第五章核酸A1.DNA合成仪合成DNA片段时用的原料是_____D___。A.4种dNTPB.4种NTPC.4种dNDPD.4种脱氧核苷的衍生物A2.假尿嘧啶核苷是指_____D______。A.碱基并非尿嘧啶B.作为DNA的稀有碱基存在C.核苷中糖被甲基化D.糖与碱基之间的连接与正常不同3.稀有碱基主要存在于______C____中。A.软色体DNAB.rRNAC.tRNAD.mRNA4.以下结构式的正确命名是________。A.尿苷B.尿嘧啶C.尿苷酸D.胞苷酸A5.稀有核苷酸碱基主要是在哪类核酸中发现?___C_____A.rRNAB.mRNAC.tRNAD.核仁DNAA6.绝大多数mRNA的5’端有__B_____。A.polyAB.帽子结构C.起始密码子D.终止密码子7.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个膦酸基连接,连接方式是____D____。A.2’—5’B.3’—5’C.3’—3’D.5’—5’8.原核mRNA与真核mRNA的结构在许多方面不相同,在下列4种结构中,原核mRNA不具有____①____,真核mRNA不具有____②____。A.SD序列B.Poly(A)序列C.启动子序列D.内含子序列9.细胞质中主要有三种RNA:tRNA、mRNA和rRNA,其相对含量是___C______。A.tRNA﹥mRNA﹥rRNAB.tRNA﹥rRNA﹥mRNAC.rRNA﹥tRNA﹥mRNA10.DNA受热变性时,出现的现象是___B______。A.多聚核苷酸链水解成单核苷酸B.在260nm波长处的吸光度增高C.碱基对以共价键连接D.溶液黏度增加E.最大光吸收峰波长发生转移11.某双链DNA样品含15%的A,该样品含C为____A______。A.35%B.15%C.30%D.20%12.根据Watson—Grick模型,求得每1μmDNA双螺旋核苷酸对的平均数为__D__。A.25400B.2540C.29411D.2941E.350513.不同生物中,最保守的Histone是___B_____。A.H1B.H2A,H2BC.H3,H414.DNA一条链部分碱基顺序为5’—A—T—C—T—3’能与其互补的链是_B____。A.5’—A—G—A—T—3’B.5’—A—T—C—T—3’C.5’—U—C—U—A—3’D.5’—G—C—G—A—3’15.下列何种结构单元不是tRNA三级结构倒L的长线部分?____A____A.氨基酸臂B.可变环C.D环D.反密码子臂E.D臂16.RNA和DNA彻底水解后的产物是_____核糖不同,部分碱基不同_____。A.戊糖不同,碱基不同B.戊糖相同,碱基不同C.戊糖不同,碱基相同D.戊糖相同,碱基相同17.RNA用碱水解,产生___B____。A.2’-和5’-核苷酸混合物B.2’-和3’-核苷酸混合物C.3’-和5’-核苷酸混合物18.核酸溶液的最大紫外吸收波长是___A____。A.260nmB.270nmC.280nmD.250nm19.关于核酸和蛋白质变性的说明,其中错误的是__A______。A.紫外吸收值发生明显的改变B.次级键破坏构象改变C.生物活性改变D.适当条件下可以复性20.双键DNA的Tm值高是由下列哪组碱基含量高引起的?___D____A.腺嘌呤+鸟嘌呤B.胞嘧啶+胸腺嘧啶C.腺嘌呤+胸腺嘧啶D.胞嘧啶+鸟嘌呤21.Polyd(A—T)的Tm值较polyd(G—C)为___B____。A.高B.低C.相同22.snRNA的功能是___E___。A.作为mRNA的前身物B.促进DNA合成C.催化RNA合成D.使RNA的碱基甲基化E.促进mRNA的成熟23.将RNA转移到硝酸纤维素膜上,进行分子杂交的技术叫___B___。A.Southern杂交法B.Northern杂交法C.Eastern杂交法D.Western杂交法24.DNA测序时,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳使用的变性剂是_____A___。A.尿素B.SDSC.盐酸胍D.异硫氰酸酯25.热变性的DNA在适当条件下可复性,条件之一是___B________。A.骤然变冷B.缓慢变冷C.浓缩D.加入浓无机盐26.核酸的基本结构单位是核苷酸,它由碱基、__戊糖____和__磷酸__三部分组成,其中碱基又包括嘌呤碱和___嘧啶碱___碱两种。ATP是一种多磷酸核苷酸,它由__一分子腺嘌呤④__(碱基名称)、___⑤一分子核糖____和三个磷酸残基组成。ATP之所以在细胞能量代谢中发挥重要作用,是因为其中带有两个____⑥____键。27.组成DNA和RNA的核苷酸之间连接戊糖残基的均为___①磷酸二酯___键,tRNA的二级结构呈__三叶草__形,其中反密码环的中间由三个碱基组成的部分称为___反密码子___,在遗传信息的翻译过程中起重要作用。28.DNA拓补异构酶Ⅱ可以改变DNA的拓补学特性,该酶每催化一次,可以使双链DNA产生___负_____超螺旋。29.DNA超螺旋(T)与拓补连环数(α)和双螺旋数(β)之间的关系为_______。30.Z-DNA的螺旋方向为___①左___,磷酸和糖骨架呈__②“Z”字形__,碱基对靠近___③边缘___,在DNA的__④CGCGCG__序列可能出现此种结构。31.限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构,形成的末端有粘性和___平齐_____末端。32.软色体中DNA与____①组蛋白____结合成复合体,并形成串珠样的__②核小体(螺旋管)___结构。