农药兽药残留检测技术

甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU内容提要食品安全现状国内外农药兽药残留检测技术现状农药兽药多残留检测技术快速筛选检测技术样品前处理技术存在的问题与措施农药兽药残留的控制甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全世界卫生组织（WHO）：食品安全指确保食品按照其用途进行加工或者食用时不会对消费者产生危害。食物中有毒、有害物质对人体健康影响的公共卫生问题。《中华人民共和国食品卫生法》第六条：食品应当无毒无害。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全事件英国“疯牛病”英国因疯牛病，牛肉和其制品出口受阻，每年损失达52亿美元；因宰杀“疯牛”损失高达300亿美元。德国因发生疯牛病导致卫生和农业部长辞职(2001)。比利时“二恶英”事件比利时发生的二恶英污染事件损失达13亿欧元。使欧洲乳、鸡、牛肉等食品的出口在全球范围内受阻，而造成比利时政府内阁倒台(1999)。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全事件畜禽肉（特别是冻鸡）兽药残留—欧盟、日本冻虾仁氯霉素残留；茶叶农药残留—多国；鸭肉禽流感病毒—韩国；酱油氯丙醇—欧盟；花生黄曲霉毒素；美国FDA以有害物质超标为由(主要问题是含杂质和农药残留、食品添加剂等卫生指标不符合标准），在6个月内扣留634批中国出口食品（2002.8-2003.1)甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全事件食源性甲型肝炎（1980’s上海,30万人)。O157:H7大肠杆菌食物中毒（2001，江苏、安徽等2万人中毒，177人死亡）沙门氏菌食物中毒（1999，宁夏肉品，1,000人)。金黄色葡萄球菌（1999，城运会，51名动员，部分项目取消)。涉红事件(苏丹红、对位红）水产品中孔雀石绿啤酒甲醛甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全法规食品法典委员会CodexAlimentariusCommission(CAC)由FAO于1961年建立,自1962年起负责FAO/WHO联合食品标准项目FAO/WHOFAO:联合国粮食和农业组织WHO:联合国世界卫生组织截止2004年底，CAC制定标准、规定等情况如下:237个食品标准；41个卫生规定或技术规程；185种的杀虫剂评价；3274种杀虫剂限量；25种污染物指南。对176种农药在375种食品中规定了2439条农药残留标准。中华人民共和国食品卫生法（1995年10月30日施实）仅对104种农药在粮食、水果、蔬菜、肉等45种食品中规定了允许的残留量，总含291个指标。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全法规美国食品和药物管理局(FDA)欧盟2006年1月1日正式实施食品安全新法规，该法规主要特点：1新食品法大大简化了食品生产、流通及销售的监督检测程序；2强化了食品安全的检查手段；3大大提高了食品市场准入的标准；4增加了已经准入欧盟市场的食品安全的问责制；5将更加注意食品生产的过程安全，不仅要求进入欧盟市场的食品本身符合新的食品安全标准，而且从食品生产的初始阶段就必须符合食品生产安全标准，特别是肉食，不仅要求其终端产品要符合标准，而且要求在整个生产过程中的每一个环节也要符合标准。欧盟是我畜产品、动物源性产品及水海产品的重要出口市场。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状食品安全法规日本肯定列表制度公布了对所有农业化学品的限量标准，包括“暂定最大残留限量标准”、“一律限量标准”和“豁免物质”清单，明确设定了进口食品、农产品中可能出现的734种农药、兽药和饲料添加剂的近5万个暂定标准，对其未设标准而欧美国家也无标准可参照的农药推行“一律标准”，只有符合要求的食品、农产品才能进入日本市场。“肯定列表制度”实施后，限量指标数量大幅增加、限量指标更为严格，检测项目成倍增加。每种食品、农产品检测项目将增加5倍以上(茶叶从89种增至276种，大米从129种增至579种)。