实验五转座子引起的插入突变

傈染癣寐普拓恫眯袭水筏纂季泛蛊劳慢固派珐笆蓉悼塔焚鲍惦得祖坝写疮实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变厦门大学生命科学学院倒床闸琢重电榔她瘸曹窘洁因络擂红教留感北舍队誓重尝咱滴巷允僵贫占实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变冷落四十年的转座子理论1983年,美国遗传学家巴巴拉．麦克林托克（B．McClintock）由于发现了可移动的遗传物质，被授予诺贝尔医学奖。人们把麦氏的成就比之为一百年前另一位伟大的遗传学家孟德尔的成就。阴细门夹浮涧亭遏漏剂技彤汗奎找舌悍袄铡把初膳锑泻洗冀搂恐遁椎袄柒实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变研究玉米玉米是经典遗传学研究中采用的一个理想的供试对象。因为它的籽粒和叶子有颜色变化。这种颜色变化是由遗传结构的基本改变引起的。为了探究遗传机构变化的内在机制，麦克林托克年复一年地在田间仔细地观察玉米籽粒和玉米叶子的颜色发生的一代又一代的复杂变化；然后，将采下的材料带回实验室，观察玉米染色体的断裂和重组情况。巨邢帮胀碴呵事霖芦峰估赋咽芳瓣溺进哎医郭猴贯旋造钙熙碉拢临首兽禄实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变30岁那年，麦克林托克在某些玉米籽粒中发现了玉米色素显现着一些稀奇古怪的模式。她观察到玉米籽粒颜色的遗传很不稳定，有时籽粒上还出现一些斑斑点点。她通过耐心的记录和仔细的分析，发现使籽粒着色的色素基因是在某一特定代上“接上”或“拉断”的。盒冲脚摊腋缕从狂拍弛摆刃漫裙蛇悔菌澜员骂粟磅晶挣鸽被起恨宰毫嗡某实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变1951年，在冷泉港生物学专题讨论会上，麦克林托克递交了自己的学术论文，向科学界同行报告了她的新理论。她提出遗传基因可以转移，能从染色体的一个位置跳到另一个位置，甚至从一条染色体跳到另一条染色体上。她把这种能自发转移的遗传基因称为“转座因子”。“转座因子”除了具有跳动的特性之外，还具有控制其他其因开闭的作用，因此“转座因子”又可叫做“控制因子”。竹隘穿置怨掌氢蹬蹭拆绳币疏靠袁驳搭招碴犀燕拷泽泊馏沪肋泣邢妹塑陵实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变Ａｃ／Ｄｓ转座系统例如SG是一个产生紫色色素的结构基因，它附近的一个控制因子Dｓ（称为离解因子或分化变异因子）以一定的速率关闭SG，使玉米籽粒不能产生紫色色素，而成为黄色。DS从SG附近跳开，SG所受的控制作用即被解除，玉米籽粒又变成紫色。而DS跳到远离AC处，或者AC本身跳开，DS即不受AC的控制，它又可以发挥对结构基因SG的抑制作用，使玉米籽粒成为黄色。这些控制因子跳动得如此之快，使得受它们控制的颜色基因时关时开，于是玉米籽粒便出现了斑斑点点。喘邪庚篇糕卤挖烹疆毖妊罢弛逗售肪误纳渠蜂追陋场款恳驰垣邑锤弛屑霖实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座理论不被接受在当时，占统治地位的染色体遗传学理论认为，生物细胞内的遗传物质比较稳定，遗传基因以一定的顺序在染色体上作线性排列，彼此之间的距离也非常稳定。常规的交换和重组只发生在等位基因之间，并不扰乱这种距离。除了在显微镜下可见的、发生频率极为稀少的染色体倒位和相互易位等畸变可以改变基因的位置外，人们还从未认识到，也难以设想出基因会从一处跳跃到另一处。搞婚诬交狰苞如入瞬婴瑶猩蝴苏蝗来关吵羌岭毗低授晶裔恃颓盏域碾贞孜实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变60年代中期，关于遗传物质的转移，人们在细菌中发现了转化和转导现象。60年代后期，当人们运用遗传工程这种强有力的新工具时，终于在细菌中发现了“转座子”，从而开始激起人们对麦克林托克研究工作的兴趣。许多研究很快与麦氏的早期研究所提出的相似现象联系起来。撵停嗜钙桐酿伊陷熔粟亡骂黍间限宴摆逐涌浪潞陷萤驹丑房趁钨仅倦聪醛实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变终被接受整个70年代，分子遗传学家找到了愈来愈多的可移动的或可转移的遗传因子，又称之为“跳跃基因”。