33.tRNA的二级结构都是①三叶草___,三个突环分别称__②二氢尿嘧啶、__③反密码环___和__34.核酸变性时,紫外吸收值增高,叫_____增色_____效应。35.维持核酸分子一级结构的化学键是___①磷酸二酯键___,稳定其结构的作用力是__②碱基堆积力__。36.维持DNA双螺旋结构的作用力主要有三种:一是互补碱基对之间的_氢键作用_____,二是__②碱基堆积力_,三是磷酸残基上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的__③离子键___。37.变性DNA浓度相同而复性时间不同,说明复性时间长短与基因组大小有关__。38.简述DNA双螺旋结构模型答:有两条DNA单链,反向平行,一段由3’端开始,一段由5‘端开始,螺旋成双链结构。外部是磷酸和脱氧核糖交替构成的内部碱基遵循碱基互补配对原则(A-T,C-G)碱基之间是由氢键连接脱氧核苷酸之间由磷酸二脂键链接。39.有一噬菌体长1.7μm,它含有多少对碱基,螺旋数为多少?答:17μm=17000nm每对碱基间距为0.34nm故碱基对数为17000/0.34=50000bp每10对碱基一个螺旋故螺旋数为50000/10=5000个。40.简述核酸的组成、结构及生物学功能。41.一条单链DNA和与一条单链RNA分子量相同,你至少可以用几种方法将它们分开?简述原理。1、盐析法:DAN与蛋白质结合形成的核蛋白溶于高盐溶液,但不溶于低盐溶液;而RNA形成的核蛋白易溶于低盐溶液,因此可用高盐溶液从细胞破碎液中提取DNA核蛋白,还可以除去RNA..2、凝胶电泳法3、跑琼脂糖胶,RNA跑得快些,割胶可以得到.4、利用DNA和RNA在PH不同的苯酚中溶解度不一样:DNA溶解于碱性酚,而RNA溶于酸性酚,从而分离答:用两种方法将他们分开1。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀这是最简单的方法。2。利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。下面是生物化学的总结知识1.两性解离:DNA无,只有酸解离(○P),碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。2.粘度大:DNARNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。4.显色反应:鉴别DNA和RNA浓HCl浓HClRNA------→绿色化合物DNA------→蓝紫色化合物苔黑酚二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA。6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,碱基展开程度越大,紫外吸收就越厉害。当A=1时,DNA:50ug/ml,RNA和单链DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度:1.8,DNA很纯;2RNA很纯。7.沉降速度:对于拓扑异构体(核苷酸数目相同的核酸),其沉降速度为:RNA超螺旋DNA解链环状DNA松弛环状DNA线形DNA也就是在离心管中最上层是线形DNA,最下面是RNA。8.电泳:核苷酸、核酸均可以进行电泳,泳动速度主要由分子大小来决定,因此,电泳是测定核酸分子量的好方法。9.DNA分子量测定最直接的方法:用适当浓度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以将其他形式的DNA变成线形DNA,用电镜测出其长度,按B-DNA模型算出bp数,根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量42.请列举出5种真核生物中存在的RNA,并概括它们的功能。随意选五种43.比较DNA与RNA一级结构的异同点。答1、组成单位不同:DNA的组成单位是脱氧核苷酸,RNA的组成单位是核糖核苷酸,2、组成碱基不同:DNA的组成碱基是ATGC,RNA的组成碱基是AUGC3、组成五碳糖不同:DNA的组成五碳糖是脱氧核糖,RNA的组成五碳糖是核糖,4、空间结构不同:DNA是双螺旋结构,RNA一般是单链。5、功能不同:DNA是遗传物质,RNA一般在细胞中不作为遗传物质。46.ApCpCpCpCpApGpGpGpUpUpUpApGpUpCpCp(1)用牛胰核糖核酸酶完全降解,得到的产物是什么?(2)用核糖核酸酶T1完全降解,产物是什么?(3)用碱完全水解,产物是什么?47.ApCpUpApGOH经蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶完全酶解的产物分别是什么?50.B型DNA和Z型DNA的结构特点及两者之间的关系。答案:B型DNA的结构特点:①两条多核苷酸链反向平行绕成一个右手螺旋。②碱基位于双螺旋内侧,与纵轴垂直糖磷酸骨架位于外侧与纵轴平行。③分子表面朋大沟和小沟。④双螺旋的平行直径为2nm,每10对碱基旋绕一周,每周螺距为3.4nm。⑤氢键与碱基堆积力为维持其结构的主要作用力。Z型DNA的结构特点:①两条多核苷酸链反向平行绕成一个左手螺旋。②碱基对在分子轴外侧,并构成了分子的凸面。③糖磷酸骨架链的走向呈“Z”字型。④分子表面只有小沟。⑤DNA双螺旋体细长。两者之间的关系:B型、Z型DNA为DNA的两种结构形式,都是反向平等的双螺旋结构,B型DNA与Z型DNA之间可以互相转变。