大幅抬高了进口农产品的门槛，对茶叶、蔬菜等中国具有比较优势的农产品影响巨大。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状主要食品安全问题农药残留用于防治有害的植物（包括微生物）和动物的任何一种单一或混合物质。如杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀鼠剂等。有机氯（六六六、滴滴涕等）；有机磷（甲胺磷、对硫磷、毒死蜱等）；拟除虫菊酯（氰戊菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯等）；氨基甲酸酯（呋喃丹、速灭威等）目前农药品种已达600余种，常用的也有200多种，农药残留累积危险性及多残留对人身危害问题已引起世界广泛关注。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状主要食品安全问题兽药残留兽药残留的分类（按种类分）抗生素：四环素、氯霉素、青霉素、链霉素等磺胺类：磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺异恶唑等抗寄生剂：克球酚、左旋咪唑、敌百虫等激素类：已烯雌酚、丙酸睾丸素、地塞米松生长促进剂：克仑特罗（b-兴奋剂）镇静剂：卡唑心安、氮哌酮甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状主要食品安全问题兽药残留兽药残留的危害过敏：如青霉素细菌耐药性和菌群失调：抗菌素与磺胺类再生障碍性贫血：氯霉素耳聋：链霉素、双氢链霉素、卡那霉素致突变：如洛硝咪唑致癌：如克球酚、已烯雌酚致畸：丁苯咪唑、丙硫咪唑、苯硫苯胺酯、苯硫苯苯咪唑、苯咪唑等内分泌干扰效应：雌激素：已烯雌酚；雄激素：丙酸睾丸素；肾上腺激素：地塞米松；b-兴奋剂：如克仑特罗；b-阻断剂：如卡唑心安。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU1食品安全现状主要食品安全问题病原微生物及寄生虫污染沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠杆菌、李斯特杆菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、耐热耐酸菌、许多霉菌及其毒素污染以及弓形虫、旋毛虫、寄生虫虫卵食品添加剂着色剂、防腐剂、漂白剂、甜味剂、发色剂等重金属污染铅（Pb）汞（Hg）砷（As）生物毒素（包括细菌毒素和霉菌毒素）葡萄球菌肠毒素、肉毒杆菌毒素等；黄曲霉毒素、棒曲霉毒素、棕曲霉毒素等200多种霉菌毒素。黄曲霉毒素是毒性最强的致癌物之一，黄曲霉毒素B1的毒性是氰化钾的10倍。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU2国内外农药兽药残留检测技术现状典型的残留分析过程采样与样品制备→提取→净化→浓缩(衍生化)→分辨→检测└┄┄┄┄┄┘└┄┄┘样品前处理测定残留分析特点：1待测物质浓度低，浓度波动范围大（1μg/kg～10mg/kg）2样品基质复杂，干扰物质多3各种仪器分析方法为主残留分析的困难：样品基质背景复杂、前处理过程繁琐且耗时、被测成分浓度较低、分析仪器的定性能力的限制、仪器检测灵敏度不够等一系列问题。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU2国内外农药兽药残留检测技术现状样品前处理技术样品前处理是分析检测过程的关键环节。样品前处理过程：提取、净化、浓缩(衍生化)。提取是指使用适当溶剂(常用丙酮或乙腈)将待测物连同样品基质从固态样品中转移到易于净化和分析的液态；净化是指将等测物与提取液中的干扰物质分离。在现代残留农药检测中，提取、净化可一步完成。样品前处理目的：消除干扰、保护仪器、准确。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU2国内外农药兽药残留检测技术现状样品前处理技术经典技术索氏提取、振荡萃取、超声波萃取、液－液分配、柱层析、磺化等现代技术凝胶色谱（GPC）、固相萃取（SPE）、固相微萃取（SPME）、加速溶剂萃取（ASE）、超临界萃取(SFE)、微波萃取（MAE）、基质分散固相萃取(MSPDE)及微量化学法（MICCM）技术等。