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布鲁氏菌病生物安全与防护姓名：宋建国职称：高级兽医师甘肃省动物疫病预防控制中心GansuAnimalDiseaseControlCenter布鲁氏菌病生物安全与防护布鲁氏菌病的感染途径职业人群的防护实验室生物安全与防护现场采样的生物安全与防护病死畜无害化处理概述我国已分离到的布鲁氏菌生物型即羊种（1～3型），牛种（1～7.9型），猪种（1.3型），绵羊副睾种和犬种各1个型。结构布鲁氏菌为一组球杆状的革兰氏阴性菌，没有鞭毛，不形成芽孢或荚膜。电镜下外膜分三层：从外到内依次为脂多糖（LPS）、中层外膜蛋白（OMP）和内层细胞质膜。抗原布鲁氏菌抗原有属内和属外两种，属内抗原包括A、M和R三种表面抗原；A和M抗原是细胞壁表面的脂多糖蛋白复合物；R抗原是细胞壁中的脂多糖复合物，是大多数非光滑布鲁氏杆菌的共同抗原决定簇，其抗血清可凝集犬种和绵羊种布鲁氏杆菌；概述脂多糖(LPS)脂多糖是布鲁氏菌的主要毒力因子（内毒素），LPS在布鲁氏菌致病过程中主要引起机体发热，白细胞随体温升高而下降，局部和全身的微循环障碍和内毒素性休克等；主要成分组成：脂多糖(LPS)由0抗原多糖链，基核多糖和类脂A三部分；形态分类：根据布鲁氏菌O特异性多糖的有无以及完整性将布鲁氏菌分为光滑性（S一）布鲁氏菌和粗糙型（R一）布鲁氏菌；区别：光滑型细菌组织里有含有脂多糖（LPS）中的0链，粗糙型细菌组织LPS中0链缺乏。概述小结1、犬种和绵羊种布鲁氏杆菌是天然的R型种，其它种均为S型菌；2、目前，我们的SAT抗原为牛种布氏杆菌（光滑型）抗原，因此，不能用来检测犬和绵羊附睾种布氏杆菌（粗糙型）抗体；3、病菌排出：病菌通过胎盘、羊水、流产胎儿、乳汁、阴道分泌物、精液等排出体外；4、致病性：对豚鼠的致病力有强到弱依次为：羊种布氏杆菌（马耳他布氏杆菌）≥猪种布氏杆菌≥牛种布氏杆菌（流产布氏杆菌）＞沙林鼠布氏杆菌≥犬种布氏杆菌＞羊种布氏杆菌；5、引种时必须进行布病检疫；一、布鲁氏菌病的感染途径布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌导致的人兽共患疾病。在北方游牧民族中常见该病。布鲁氏菌的感染途径主要有：1、皮肤接触——淋巴结——血液2、消化道——食入含有布鲁氏菌的生乳或羊肉——小肠——肠系膜淋巴结——血液3、呼吸道——吸入脱落的病羊皮毛——肺——血液一般在实验室中操作人员可因为未带手套，或手套破损后接触含布鲁氏菌的病人（家畜）血液或者血清而感染，由于一般实验室都有生物安全柜，也很少接触动物皮毛，所以经呼吸道感染的可能性极低。（一）实验室布鲁氏菌病的感染途径布氏菌是最常见的实验室人畜共患疾病细菌感染的病原体。其主要感染途径有：1、鼻子吸入平板上上培养生长的布氏菌；2、皮肤直接接触感染性标本或培养物；3、实验操作中产生的气溶胶会造成大的感染暴发。4、操作中的意外针刺、感染物飞溅到眼睛、鼻子和嘴也会导致感染。5、其中是常见的引起感染的途径。建议的防护方法：对于带有或怀疑带有布氏菌的临床标本如血、组织等，按照２级生物安全水平的要求来操作。二、职业人群的防护防止经皮肤和黏膜感染防止经消化道感染防止经呼吸道感染减少人与牲畜接触个人防护二、职业人群的防护（一）防止经皮肤和黏膜感染（1）防止接触家畜流产物引起感染（2）防止接触皮毛引起感染二、职业人群的防护（一）防止经皮肤和黏膜感染1、防止接触家畜流产物引起感染（1）在处理流产胎儿、死胎时,应做好个人防护,除备有工作服、橡皮围裙、帽子、口罩和胶鞋外,还应戴乳胶手套和线手套,备有接产袋和消毒液,严禁赤手抓拿流产物；（2）家畜的流产胎儿、胎盘、胎衣或死胎等,不能随意丢弃；（3）不要食用流产胎儿。