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专业英语(天然药物化学)殷志琦色谱法发展历史简介色谱法从二十世纪初发明以来,经历了整整一个世纪的发展到今天已经成为最重要的分离分析科学,广泛地应用于许多领域,如石油化工、有机合成、生理生化、医药卫生、环境保护,乃至空间探索等。将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,随着溶液的展开可以观察到一个个同心圆环出现,这种层析现象虽然古人就已有初步认识并有一些简单的应用,但真正首先认识到这种层析现象在分离分析方面具有重大价值的是俄国植物学家Tswett。Tswett关于色谱分离方法的研究始于1901年,两年后他发表了他的研究成果一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用,提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法。三年后,他将这种方法命名为色谱法(Chromatography),很显然色谱法(Chromatography)这个词是由颜色(chrom)和图谱(graph)这两个词根组成的,派生词有chromatograph(色谱仪),chromatogram(色谱图),chromatographer(色谱工作者)等。由于Tswett的开创性工作,因此人们尊称他为色谱学之父,而以他的名字命名的Tswett奖也成为了色谱界的最高荣誉奖。色谱法发明后的最初二三十年发展非常缓慢。液-固色谱的进一步发展有赖于瑞典科学家Tiselius(1948年NobelChemistryPrize获得者)和Claesson的努力,他们创立了液相色谱的迎头法和顶替法。分配色谱是由著名的英国科学家Martin和Synge创立的,他们因此而获得1952年的诺贝尔化学奖。1941年,Martin和Synge采用水分饱和的硅胶为固定相,以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基酸,他们在这一工作的论文中预言了用气体代替液体作为流动相来分离各类化合物的可能性。1951年,Martin和James报道了用自动滴定仪作检测器分析脂肪酸,创立了气-液色谱法;1958年,Golay首先提出了分离效能极高的毛细管柱气相色谱法,发明了玻璃毛细管拉制机,从此气相色谱法超过最先发明的液相色谱法而迅速发展起来,今天常用的气相色谱检测器也几乎是在五十年代发展起来的。七十年代发明了石英毛细管柱和固定液的交联技术。随着电子技术和计算机技术的发展气相色谱仪器也在不断发展完善中,到现在最先进的气相色谱仪已实现了全自动化和计算机控制,并可通过网络实现远程诊断和控制。色谱法基本原理和分类表1按两相所处状态分类流动相液体气体液体液-液层析法气-液层析法固定相固体液-固层析法气-固层析法表2按层析原理分类名称分离原理吸附层析法组份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂,各能力不同分配层析法各组份在流动相和静止液相(固相)中的分配系数不同离子交换层析法固定相是离子交换剂,各组份与离子交换剂亲和力不同凝胶层析法固定相是多孔凝胶,各组份的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度不同亲和层析法固定相只能与一种待分离组份专一结合,以此和无亲和力的其它组份分离表3按操作形式不同分类名称操作形式柱层析法固定相装于柱内,使样品沿着一个方向前移而达分离薄层层析法将适当粘度的固定相均匀涂铺在薄板上,点样后用流动相展开,使各组份分离纸层析法用滤纸作液体的载体,点样后用流动相展开,使各组份分离薄膜层析法将适当的高分子有机吸附剂制成薄膜,以类似纸层析方法进行物质的分离一、1.Paperchromatography(PC)OneofthemainadvantagesofPCisthegreatconvenienceofcarryingoutseparationssimplyonsheetsoffilterpaper,whichservebothasthemediumforseparationandasthesupport.AnotheradvantageistheconsiderablereproducibilityofRfvaluesdeterminedonpaper,sothatsuchmeasurementsarevaluableparametersforuseindescribingnewplantcompounds.Indeed,forsubstancessuchastheanthocyanins,whichdonothaveotherclearlydefinedphysicalproperties,theRfisthemostimportantmeansofdescribinganddistinguishingthedifferentpigments(Harborne,1967).PC:Paperchromatographychromatographyn.色谱法,层析法chromatographn.色谱仪v.用色谱法分析chromatographicadj.色谱法的,色谱仪的chromatogramn.色谱,层析谱separation:分离、分析filterpaper:滤纸medium:介质、媒介;培养基、媒介物reproducibility:可重现性,再生性,可再制性Rfvalue:比移值retardationfactor(Rf)anthocyanins:花色素苷,花青苷pigments:色素、颜料、染料Chromatographyonpaperusuallyinvolveseitherpartitionoradsorptionchromatography.Inpartition,thecompoundsarepartitionedbetweenalargelywater-immisciblealcoholicsolvent(e.g.n-butanol)andwater.Theclassicsolventmixture,n-butanol-aceticacid-water(4:1:5,toplayer)(abbreviatedasBAW)wasindeeddevisedasameansofincreasingthewatercontentofthen-butanollayerandthusimprovingtheutilityofthesolventmixture.Indeed,BAWisstillwidelyapplicableasageneralsolventformanyclassesofplantconstituent.Partition(partitioned):n.