第三节++尿液常用的化学检查

第三节尿液常用的化学检查一尿液酸度测定指示剂法原理：为湿化学反应法，常用的指示剂有溴麝香草酚蓝、石蕊和酚红等。评价：试剂不便于保存及运输，且易受黄疸尿、血尿的干扰而影响结果判断。试纸法原理：为干化学反应，利用酸碱指示剂反应。评价：可用肉眼与标准色板比较，也可用仪器判读结果。已在临床普及应用。PH计法原理：使用PH电极直接精确地测定尿液PH值。评价：精密度高，但需专用仪器，仅适用于科研。滴定法原理：常用标准氢氧化钠溶液对尿液进行滴定，根据氢氧化钠消耗的用量求得尿液可滴定酸度。评价：可进行PH值动态监测，但方法繁琐，已很少应用。参考值随机尿PH最大范围在4.6～8.0之间，多数尿在5.5～6.5左右。临床意义酸碱平衡状态的观察指标泌尿系感染的辅助诊断指导临床用药临床意义pH值↑pH值↓疾病碱中毒、膀胱炎酸中毒，糖尿病食物蔬菜、水果肉类及混合性药物小苏打、碳酸钾氯化钾、氯化钙生理活动饭后碱潮剧烈运动、应激注：低钾性代谢性碱中毒时，尿pH值↓二、尿液蛋白质定性检查健康成人蛋白质含量为30～130mg/24h，其中2/3来自血浆，少量来自肾小管、尿路及生殖道的分泌性蛋白。蛋白尿：当尿蛋白排出量150mg/24h、或尿中蛋白浓度100mg/L时，常规化学定性检查呈阳性，称为蛋白尿。加热乙酸法原理：加热可使蛋白质变性凝固，加酸可使蛋白质接近等电点，促使蛋白质沉淀，还可碱性盐类结晶。评价：本法是最为经典也最为准确的方法，特异性强、干扰因素少，对清/球蛋白均敏感，敏感度为150mg/L。虽然操作较繁琐，但因结果准确，常用作蛋白质定性的确证试验。磺基水杨酸法原理：在酸性环境下，磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合为不溶性蛋白盐沉淀。评价：操作简便、快速，与清/球蛋白、糖蛋白本周氏蛋白均能反应，敏感度高（50～100mg/L）。但干扰因素多，如病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺或在高浓度的尿酸、草酸盐及粘蛋白等作用下均可呈假阳性。因此本法适用于蛋白尿的筛查。干化学试带法原理：利用指示剂的蛋白质误差原理，即模块中主要含有酸碱指示剂－溴酚蓝（PH阈值为3.0～4.6）、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂，在PH3.2时溴酚蓝产生阴离子，与带有阳离子的蛋白质（清蛋白）结合后发生颜色变化（由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色），既可肉眼观察，又可用尿液分析仪自动判断结果。评价：本法与球蛋白反应弱，与血红蛋白、肌红蛋白、粘蛋白及本周氏蛋白基本不反应，当尿液PH偏高，超过指示剂的缓冲能力时，会出现假阳性结果。但因该法简便、快速已在临床得到普及应用，适合于健康普查，肾病的筛查。方法选择现场快速检验或初次就诊的门诊病人，采用干化学试带法或磺基水杨酸法。进行疗效观察或预后判断时，则需配合加热乙酸法。干扰因素的控制与分析尿PHPH9.0可使加热乙酸法及磺基水杨酸法呈假阴性，干化学试带法呈假阳性。PH3也会引起蛋白质定性假阴性。试验前需先将尿液PH调至5.0～6.0离子强度尿液离子强度很低时，可使加热乙酸法呈阴性药物病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂，容易使磺基水杨酸法出现假阳性，使化学试带法呈假阴性。反应时间和标本量试带法需要足够的反应时间和标本量，测试时要求试纸条充分浸湿尿液但不易常时间浸泡，标本的污染当尿中混有生殖道分泌物时，可使定性出现假阳性。留取中段尿或离心后测定上清液。在规定时间内判读结果试带的选购最好选用一个厂家的仪器和配套的试带生理性蛋白尿功能性蛋白尿：发热、剧烈运动、精神紧张等，呈一过性，定性“＋”以下。体位性蛋白尿：受试者卧床休息时蛋白定性阴性站立活动时因脊柱前突对肾的压迫，则出现蛋白尿偶然性蛋白尿：由于偶然因素，尿液混入多量血脓液、粘液及生殖道分泌物。摄入性蛋白尿：进食摄入或输注摄入妊娠性蛋白尿：与机体处于妊娠状态有关病理性蛋白尿肾小球性蛋白尿：炎症、免疫等使肾小球滤过膜孔径增加，电荷屏障遭破坏（滤过膜带负电荷，阻止带负电荷蛋白质通过），使血浆的中分子及大分子量的蛋白出现尿中，尿蛋白主要为清蛋白，严重时会有球蛋白。多＋～＋＋肾小管性蛋白尿：炎症或中毒引起肾小管对低分子量蛋白质的重吸收能力降低而导致的蛋白尿。