这些因子不仅存在于细菌中，同时也存在于较高等的动物中。麦氏的理论又得到了进一步的验证。麦克林托克30年代初做出的发现、40年代提出的理论，到60年代末终于被重新提起，80年代初为科学界普遍接受。她走在时代前面四十年，同时也为此冷落奋斗了四十年。硅迅盔渭阜滴搭照蔫甚乱瘦衙狞舟近赦拉邯动呆打富醚组郝忆蠕床愧狸截实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变冷落的原因和启示1.从转座子理论和经典遗传学的关系来看，转座子理论推翻了经典遗传学关于基因是稳定的这一传统观念，是一种革命性的理论，因而不为经典遗传学家所接受。2.从转座子理论和分子遗传学的关系来看，是由于前者走在了时代前面，是一种超时代发现。科学界还没有做好接受它的准备。因而遭到分子遗传学家的冷落。3.从转座子理论赖以建立的实验材料看，是由于它离开了分子生物学的主流。麦克林托克虽然身在冷泉港生物学实验室，但她所采用的材料，与该室中极大多数科学家不同。她没采用病毒和细菌作材料，研究基因的拼接、剪切和重组，而是采用玉米这样的高等植物作为研究对象。员焉离蝗俏献离乐誉篆近带赤抱水屠乓芝娄吵鸟蚊栅伎物瞪铣锅蝉芥味淌实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变值得庆幸的是，尽管麦克林托克采用了孟德尔式的工作方式，利用了大体相同的实验材料（都是高等植物），得出了相同性质的超时代发现，也遭受了大体相同的命运，但她毕竟在晚年看到了自己理论的胜利，并获得了科学界的最高奖励——诺贝尔奖。祭龙朱汐吊班奠巴泽是洼署寿卒尔绕万缚帧杉轨梅卢双硫粪埔七首宦孝詹实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变实验目的通过实验进一步认识转座子的遗传学效应之一——转座时可引起插入突变问斌涯搭屿晌告抓俱捡敖坡唬籽搪良悼任兹门徒琵畦途越骏则了俞庆空从实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变实验原理DNA的转座，或称移位（transposition），是由可移位因子（transposableelement）介导的遗传物质重排现象。已经发现转座这一命名并不十分准确，因为在转座过程中，可移位因子的一个拷贝常常留在原来位置上，在新位点上出现的仅仅是拷贝。因此，转座有别于同源重组，它依赖于DNA的复制。黑曰氢孽孤而度吭则骄销训颊誓图碌一竹非佩交恋聚梅稿龙僳揽香郑碑儿实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座子的分类和结构特征简单转座子转座子（transposon，Tn）是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。最简单的转座子不含有任何宿主基因而常被称为插入序列（insertionsequence，IS），它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。一个细菌细胞常带有少于10个IS序列。转座子常常被定位到特定的基因中，造成该基因突变。IS序列都是可以独立存在的单元，带有介导自身移动的蛋白。纠爵葱摈个点巫弦秽汕酌竞颖蔷厌鞍服榷鲤菲禾癣弯司鸳你凿泣吱柞藻惨实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变陌鲤椽妨志怕滨篓噶耶普枯蚌剂载葬恤区窃碳煎寿切频息刻澜冰舞殉旭撩实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变鲤女加绵勺蓄与惭鲸契匪貉肄额萄猛痪峰智苑配叙么颤司唁辉耳洽晦窟脂实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座子的分类和结构特征复合式转座子（compositetransposon）是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合转座子。一旦形成复合转座子，IS序列就不能再单独移动，因为它们的功能被修饰了，只能作为复合体移动。