分割,分配v.分割,分裂,划分partitionchromatography分配层析adsorptionchromatography吸附层析water-immiscible水不溶性的alcoholicadj.醇的,乙醇的,酒精的alcoholn.酒精,乙醇alcoholizev.醇化alcoholysisn.醇解solventn.溶剂n-butanoln.正丁醇n:normal正(链)的iso:isotropic各向同性的,同,异t:tertiary特,叔,第三,三代(t-butanol叔丁醇)Methanol=methylalcohol甲醇Ethanol=ethylalcohol乙醇BAW:n-butanol-aceticacid-water4:1:5(上层)正丁醇-醋酸-水constituent:成分,组成compound:混合物,复合物Bycontrast,adsorptionforcesareoneofthemainfeaturesofPCinaqueoussolvent.Purewaterisaremarkablyversatilechromatographicsolventanditcanbeusedtoseparatethecommonpurinesandpyrimidinesandisalsoapplicabletophenoliccompoundsandtoplantglycosidesingeneral.Purines:嘌呤Pyrimidines:嘧啶phenolic:酚性的glycoside:苷,配糖物Glycosidase糖苷酶Glycosidation苷化Glycosyl糖基ThechoiceofapparatusforPCdependstosomeextentontheamountoflaboratoryspaceavailable.HorizontalorcircularPC,forexample,takesuplittlemorespacethanastandardTLCtank.Ithasremarkablygoodresolutionandisused,forexample,forseparatingcarotenoids.Inmostlaboratories,PCiscarriedoutbydescent,intankswhichwillaccommodateWhatmanpapersofthesize46×57cm.DescendingPCismostusefulsincethesolventcanbemoreeasilyover-runifthisisdesired;itisalsoslightlymoreconvenientfortwo-dimensionalseparations.horizontalPC:水平纸层析circularPC:环形纸层析TLC:薄层层析Resolution:分辨,分解,解析carotenoids:类胡萝卜素,类叶红素tank:池,槽,框,缸WhatmanpapersdescendingPC:下行纸色谱法descendingchromatography下行色谱法descendingdevelopment下行展开法descendingmethod下行法two-dimensionalseparations:二维分离1D-NMR:一维核磁共振2D-NMR:二维核磁共振Aconsiderablerangeofmodifiedfilterpapersareavailablecommerciallyforachievingparticularchromatographicseparations.Forexample,thepolarpropertiesofcellulosecanbereducedbyinincorporatingsilicicacidoraluminaintothepapers,makingthemmoresuitableforseparatinglipids.Paperscanlikewisebemodifiedinthelaboratory,forexample,bysoakingtheminparaffinorsiliconeoilinordertocarryoutreversed-phasechromatography,againforlipids.Forlarge-scaleseparations,thicksheetsofchromatographyfilterpaperareavailable(Whatmanno.3or3MM)andthesewillcopewithseveralmilligramsofmaterialpersheet.modifiedfilterpapers:改性滤纸polarproperties:极性cellulose:纤维素silicicacid:硅酸silicagel:硅胶silicon:硅siliconeoil:硅油alumina:氧化铝,矾土lipids:脂,类脂paraffin:石蜡油,煤油reversed-phasechromatography:反相色谱milligram:毫克deci(分)centi(厘)milli(毫)micro(微)nano(纳)InPC,compoundsareusuallydetectedascolouredorUV-fluorescentspots,afterreactionwithachro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