以β2微球蛋白、溶菌酶为主，多在±～＋混合性蛋白尿：肾脏病变累及肾小管及肾小球产生的蛋白尿。组织性蛋白尿：在尿液形成过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白质以及由于炎症或药物刺激泌尿系统分泌蛋白质（粘蛋白、T-H蛋白、分泌型IgA）。溢出性蛋白尿：循环血浆中异常增多的低分子量蛋白质经肾小球滤出，超过肾小管重吸收能力所致的蛋白尿。假性蛋白尿：当尿中混有多量血、脓、粘液等成分而导致的蛋白尿。三、尿液糖定性检查正常人尿液中葡萄糖含量0.6～1.7mmol/24h，浓度0.3～0.8mmol/L,定性为阴性。当血浆葡萄糖含量超过肾糖阈（8.88mmol/L），或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性为阳性，称为糖尿。班氏法原理：葡萄糖的还原性醛基在热碱性条件下，将蓝色硫酸铜还原为氧化亚铜，进而生成红色的氢氧化亚铜沉淀。评价：该法稳定，敏感度为5.5mmol/L，但缺乏特异性，尿中其它糖类（果糖、乳糖、戊糖等）和许多还原性物质（肌酐、尿酸、VitC等）都可与班氏试剂起反应，出现假阳性。因此逐渐被葡萄糖氧化酶试带法取代。干化学试带法原理：试带上的葡萄糖氧化酶只与尿中葡萄糖产生氧化还原反应，生成的H2O2可催化色原（供氢体）邻甲苯胺（或碘化钾）氧化脱氢，使供氢体显色。评价：简便、快速、特异性高、敏感度更高（2.0～5.0mmol/L）、结果可目测、也可用于尿自动分析仪。VitC等还原性物质可致假阴性，高浓度酮体、高比重尿可降低试带的敏感性。质量控制标本留取：留取清晨空腹或餐后2h尿容器清洁：不含氧化性物质及时送检：判断结果：班氏法需待反应物自溶冷却后观察；试带法按说明书要求报告。干扰因素及处理VitC尿中VitC、尿酸、水杨酸等，可使班氏定性出现假阳性；而高浓度的VitC可使试带法呈假阴性，在病人大剂量注射VitC后5h内不宜做尿糖定性，最简单的处理方法是先将尿液煮沸几分钟后再进行测定。高比重尿或高酮体尿：可使试带法呈假阴性。必要时可用班氏法辅助确定阳性程度。蛋白尿：应加热除去生理性糖尿摄入性：摄入糖类过多或注射高渗葡萄糖，一次进食葡萄糖200g以上即可造成糖尿。精神性：过度紧张、情绪激动妊娠性：妊娠末期和哺乳期可因乳腺产生乳糖过多而致乳糖尿。病理性糖尿糖尿病：由于病人胰岛素水平降低或机体对胰岛素敏感性降低，导致葡萄糖贮存、利用障碍，长期高血糖超过肾糖阈使空腹尿中葡萄糖定性阳性。肾性糖尿：血糖正常，但肾小管对葡萄糖吸收能力减退、即肾糖阈降低所致的糖尿。如家族性糖尿、慢性肾炎和肾病综合症时。其它：甲亢、垂体前叶功能亢进等激素病以及颅脑外伤、脑血管意外、急性心肌梗死等均可出现高血糖和糖尿。四、尿中酮体定性检查酮体：是脂肪代谢的中间产物，由乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮组成。24h尿中酮体的含量：乙酰乙酸25mg，β-羟丁酸9mg，丙酮3mg。常规化学定性方法测不出尿酮体。酮血症：当体内脂肪代谢加速，生成的大量酮体便在血中蓄积称为酮血症。朗格法（Lange）原理：亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物。不与β-羟丁酸起反应。敏感度：乙酰乙酸50mg/L，丙酮200mg/L粉剂法（Rothera）原理：同朗格法。评价：优点是减少了干粉试剂用量，便于储存和携带，操作更加简便。敏感度：乙酰乙酸80mg/L，丙酮100mg/L干化学试带法原理：同朗格法试带类型：一类只与乙酰乙酸反应，与其他酮体不反应；另一类与乙酰乙酸和丙酮都起反应，但对乙酰乙酸明显高于丙酮，前者为50～100mg/L，后者仅为400～700mg/L。评价：敏感、方便快速。已基本取得朗格法和粉剂法。酮尿糖尿病酮症酸中毒：β-羟丁酸定性试验对酮血症的早期诊断意义较大，酮尿是糖尿病性昏迷的前期指标，多伴有高血糖和糖尿。其它：如饥饿、过分节食、剧烈呕吐或腹泻、全身麻醉、长时间空腹运动及寒冷刺激等尿酮体阳性。五、尿液胆红素和尿胆原定性检查临床意义尿胆红素尿胆原溶血性黄疸阴性阳性阻塞性黄疸阳性减少或消失肝细胞性黄疸阳性轻度增加正常阴性阴性～弱阳性尿血红蛋白定性检查同粪便隐血试验尿液亚硝酸盐定性检查当尿中有病原微生物增殖，并且尿液在膀胱中存留足够长时间的情况下，某些含有硝酸盐还原酶的感染病原菌，可将尿中的硝酸盐还原为亚硝酸盐（NIT）。亚硝酸盐定性试验可作为泌尿系感染的筛选指标之一。