2第三章 药物的杂质检查

1第三章药物的杂质检查3第三章药物的杂质检查法第一节概述第二节杂质的检查方法第三节一般杂质的检查第四节特殊杂质的检查4第一节概述一、药物纯度的概念与要求三、杂质的限量检查二、杂质的来源与种类5一药物的纯度要求——指药物纯净的程度.是反映药品质量的一项重要指标.1）评价：杂质检查1.药物的纯度puritiesofdrugs62）药物纯度与试剂纯度共同点：均规定所含杂质的种类和限量.不同点：a.药物纯度—又称为药用规格,主要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑,只有合格品和不合格品.7b.化学试剂的纯度——是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定,它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用.8例如：硫酸钡（BaSO4）试剂规格对可溶性钡盐不做检查.检查：氯化物、铁、灼烧失重等药用规格如存在可溶性钡盐则导致医疗事故.检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐等9一药物的纯度要求是指药物中存在的①无治疗作用或②影响药物的稳定性和疗效,甚至③对人体健康有害的微量物质.2.药物的杂质为保证药品质量,确保用药安全、有效,必须检查杂质,控制药物纯度.11二杂质的种类按来源可分为2类一般杂质——指在自然界中分布广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质.特殊杂质——指在该药物的生产或贮存过程中,根据药物的性质、生产方法和工艺条件,有可能引入的杂质.12二杂质的种类按结构可分为2类无机杂质——Cl-、S2-、CN-、As、重金属.有机杂质——中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂.13二杂质来源药物生产过程引入药物贮存期间引入14二杂质来源(4)合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属、以及使用溶剂,有机溶剂.1生产过程中引入(1)原料不纯(2)合成工艺中未反应完全的原料、合成中间体、副产物等.(3)从药用植物中提取分离过程中引入15二杂质来源与种类例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得OHCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOHH2SO470~75C+乙酰化不完全水杨酸(杂质)16制剂过程中可能产生新物质如：制备过程中加热灭菌盐酸普鲁卡因注射剂进一步脱羧转化对氨基苯甲酸苯胺引起毒性反应17二杂质来源与种类(1)保管不善或贮存时间过长(2)包装不当2贮藏过程中引入18二杂质来源与种类　　产生杂质发霉潮解、型转化、聚合、异构化、晶水解、氧化、分解在外界条件药品气、微生物温度、湿度、日光、空19二杂质来源与种类例1:麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下,易氧化分解为醛及有毒的过氧化物.CH3CH2OCH2CH3CH3CHO+CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙基过氧化物）药典规定:起封后24小时内使用20二杂质来源与种类例2：四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应,生成差向四环素(毒性高、活性低)OHH3CHN(CH3)2OHCONH2OOOHOHOHABCDpH2~6OHCONH2OOOHOHOH(CH3)2NOHH3CHABCD221杂质限量——在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下,药物中所含杂质的最大允许量.三杂质限量检查百分表示(%)百万分表示(ppm)限量表示方法232杂质检查的要求三杂质限量检查限量检查（Limittest）或测定其准确含量24三杂质限量检查三种检查方法比较法灵敏度法标准对照法3限量检查法25操作:平行试验比较两比色管的颜色或浊度,判断杂质限量是否符合规定.管2（对照管）管1（样品管）取限度量被检杂质的对照溶液,与一定量供试品溶液在相同条件下处理,比较反应结果,判断供试液中所含杂质限度是否符合规定.对照法26%100供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量%100SCVL写成：4限量计算公式三杂质的限量检查27610SCV)ppm(L若用ppm表示杂质限量则：注意:①单位是否统一②供试品是否有稀释③表示方法%或ppm28-,Cl25ml100ml2.0g依法检查样品过滤溶解水%01.0%100100251000201.05L例1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查对照品溶液:标准NaCl溶液(10gCl-/ml)方法：取5.0ml同法操作比较,浊度不得更大.计算：氯化物限量是多少(%)？29规定：含重金属≯百万分之五(5ppm)计算：应取标准铅溶液(10gPb/ml)多少ml？依法检查样品）（醋酸盐水25ml.0g4pH3.5buff,6101000401.0V5)ml(0.21001.0510004V6例2.葡萄糖中重金属的检查方法：30例3.溴化钠中砷盐检查S==x106=0.5gC.VL2.0X1/1064方法：取标准砷溶液2.0ml(每1ml相当于1µg砷)制备砷斑规定：含砷量不得超过4ppm计算：应取供试品量(g)？31例4．检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1μg的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为A.0.20g√B.2.0gC.0.020gD.1.0gE.0.10ggLCVS0.2%100%0001.01012%1006已知：C＝1μg/ml＝1×10-6g/ml;V＝2ml;L＝0.0001%323．检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC.2ml√D.1mlE.20mlml110100.1101066cSLV33在供试品溶液中加入试剂,在试验条件下反应,不得出现正反应.