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU2国内外农药兽药残留检测技术现状仪器分析技术高分辨分离技术（高通量）GCLC（HPLC、UPLC）高灵敏度检测技术MSSIMMRM联用检测技术GC-MSLC-MS/MS甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU多残留检测技术国外ＵＳＡＣＤＦＡＦＤＡ-ＰＡＭDFGS19320种农药CSL104种农药国内中国国家标准GB/T19426—2003蜂蜜、果汁和果酒中304种农药多残留测定方法气相色谱-质谱和液相色谱-串联质谱法GB/T5009.145－2003植物性食品中有机磷(16种)和氨基甲酸酯类(4种)农药残留量的测定GB/T5009.146-2003植物性食品中有机氯(10种)和拟除虫菊酯类(6种)农药多种残留的测定检验检疫行业标准SN0334-95出口水果和蔬菜中22种有机磷农药多残留量检验方法“十五”国家重大科技专项建立了适用于动物组织、水产品和牛奶样品中四环素、金霉素、土霉素等7种四环素类药物多残留的液相色谱测定方法和10种四环素类兽药多残留高效液相色谱/串联质谱同时确证方法；建立了13大类（激素类、磺胺类、阿维菌素类、四环素类、苯并咪唑类、氯霉素类、β-内酰胺类、喹诺酮类、硝基呋喃类、β-兴奋剂类、硝基咪唑类、甲状腺抑制剂类、氨基糖苷类）108种兽药多残留的检测方法和13大类122种兽药多残留的确证方法；检测四大类(有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、除虫菊酯类)200种未知农药。2国内外农药兽药残留检测技术现状甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU2国内外农药兽药残留检测技术现状快速筛选检测技术酶联免疫吸附法ELISA胶体金免疫法酶抑制法芯片技术甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU日本农药兽药检测技术进展日本“肯定列表”中，一共提到734种农用化学品，日本官报公布的测定方法为157个,共涉及约273种农用化学品及其代谢物，其余461目前尚未公布相应的检测方法。主要技术GC-MSHPLCLC-MS/MS多残留单残留大米共579项，除127项农药残留有检测方法，252项也已经有了检测方法，50项无法检验，其他150项方法的研发任务2国内外农药兽药残留检测技术现状甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU问题检测方法不足多残留检测方法太少快速筛选检测技术不成熟缺乏超痕量分析等高技术检测手段样品前处理技术太过传统3存在的问题与措施甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU-农药残留检测技术日本“肯定列表”中，一共提到498种农药，通过查询GB和SN标准库，结合目前植物源性残留监控计划实际测定的项目，目前我国现有的检测方法能覆盖到107种，其余391种我国目前尚未建立相应的检测方法。国家标准和行业标准中农药残留量的检测多为单一残留物的分析方法，多残留和快速筛选检测方法极少；已制定的197项农药残留限量标准，还缺少部分检测方法；农药残留酶抑制法和免疫法快速筛选检测方法灵敏度、准确度、稳定性、特异性方面有待进一步研究。传统的溶剂萃取，液液分配，柱层析净化进行样品的前处理，自动化程度低，提取净化的效果差，速度慢，环境污染。3存在的问题与措施甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心CIQGANSU3存在的问题与措施-兽药残留检测技术日本“肯定列表”中，一共提到231种兽药和饲料添加剂，通过查询GB和SN标准库，结合目前动物源性残留监控计划实际测定的项目，目前我国现有的检测方法能覆盖到76种，其余155种我国目前尚未建立相应的检测方法。杯碟法和免疫法等快速筛选检测方法不能满足实际需要。在仪器检测和质谱确证，大部分为单一残留药物的检测方法。在样品前处理方面，现代前处理技术如固相萃取(SPE)、超临界萃取（SFE）、凝胶层析(GPC)、加速溶剂提取（ASE）、基体分散提取（MSPD）、免疫亲和柱（IAC）等应用甚少。甘肃出入境检验检疫局检验检疫综