的玻璃器皿,还可用80℃的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。⑤冰箱:用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏,细胞组织和试验材料的冷冻保藏,以及某些材料的预处理。⑥纯水机与蒸馏水发生器:是实验室必备的仪器。⑦天平和显微镜:天平包括分析天平,电子天平,药物天平等,用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质,天平的精确度要到0.0001g,这就要求精确度更高的分析天平。显微镜包括解剖镜,生物显微镜,倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。⑧酸度计:用于校正培养基和酶制剂的PH。

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