探究酵母菌种群数量实验

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培养液中酵母菌种群数量的变化1、繁殖方式主要是:2、呼吸方式是:兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸)出芽生殖3、培养条件要注意哪些问题?比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。探究:培养液中酵母菌种群数量的变化一、实验原理(1)在理想的无限环境中,酵母菌种群的增长呈J型曲线,在有限的环境下,酵母菌种群的增长呈S型曲线(2)用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受培养液的成分、空间、pH、温度等因素的影响。二、实验器材恒温培养箱、血球计数板(血细胞计数器)、显微镜……三、实验流程取样计数分析结果得出结论酵母菌培养(把酵母菌接种到马铃薯培养液中培养)28℃条件下连续培养7d,每天取样计数酵母菌数量,采用的方法:将盖玻片放在计数板上,用吸管吸培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入到计数板小方格内,计数计数工具——血球计数板实物图正面图侧面图计数室滴液处∆血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。∆计数时,常采用样方法。方法:血球板计数法放大后的计数池•每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。•每个计数池分为9个大方格。计数室计数室分为25中格(双线边)每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=40025个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3*********抽样检测:5×16=80个小格抽样检测:4×25=100个小格(3)、单位换算:以1mm×1mm为例,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3。换算为1mL:1000/0.1=104即1mL是104个0.1mm3。(2)、计数室的规格:计数室长×宽有:1mm×1mm,2mm×2mm,3mm×3mm等深度均为0.1mm。如何计数?五点取样法样方法每mL培养液中酵母菌数量==A(平均每个中格酵母细胞数)×25×104×稀释倍数A1A2A5A3A41)求该计数室酵母菌个数80个小方格中细胞总数80×4002)求该计数室(大方格)的容积3)所求容积与计数室容积的倍数4)找出稀释倍数例如求1ml酵母菌数量的方法步骤最后将上述1、3、4的得数全部相乘为总菌数2、如何计数呢?酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞平均数x400x104x稀释倍数1、计数的操作(1)镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检.若有污物,则需清洗后才能进行计数。(2)进行计数前,应先将试管摇匀,目的是使酵母菌在培养液中混合均匀,以减少计数误差。(3)稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释(10倍即可);若菌液不浓,可不必稀释。(4)加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。(5)计数:静止5分钟后,先用(16×10)找到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,每个计数室选取5个(或4个)中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有4-5个菌体为宜。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。(7)血球计数板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和冲洗的方法清洗。(6)本实验无对照实验,酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。需要做重复,尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。这是什么规格的计数室内?看到以下状态该如何处理?四.分析结果和表达交流:各小组汇报实验结果,结合统计、计算的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。五、得出结论:酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于在封闭的环境中,无外源物质和能量的补充,种群数量呈“S”型增长,达到最大值后随资源的消耗和有害物质的积累,最终K值不断降低,种群数量减少甚至消亡。如恒定容积培养液中酵母菌的增长曲线。例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板一个大方格(计数室)的长为1mm,宽为1mm,深度为0.5mm,由400个小方格组成。现对某一稀释了50倍的样液进行检测,若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则1mL该培养液中酵母菌总数有个。1)一个计数室酵母菌个数2)计数室容积3)所求容积与计数室容积倍数4)稀释浓度5X400=20001X1X0.5=0.5mm31mlX1000/0.5=200050倍2X108例3:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。例2:在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1072×108稀释例4检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻▲个/mL。5n×105

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