离体蛙心灌注及药物的影响

离体蛙心灌注及药物的影响相关知识原理实验步骤实验后处理注意事项[实验相关知识]1.维持心脏正常收缩的条件3.多种因素对蛙心活动的影响2.离体蛙心的特性正常蛙心舒缩正常结构与功能适宜的体液环境适当的负荷正常的神经支配Na+K+H+Ca2+温度PH？离体林格液改变正常蛙心舒缩正常结构与功能适宜的体液环境适当的负荷正常的神经支配Na+K+H+Ca2+温度PH？去甲肾上腺素（NA)乙酰胆碱(Ach)阿托品毒毛旋花子甙K离体林格液改变【相关知识原理】正常解剖结构适宜的理化环境适当的负荷离体蛙心正常收缩的条件蛙心正常收缩改变理化环境蛙心收缩变化蛙心的正常解剖结构心脏背面观心脏腹面观各处理因素对蛙心的作用及原理影响无机离子：0.65％NaCl；2％CaCl2；1％KCl药物：NA；Ach；阿托品；毒毛旋花子甙K温度：低温林格液酸、碱：NaHCO3；乳酸【实验步骤】离体蛙心的制备仪器连接实验计算机设置实验观察、处理和记录【实验后处理】打印结果写实验报告【注意事项】勿伤静脉窦，插管时注意方向和手法保持心脏湿润保持液面高度一致滴管勿混用，勿碰蛙心插管，加药勿过量做好标记，出现作用立即换新鲜林格液2、连接实验装置右主动脉弓蛙心结构图腹面左主动脉弓左心房右心房动脉圆锥心室背面心室左心房房室沟窦房沟静脉窦连接处后腔静脉右心房蛙心结构图1243穿线、插管离体蛙心实验装置实验步骤2.MedLab实验参数设置见P84表6-3实验步骤*实验时请调用“蛙心灌流”定制实验*信号输入前先“调零”离体蛙心实验装置3.连接实验装置实验步骤仪器连接注意事项：换能器插管液面高度烧杯调零4.实验观察、处理和记录1）观察和记录正常蛙心收缩曲线(幅度，疏密度，规律性，基线)2)改变无机离子浓度①等量换入0.65%Nacl②2%Cacl2（1~2滴）③1%Kcl（1滴）3)应用受体激动剂和拮抗剂•1:10000NA（1~2滴）•1:100000Ach（1滴）•1:2000阿托品（1滴）+1:100000Ach（1滴）实验步骤4)应用强心甙类药0.025%毒毛幻花苷K溶液（1~2滴）实验步骤5）观察温度的影响换入等量4℃的冷林格液6）观察酸碱的影响①1～2滴2.5%NaHCO3②1～2滴3%乳酸，出现变化后，再加1-2滴2.5%NaHCO35.实验后处理2)分析各处理因素对蛙心收缩曲线影响及其原理，写出实验报告。1)截取各种处理因素具有代表性的蛙心收缩曲线，制成单页图打印出来。实验步骤附图离体蛙心灌注及药物的影响实验结果1.等量0.65%NaCl,收缩力减弱，心率加快等渗溶液，其内环境仅有[Na+],[Cl-]，缺乏心肌收缩所必需的Ca2+,K+,尤其是Ca2+的缺乏，Ca2+内流减少，导致心肌收缩力降低。2.2%CaCl2，收缩力增加，心率减慢3.1%KCl，收缩力减弱，心率减慢4.NA，收缩力增加，心率加快5.Ach，收缩力减弱，心率减慢结果分析胞外K+浓度升高，Ca2+内流减少（竞争）胞外K+浓度升高，静息电位绝对值减少，低于-55~-60mV时，快Na＋通透失活，兴奋性下降，心率减慢，甚至停止在舒张期NA与心肌β受体结合后，激活AC，Ca2+通道开放增加，正性变力、变时、变传导Ach与心肌细胞膜上M-R结合，抑制钙通道，同时激活GK蛋白，K+外流增加，负性变力、变时、变传导6.阿托品+Ach，无明显变化阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用；再加入Ach，由于阿托品已将M胆碱受体阻断，故Ach无作用。7.毒K，收缩力增加抑制Na+-K+－ATP酶使细胞内Na+量升高，K+下降，胞内Na+升高，可促进细胞内外Na+-Ca2+交换,使细胞内Ca2+增多，从而加强心肌细胞收缩力。（毒K的作用有赖于胞外Ca2+的存在）8.4℃冷林格液，收缩力减弱，心率减慢温度过低时，肌凝蛋白头部ATP酶活性降低酶活性降低，代谢水平降低，各离子通道蛋白活性降低，心脏收缩活动减弱，心率减慢。图30.65%NaCl对蛙心收缩活动的影响图42%CaCl2对蛙心收缩活动的影响图51%KCl对蛙心收缩活动的影响图6NA对蛙心收缩活动的影响图7Ach对蛙心收缩活动的影响图8先加阿托品再加Ach对蛙心收缩活动的影响图9强心甙对蛙心收缩活动的影响图104℃冷林格液对蛙心收缩活动的影响[实验报告]讨论:分析各处理因素影响蛙心收缩的原理。结论:各处理因素对蛙心活动是何影响。预习内容1.生理科学实验的实验设计2.药物半数致死量的测定