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2.2动物细胞工程1谢谢关注2019-11-10动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体核移植技术动物细胞工程技术其他动物细胞工程技术的基础2谢谢关注2019-11-102.2.1动物细胞培养和核移植技术3谢谢关注2019-11-10动物细胞培养技术（一）、概念是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。（二）、过程4谢谢关注2019-11-10转入培养液中进行原代培养5谢谢关注2019-11-10相关的概念：1细胞贴壁：悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点2接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象3原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养。6谢谢关注2019-11-10归纳：取的组织、器官细胞悬浮液酶贴满瓶壁的细胞单个细胞动物胚胎或幼龄动物胰蛋白加入培养液培养传代培养原代培养7谢谢关注2019-11-10思考题：1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。8谢谢关注2019-11-103、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。4、细胞膜的主要成份是什么？蛋白质和磷脂5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能9谢谢关注2019-11-106、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？注意时间的控制不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近10谢谢关注2019-11-101、无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、动物血清等。）（四）、动物细胞培养的条件2、营养11谢谢关注2019-11-103、温度和PH哺乳动物：36.5±0.5℃,多数细胞PH:7.2~7.4培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5%CO2）4、气体环境：12谢谢关注2019-11-10细胞的全能性大量的细胞植物体或组织培养结果葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较13谢谢关注2019-11-101、许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。2、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。3、培养的动物细胞用于检测有毒物质。4、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。（五）、动物细胞培养技术的应用14谢谢关注2019-11-1015谢谢关注2019-11-10（一）、概念：将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.克隆动物：用核移植的方法得到的动物。动物细胞核移植16谢谢关注2019-11-10（二）、分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度高，恢复全能性困难17谢谢关注2019-11-10体细胞的核移植过程18谢谢关注2019-11-10（四）、体细胞核移植技术的应用前景1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。2、保护濒危物种3、转基因克隆动物可以作为生物反应器来生产医用蛋白质，另外还可以作为组织器官的移植的供体19谢谢关注2019-11-10（五）、体细胞核移植技术存在的问题1、成功率底下。2、绝大多数的克隆动物存在着畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。3、克隆动物的食品安全性问题存在着争议。20谢谢关注2019-11-102、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是（）A．获得不死性的细胞B．10代以内细胞C．原代细胞D．传代细胞1、动物细胞工程技术的基础是（）A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养AD课堂反馈练习21谢谢关注2019-11-103、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（）A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变B22谢谢关注2019-11-104、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）①无毒的环境②无菌的环境③培养基需要加入血清④温度与动物体温相似⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能调节培养液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥D、①②③④⑥D23谢谢关注2019-11-105、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。（2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是。动物胚胎或幼龄动物剪碎胰蛋白使细胞与培养液充分接触，便于培养24谢谢关注2019-11-1025谢谢关注2019-11-10