二、职业人群的防护（一）防止经皮肤和黏膜感染2、防止接触皮毛引起感染（1）剪毛、收购、保管、搬运和加工皮毛的工作人员,工作时应做好个人防护,不要赤手接触皮毛,工作后应洗手、洗脸和洗澡（最好）；（2）工作场地应及时清扫、消毒；二、职业人群的防护（二）防止经消化道感染（5方面）1、应按预防肠道传染病的一般卫生要求搞好饮食、饮水卫生,不吃不清洁或被布氏菌污染的食物（良好的生活习惯）；2、勤洗手、喝开水、吃熟食（良好的生活习惯）；3、做好奶和奶制品的消毒；4、搞好肉类加工和食用时的卫生措施5、防止饮水传播布病二、职业人群的防护（二）防止经消化道感染1、应按预防肠道传染病的一般卫生要求搞好饮食、饮水卫生,不吃不清洁或被布氏菌污染的食物；2、勤洗手、喝开水、吃熟食；3、做好奶和奶制品的消毒；（1）各种奶及其制品必需经巴氏消毒法和煮沸法消毒,煮沸后应立即冷却；（2）装奶用的桶及其他容器,用后一定要洗净、消毒。二、职业人群的防护（二）防止经消化道感染4、搞好肉类加工和食用时的卫生措施（1）在食用涮羊肉、烤羊肉时,一定要煮熟后再吃,以免感染布病。（2）家庭烹饪时,应将家畜肉切成小块,煮熟后再食用,切忌吃生肉或半生肉,尤其是内脏。（3）要把生肉和熟肉分开放,切肉的刀具应及时洗净,避免污染其他食物和炊具。(是为自己负责！为家庭负责!)二、职业人群的防护（二）防止经消化道感染5、防止饮水传播布病（1）要加强对水源的管理,垫高井台、加井盖定期消毒；（2）饮用水源周围要用木栅栏围起来,不让牲畜进入,定期消毒；（3）布病家畜用过的不流动贮水池,消毒后封锁3个月后才能让健康畜饮用；二、职业人群的防护（三）防止经呼吸道感染（4）1、应按规定着装,特别是应戴好口罩,防止经呼吸道感染发病。2、做好对工作现场的消毒。3、家畜的圈粪经常起晒,家畜的粪便要及时运到粪坑或偏僻、远离水源的地方集中堆放、泥封,经过生物发酵作用杀死布氏菌后方可用于农田。4、牲畜停留过的地方要经常进行消毒和清扫。二、职业人群的防护（四）减少人与牲畜接触（5）（1）牛、羊育肥场远离居民点和人用水源1km以上；（2）个人饲养的一定要圈养,不得散放和串街。无论是成畜或是幼畜,都不要放入住室内饲养（冬天产羔时人畜混住）,也不宜将牲畜放在人们生产、社交活动的公共场所,饲养过牲畜的上述场所应进行消毒；（3）饲养牲畜的专业户应建立产房,在产房内接产、哺育；（4）产房内备有防护服、消毒液、肥皂、面盆、毛巾等（各舍独立的防护用品）,作好个人防护；（5）不要用人用的盆或碗喂养家畜,小孩不要和幼畜玩耍；二、职业人群的防护（五）个人防护1、各种防护装备要合理使用、消毒,否则不但起不到保护作用,反而还成为传播因素。2、工作结束后,应就地脱下保护装备,洗净消毒（非一次性装备如雨鞋、工作服等）；3、不要穿工作服离开工作场所,更不许将其拿回家中（忘记或留作它用）；4、做好消毒处理工作；二、职业人群的防护（五）个人防护4、消毒处理（1）指导开展对布病阳性奶牛污染的场所；（2）用具、物品的消毒工作；（3）皮毛消毒；（4）消毒药品；二、职业人群的防护（五）个人防护4、消毒处理（3）（1）指导开展对布病阳性养殖场污染的场所消毒；（2）做好养殖场污染场所的用具（车辆、产粪车）、物品（饲喂工具）的消毒工作；二、职业人群的防护（五）个人防护4、消毒处理（3）皮毛消毒A、自净法：牛皮存放1个月，羊毛存放4个月，带毛生皮存放5个月;B、化学药品：环氧乙烷：每立方米密封空间300-400g环氧乙烷，8小时。4%福尔马林，加温60℃3-5%来苏儿，浸泡或表面喷洒；C、物理消毒法：日晒，60钴r射线照射；（五）个人防护4、消毒处理（4）消毒药品A、场所：1～3%漂白粉上清液，10～20%石炭酸溶液；B、污染衣物：1～3%来苏儿溶液，1-3%漂白粉上清液，0.3%新洁尔灭溶液。C、使用消百毒；二、职业人群的防护三、实验室生物安全与防护实验操作常见的生物暴露实验室内发生感染的途径实验室内生物安全操作实验室布氏菌感染事故国际1941年美国发生74例实验室相关的吸入性布氏菌感染事故；实验室布氏菌感染事故国内1、2007年浙江省某三乙医院检验中心大夫因个人工作时防护不当发生感染事故；2、2011年东北农业大学28名师生因动物实验发生布病感染事故；实验室布氏菌感染事故实验室布氏菌感染事故实验室布氏菌感染事故2010年12月间，东北农大动物医学学院相关教师从哈尔滨市香坊区幸福镇纪家村青喜养殖场分3批购入4只山羊作为实验用品，此后共有4名教师、2名实验员、110名学生用这些山羊做了5次实验。