第十四章维生素类药物的分析

药物分析维生素类药物的分析第十四章游奎一湘潭大学化工学院药物分析第十四章维生素类药物的分析公元前3500年-古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来的维A。1600年-医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。1747年-苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维C。1831年-胡萝卜素被发现。1905年-甲状腺肿大被碘治愈。1911年-波兰化学家丰克为维生素命名。1915年-科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的1916年-维生素B被分离出来。维生素发展史药物分析第十四章维生素类药物的分析1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A。1922年-维E被发现。1928年-科学家发现维B至少有两种类型。1933年-维E首次用于治疗。1948年-大剂量维C用于治疗炎症。1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症。1954年-自由基与人体老化的关系被揭开。1957年-Q10多酶被发现。1969年-体内超级抗氧化酶被发现。1970年-维C被用于治疗感冒。1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。药物分析第十四章维生素类药物的分析本章基本要求一、掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关系。二、掌握维生素类药物的鉴别原理与方法。三、掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法四、掌握维生素D的HPLC含量测定法和维生素E的GC含量测定法五、掌握维生素B1非水溶液滴定法与维生素C碘量法的测定原理方法与注意事项。六、熟悉本类药物其他的含量测定方法七、熟悉本类药物杂质检查方法八、了解维生素A三点校正法的推导过程药物分析第十四章维生素类药物的分析概述维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量活性营养物质。人体不能合成维生素。药物分析第十四章维生素类药物的分析VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性维生素:水溶性维生素:VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等分类按溶解度可分为:概述VitM尼克酸药物分析第十四章维生素类药物的分析-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:第一节维生素A药物分析第十四章维生素类药物的分析为一个具有共轭多烯侧链的环己烯（一）结构与性质一、具有UV吸收存在多种立体异构化合物易发生脱氢、脱水、聚合反应药物分析第十四章维生素类药物的分析VitA2VitA3去氢维生素A去水维生素A药物分析第十四章维生素类药物的分析鲸醇(维生素A醇的二聚体)药物分析第十四章维生素类药物的分析酸醛环氧化物、氧化剂紫外线、VitAVitAVitA]O[O2△或有金属离子存在时氧化↑共轭多烯侧链易被氧化（二）结构与性质一、(三)溶解性:不溶于水,易溶于有机溶剂和植物油等药物分析第十四章维生素类药物的分析环氧化物VitA醛VitA酸药物分析第十四章维生素类药物的分析三氯化锑反应（一）条件:无水无醇紫红蓝色3SbClVitACHCl3鉴别试验二、药物分析第十四章维生素类药物的分析-RCOOSbCl5+CH2蓝色紫红+CH2-RCOOSbCl5药物分析第十四章维生素类药物的分析（BP（2000））VitAVitAHCl去水△无水乙醇λmax为326nm一个吸收峰UV法（二）λmax为348,367,389nm三个吸收峰鉴别试验二、药物分析第十四章维生素类药物的分析去水VitA（VitA3）CH2↓VitA药物分析第十四章维生素类药物的分析326nm348nm367nm389nm药物分析第十四章维生素类药物的分析USP显色剂磷钼酸规定斑点颜色和Rf值BP杂质对照品法显色剂:三氯化锑TLC法（三）鉴别试验二、药物分析第十四章维生素类药物的分析立体异构体氧化降解产物合成中间体UV法（一）含量测定三、维生素A2维生素A3环氧化物维生素A醛维生素A酸药物分析第十四章维生素类药物的分析三点校正法（法定方法）1.原理：2.（1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。含量测定三、药物分析第十四章维生素类药物的分析2.波长的选择：（1）1VitA的max（328nm）（2）23分别在1的两侧各选一点药物分析第十四章维生素类药物的分析测定对象:VitA醋酸酯328340316328第一法等波长差法=12nm药物分析第十四章维生素类药物的分析第二法等吸收比法测定对象:VitA醇32176AAA1=325nm,2=310nm,3=334nm药物分析第十四章维生素类药物的分析第一法：直接测定法（1）基本步骤:第一步测定吸光度，确定最大吸收波长3.