不得发生浑浊、蒸馏水TSAgNOHNOml5033如：蒸馏水中氯化物的检查5滴1mL0.2mg/50mL4µg/mL灵敏度法34取一定量供试品,在规定条件下测定待检杂质的参数,与规定限量比较,判断供试品中杂质限量.比较法35例：肾上腺素中肾上腺酮的检查比较法供试品液(2.0mg/ml)盐酸溶液样品(0.05mol/L)A310nm规定：A310nm≯0.0536小结1药物纯度2杂质的来源与种类来源：生产和贮存种类：一般杂质和特殊杂质3杂质的限量检查杂质的限量：计算：%100SVCL38第二节杂质的检查方法一、杂质的研究规范（一）有机杂质在质量标准中的项目名称1.以杂质的名称作为项目名称39中国药典（2010）收载硝苯地平有关物质中杂质Ⅰ、杂质Ⅱ402.以某类杂质的总称作为项目名称杂质结构不明确，如硝酸毛果芸香碱中的“其他生物碱”3.以检测方法作为项目名称杂质结构未知，也没有具体类别；如杂质吸光度溶液透光率41(二）杂质检查项目的确定由质量研究和稳定性研究中检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物。根据其起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。42（三）杂质限度的确定43444748二、杂质的常用检查法（二）、色谱方法（一）、化学方法（三）、光谱方法（四）、其他方法491杂质与一定试剂反应产生沉淀间苯二酚中邻苯二酚检查.2杂质与一定试剂反应产生颜色阿司匹林中游离水杨酸的测定3杂质与一定试剂反应产生气体盐酸乙基吗啡中胺盐检查.4滴定法（一）化学方法50例1．阿司匹林中游离水杨酸的检查①杂质来源a.生产过程中反应不完全OHCOOH(CH3CO)2OH++COOHOCOCH3b.贮存过程中阿司匹林水解COOHOCOCH3H2O+OHCOOHCH3COOH+51紫堇色（有酚羟基）②检查原理阿司匹林+Fe3+×（无酚羟基）水杨酸+Fe3+52例2．对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查①杂质来源生产中引入(反应不完全)NH2OHOHCOONaNH2NaHCO3CO2~1204atm,,NH2OHOHCOONaNH2CO2贮存中样品脱羧53滴定至水相变为橙红色甲基橙乙醚提取液HClO,H2②检查原理与方法对氨基水杨酸钠——乙醚中不溶间氨基酚——乙醚中溶解采用双相滴定法测定,控制间氨基酚的限量.541.薄层色谱法(TLC)2.高效液相色谱法(HPLC)3.气相色谱法(GC)（二）色谱方法55根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同(Rf值的差异),加以分离和检查.1.薄层色谱法(TLC)（二）色谱方法56我国药典2005年版增加了TLC系统适用性试验。1，检测灵敏度：对照品溶液稀释若干倍，应显示清晰的斑点。2，比移值：供试品主斑点与对照品溶液主斑点。3，分离效能（二）色谱方法57薄层色谱法应用1)杂质对照品法——适用于杂质已知并有杂质对照品的情况.方法根据杂质限量,取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液,分别点于同一薄层板上展开,定位后进行检查.（二）色谱方法58——适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况.2)供试品自身稀释对照法（二）色谱方法59——适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况.3)杂质对照品与供试品自身稀释对照并用法（二）色谱方法60例：氢化可的松中“其他甾体”检查供试液:3mg/ml对照液:60g/ml(供试液稀释50倍)判断:供试液的杂质斑点数≯3个,且供试液的杂质斑点颜色≯对照液主斑点颜色.61——选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为对照品.供试品如显杂质斑点，不得多于对照药物中杂质斑点数，颜色也不得更深。4)标准药物对照法（二）色谱方法62根据供试品与杂质的对照品保留时间相同测定各杂质峰面积.2.高效液相色谱法(HPLC)色谱系统适用性试验（二）色谱方法631.外标法（有对照品杂质）2.加校正因子的主成分自身对照法3.不加校正因子的主成分自身对照法（无杂质对照品）4.峰面积归一化法（粗略测量杂质的含量）（二）色谱方法643.气相色谱法(GC)检查方法:同高效液相色谱法.——用于药物中挥发性杂质的检查,如药物中残留溶剂、农药残留量等.标准溶液加入法（二）色谱方法654.毛细管电泳法检查方法:同高效液相色谱法.——用于酶类药物中酶类杂质的检查。（二）色谱方法661.可见-紫外分光光度法2.红外分光光度法3.原子吸收分光光度法（三）光谱行为差异67紫外分光光度法——利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行.（三）光谱行为差异68例：肾上腺素中肾上腺酮的检查310nmA2.0mg/mlHCl0.05mol/L测的溶液溶液样品规定：A310nm≯0.05692.红外分光光度法主要用于药物中无效或低效晶型的检查。某些多晶型药物由于其晶型结构不同，一些化学键的键长、键角等发生不同程度的变化，从而导致红外吸收光谱中某些特征峰的频率、峰形和强度出现显著差异。70在程序控制温度的情况下,测定物质的物理、化学变化与温度关系的一类仪器分析方法.1.1热重分析法1.2差示热分析法1.3差示扫描量热法1.热分析法（四）其他方法71测量物质的质量随温度变化的热分析技术,可计算出样品在相应温度范围内减失质量的百分率.1.1热重分析法(thermogravimetric,TGA)72c.测定速度快TGA的特点a.分析样品少,适用于贵重药材或在空气中容易氧化药物干燥失重测定.d.可用于判断结晶水或吸附水,并推断结晶水含量.b.灵敏度高,可达1g以下73TWWTWW供试品TGA热重曲线WW1测定曲线上平台之间的质量差值计算出样品相应温度范围内减失质量的百分率结晶水失重台阶2可用于药物结晶水与吸附水的区分74测量供试品和惰性参比物(常用石英砂、煅制MgO)之间的温度差与温度(或时间)关系的热分析技术.1.2差示热分析法(differentialthermalanalysis,DTA)78测量保持供试品和惰性参比物的温度相同,系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度(或时间)变化的热分析技术.1.3差示扫描量热法(differentialscanningcalorimetry,DSC)79温度(℃)热流率（mJ/s)系列1系列2系列397.2%98.6%标准品不同纯度苯甲酸的DS