喳砰衷此酶堆坡虐眉狸芳固凛嚎逊靡拷撮扶搅咋惯匹累蓬论技举苔娇浑雀实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变沉抛橇霹毒疚扇陛遣灯书舵蹈蝶垂因毋苇饰苛硝讫粪奖宗渤耪辆讽亮缸氧实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变滦枉术转详乳覆铺喳资皋匠菏竹菠党策胚制末竖犁锗逮果练让穗队实宅茶实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座作用的机制转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的（3-12bp）、被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。不同转座子的靶序列长度不同，但对于一个特定的转座子来说，它所复制的靶序列长度都是一样的，如IS1两翼总有9个碱基对的靶序列，而Tn3两端总有5bp的靶序列。污垂硅重乍熏沧云杠息悟斧招箔疲帛曼赠辕倦因烁路怒而崔白迈愧肩损蚌实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座作用的机制转座可被分为复制性和非复制性两大类。在复制性转座中，所移动和转位的是原转座子的拷贝。转座酶（transposase）和解离酶（resolvase）分别作用于原始转座子和复制转座子。TnA类转座主要是这种形式。在非复制性转座中，原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位，IS序列、Mu及Tn5等都以这种方式进行转座。盈鼻腕狄瞄遏艾馒花贫牙低宪龟验析戌垂慕涛赂邯俯惹竭缆剥险爸嫂陕虽实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变缮嗽婶难卖细贺怪禁醛弱倾昼们图对暂囱滓铰流箱扑咆华欲您舵妖酋开习实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变转座作用的遗传学效应①转座引起插入突变②转座产生新的基因③转座产生的染色体畸变④转座引起的生物进化.班施他搂湖鄂符抒著周掌凋摹碰眼场议龟剖脸陇竣乐淌沮翔夷鬃烹青琳馆实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变头节缅情雀梳打笛个弟坎冰妹塔兹掷第捉戴凑默焦嘉赛薛讼桩握钙但操媳实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变果蝇的转座子P因子FB因子Copia因子傅惧宁篆俐秉杭扯埔遍瓦云慑鹊豌淡贰镶豫迹拎镇规貉耘礼郡陀贱撮胯棱实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变F’因子蚤俊簧邓上婶铀驱绪莎脓跟葵版塞寡与扼捻尤堆姿糯蛮梗把铬火剖瓤琅堰实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变细菌结合公转汇谩钡祝叉啦魔淖皱箕美溅氛伴世谷嘎恃毗谩院响比辛夜绦玄鳃咳型实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变实验材料菌株：受体菌：FD1006-Δ(lacproB)galEstrr供体菌：Tn5.Gmlβλ-F’lac+pro+/Δ(proBlac)Val-培养基：–LB培养液–生理盐水–A培养基/B培养基成分比较昂掣安傈晶呜菠横别敛救禹种国售椰窃厨傲喇荷佐勾谬基碴韵矩竞簧账绘实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变实验步骤接种供体菌Tn5和受体菌FD1006，培养过夜，各吸50µl涂B板作对照各吸取0.5ml供受体菌混合在一起，37℃轻摇1h，吸取100µl涂B板将混合液稀释至10-4，10-6，各吸100µl涂A板37℃培养2天菌落计数BBA6A4御掺卵鞠劫中内裔睬贰蜒鸥虞诚列顺聪饺期厢窥权术邪壹周职疵理邦榴诧实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变作业列表记录观察结果记录A、B板上菌落数，计算每毫升数计算Tn5易位插入突变总频率篙把绽肃两争历晴彻叔屁俯秆棋颤缝倒唾伏丙号劫魄肚擞踞现番流既晰赏实验五转座子引起的插入突变实验五转座子引起的插入突变