今年3月至5月间，东北农大27名学生和1名教师，相继被确诊感染布病。经学校查实，造成此次事故的原因为：一是购买实验山羊时，相关教师未要求养殖场出具相关检疫合格证明；二是实验前相关教师未对实验山羊进行现场检疫；三是在指导学生实验过程中，相关教师未能严格要求学生遵守操作规程、进行有效防护。学校认定此次事故是一起因相关教师在实验教学中违反有关规定造成的重大教学责任事故。此后，学校及时向学生及家长公布了事故调查报告，并承诺对事故承担全部法律责任。实验室发生生物安全事故的原因实验室发生生物安全事故的原因违规操作产生的气溶胶造成的感染；实验室不良行为造成的的感染；动物试验和接触污染物；气溶胶造成的感染产生气溶胶的具体违规操作事例（1）吸液时不小心，吸液体时产生气泡；（2）注射器混匀感染性的液体，针的端部在容器的液面上；（3）向空气中直接排放注射器的气泡；向空气中直接排放吸管剩余液体产生的气泡从胶塞瓶中拔出针头注射器的不当使用使用注射器后，重新给针头盖帽或夹针头（针头液体喷出）。不小心操作，致锐器皿如皮下接种针（针头）、玻璃吸管和碎玻璃导致实验人员感染。对动物进行接种时未固定。使用锋利的针头或套管，动物活动时针头伤及操作者。玻璃器皿破损由破裂的或有缺口的玻璃器皿引起的传染性物质的意外感染。实验室发生感染的途径实验室发生感染的途径感染性样品在实验室的不正确放置•感染性样品置于呼吸带之上•生物安全柜隔离板下缘在呼吸带之上感染性气溶胶的产生当操作液体或半固体，例如摇动、倾注、搅拌，或将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时，均可能产生气溶胶。以下实验室操作都可能产生感染性气溶胶：1.在对琼脂板划线接种；2.用吸管接种细胞培养瓶；3.采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养瓶中；4.对感染性物质进行匀浆及旋涡振荡；5.对感染性液体进行离心；6.进行动物实验操作；感染性气溶胶的产生产生气溶胶的具体实验操作举例：1、感染性材料的操作；2、实验室不良习惯造成的感染性物质吸入或接触感染性气溶胶的产生产生气溶胶的具体实验操作举例：1、使用在开放式的酒精灯火焰（冲散菌环菌落形成气溶胶）上灭菌；2、废弃的标本及培养物放在渗漏的容器里；3、带布氏菌的实验废弃物未进行灭菌处理；4、实验室未定期消毒；实验室不良习惯造成的感染性物质吸入或接触实验人员做实验时触摸嘴、眼和面部；在实验室里吃东西以及储存食品和饮料；实验室内咬笔、嚼口香糖；实验室内化妆和配戴隐形眼睛；吸取血液及血清时不小心、倾倒；吸管用后未完全浸没在适当的消毒液里；实验室违规操作接触感染材料造成的粘膜感染划破安瓿以前，未在手里垫一块酒精浸透的棉花再握住安瓿；移去的安瓿顶部未按污染物处理。打开标本管的塞子时，未垫上纱布再握住塞子、溅出。用显微技术检测固定并染色的血液和排泄物等标本时，可能并未杀死涂片上的所有微生物和病毒。实验室违规操作接触感染材料造成的粘膜感染受到污染实验记录纸张，未经可靠消毒带出实验室。通常使用传真进行原始记录的传输；穿着实验室防护服离开实验室工作区域；在实验室内穿露脚趾的鞋；在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜；实验室生物安全管理相关法规1、《病原微生物生物安全管理条例》（2004年11月12日中华人民共和国国务院令第424号发布施行）2、《高致病性病原微生物实验室生物安全管理审批办法》（2005年5月20日农业部第52号令发布施行）3、《国家兽医参考实验室管理办法》（2005年2月25日公布）4、