测定法药物分析第十四章维生素类药物的分析注意：C为混合样品的浓度第二步求)(%cm1样l(%)CA%)(cm1样)()(%cm1%cm1纯样药物分析第十四章维生素类药物的分析第三步求效价换算因数）效价（样样%)(cm1)(Eg/IU换算因数由纯品计算而得：%)(cm1Eg/IU纯）效价（换算因数＝效价是指每克供试品中所含维生素A的国际单位数(IU/g)药物分析第十四章维生素类药物的分析醋酸酯维生素Ag344.0IU12907000g344.0g101g/IU6）效价（15302907000Eg/IU%)(cm1纯）效价（换算因数＝1900药物分析第十四章维生素类药物的分析醇维生素Ag300.0IU13330000g300.0g101g/IU6）效价（18203330000Eg/IU%)(cm1纯）效价（换算因数＝1830药物分析第十四章维生素类药物的分析第四步：求标示量％％标示量平均丸重＝100g/IU％标示量丸标示量％＝100/IU％标示量平均丸重换算因数100CA药物分析第十四章维生素类药物的分析•方法：第一法适应于纯度高的维生素A醋酸酯iAnm360340328316300ml/IU159S处测、、、、分别于溶液～环己烷直接测定法药物分析第十四章维生素类药物的分析•判断是否在326～329nm之间maxmax在326～329nm之间改用第二法是否•求算并与规定值比较328iA/A药物分析第十四章维生素类药物的分析299.0AA811.0AA0000.1AA907.0AA555.0AA328360328340328328328316328300规定值差值328iA/A药物分析第十四章维生素类药物的分析•判断差值是否超过规定值的02.0有一个以上超过02.0无超过02.0•计算A328（校正）•用A328计算药物分析第十四章维生素类药物的分析%100AAAf328328)(328校正3403163283282523AAA.A校正药物分析第十四章维生素类药物的分析03%－15%－3%第二法校正328A328A第二法f值药物分析第十四章维生素类药物的分析讨论1.VA醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法（即代数法）推导而来；VA醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（几何法或称6/7定位法）推导而来。2.在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进行测定。在测定前务必要校正波长。测定的样品应不得少于两份。药物分析第十四章维生素类药物的分析VitAD胶丸中VitA的含量测定精密称取本品装量差异项下的内容物0.1287g(规格10000VitAIU/丸,平均装量0.07985g/丸)至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为药物分析第十四章维生素类药物的分析A300：0.374A316：0.592A328：0.663A340：0.553A360：0.228A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.344求本品中维生素A占标示量的百分含量？药物分析第十四章维生素类药物的分析A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.834A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====A328(校正)=3.52(2A328-A316-A340)=3.52(2×0.663–0.592–0.553)=0.637药物分析第十四章维生素类药物的分析A328(校正)–A328(实测)A328(实测)×100=0.637–0.6630.663×100=-3.92E1%1cm(328nm)=A328(校正)100ms/D=0.637100×0.1287/1250=61.87药物分析第十四章维生素类药物的分析供试品中维生素A效价=E1%1cm(328nm)×1900=61.87×1900=117553（IU/g）标示量%=VA效价(IU/g)×每丸内容物平均装量(g/丸)标示量(IU/丸)×100%=117553×0.0798510000×100%=93.9%药物分析第十四章维生素类药物的分析适用于维生素A醇（等吸收比法）第一法无法消除杂质干扰时用此法[皂化法、6/7A法]（3）第二法药物分析第十四章维生素类药物的分析i/KOHAnm334325310300ml/IU159VitAVitAS处测、、、于～稀释至溶解异丙醇除去植物油的干扰甘油和脂肪酸盐植物油醇醋酸酯皂化液挥干乙醚乙醚提取乙醇水溶性脂溶性并确定最大吸收波长（325nm)药物分析第十四章维生素类药物的分析•判断max是否在323~327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定•计算是否325300AA药物分析第十四章维生素类药物的分析•判断A300/A325是否大于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定•计算A325(校正)药物分析第十四章维生素类药物的分析%100AAAf325325)(325校正334310325325260455528156A.A.A.A校正药物分析第十四章维生素类药物的分析03%－3%校正325A325A校正325A药物分析第十四章维生素类药物的分析HPLC法（二）适合于维生素A醋酸酯原料和制剂中维生素A的含量测定。高效液相色谱仪，紫外检测固定相：硅胶为填充剂流动相：正己烷：异丙醇=997:3检测波长：325nm药物分析第十四章维生素类药物的分析三氯化锑比色法（二）优点:简便、快速λmax618nm～620nm标准曲线法定含量SbOClSbClOH32缺点呈色不稳定（5~10s内）水分干扰与标准曲线温差≤1℃专属性差三氯化锑有腐蚀性（三）蓝色+3SbClVitA药物分析第十四章维生素类药物的分析第二节维生素B1的分析维生素B1广泛存在于米糠、麦麸和酵母中，还可以人工合成。具有维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能，主要用于治疗脚气病，多发性神经炎和胃肠道疾病。药物分析第十四章维生素类药物的分析氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第二节维生素B1的分析NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+HClCl-盐酸硫胺药物分析第十四章维生素类药物的分析（一）溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性（二）UV共轭双键λmax=246nmE1%1cm=406~436结构与性质一、药物分析第十四章维生素类药物的分析与生物碱↓→↓(K2HgI4,硅钨酸等）蓝色荧光硫色素正丁醇OOH（三）硫色素反应（四）嘧啶环——噻唑环——（五）盐酸根呈氯化物的反应，用于鉴别。铁氰化钾药物分析第十