血液分析仪散点图和直方图解读-20160813

血液分析仪散点图和直方图解读希森美康医用电子（上海）有限公司学术应用部目录•检测原理•散点图和直方图解读•案例分析及问题解答目录•检测原理•散点图和直方图解读•案例分析及问题解答检测原理4核酸荧光染色术•DIFF鞘流直流阻抗法•RBC•PLTSLS-血红蛋白法•HGB基本原理：流式细胞术/DNA/RNA荧光染色DIFF通道分色镜FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：内部复杂程度SFL侧向荧光：核酸含量和种类侧向散色光侧向荧光前向散色光表面形态－扫描显微镜－试剂反应后试剂反应前淋巴单核中性粒细胞嗜酸细胞试剂的作用，细胞纹理结构丧失、细胞膜损伤WDF试剂反应前WDF试剂反应后淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸粒细胞内部形态－透射电子显微镜－内部构造；淋巴细胞＜单核细胞＜中性粒细胞＜嗜酸性粒细胞LymphocyteMonocyteNeutrophilEosinophil通道试剂反应发表在2011年自动化学会血细胞通过→电阻值发生变化→脉冲被检测当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号・・・①信号的大小与通过的细胞体积呈正比②电阻变化的次数＝细胞数感应区域(感应电阻变化的区域）时间电阻值直流电红细胞血小板基本原理：电阻法时间电阻值原理：鞘流法RBC/PLT通道鞘液试剂喷头小孔回收管・计数粒子较多，重复性好・正确测定体积信息电阻法的优点原理：鞘流法RBC/PLT通道・原理：SLS-血红蛋白法HGB通道血红蛋白（四聚体）亲水基疏水基（月桂基硫酸钠）SLS的疏水基作用于珠蛋白（第2阶段）SLS的亲水基与Fe3+结合（第4阶段）珠蛋白亚铁血红素珠蛋白的结构改变（变性）亚铁血红素的铁（Fe2+）被氧化（Fe2+→Fe3+）（第3阶段）目录•检测原理•散点图和直方图解读•案例分析及问题解答WBC总数•CBC模式:•FSC(前向散射光)•反映细胞大小•CBC+DIFF:•Ssc(侧向散射光)•反映细胞内容物复杂程度•Sfl(侧向荧光)•反映细胞核酸含量WBC=NEUT#+LYMPH#+MONO#+EO#+BASO#聚集的血小板4DL完全溶解红细胞血小板在白细胞膜上打孔4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内容物复杂程度白细胞分类：DIFF通道IG%#/OTHER%#(研究)•异型淋巴细胞•幼稚粒细胞幼稚粒细胞异型淋巴嗜酸中性单核淋巴嗜碱WBC报警信息意义判定项目判定方法/判定式WBCAbnormalWBCAbnScattergram白细胞散射图异常从DIFF散射图上来判断NeutropeniaNeutrophiliaLymphopeniaLymphocytosisMonocytosisEosinophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytosis中性粒细胞减少中性粒细胞增多淋巴细胞减少淋巴细胞增多单核细胞增多嗜酸细胞增多嗜碱细胞增多白细胞减少白细胞增多NEUT#,NEUT%NEUT#,NEUT%LYMPH#,LYMPH%LYMPH#,LYMPH%MONO#,MONO%EO#,EO%BASO#,BASO%WBC#WBC#NEUT#1.00x109/L,(or设定的%）NEUT#11.00x109/L,(or设定的%）LYMPH#0.80x109/L,(or设定的%）LYMPH#4.00x109/L,(or设定的%）MONO#1.00x109/L,(or设定的%）EO#0.70x109/L,(or设定的%）BASO#0.20x109/L,(or设定的%）WBC#2.50x109/LWBC#18.00x109/LSuspectBlasts?ImmatureGran?LeftShift?AbnLympho?NRBC?AtypicalLympho?原始细胞未成熟粒细胞核左移异常淋巴细胞有核红细胞异型淋巴细胞散射图散射图散射图散射图散射图散射图从DIFF散射图上来判断从DIFF散射图上来判断从DIFF散射图上来判断从DIFF散射图上来判断从DIFF散射图上来判断从DIFF散射图上来判断更多的信息：报警原理异型淋巴细胞原始细胞单核细胞淋巴细胞有核红细胞嗜碱性粒细胞幼稚粒细胞杆状核粒细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞影细胞血小板聚集侧向散射光(SSC)侧向荧光(SFL)DIFF散点图原始细胞原始细胞未成熟粒细胞幼稚粒细胞核左移杆核异型淋巴细胞•注意：•当成熟白细胞能较好的分类，一般OTHER区域为异型淋巴细胞•当结果出现不分类的情况，一般OTHER区域主要是原始细胞异型淋巴细胞异常淋巴细胞•注意：异常淋巴主要是指幼稚淋巴，白血病时出现的病理淋巴细胞等异常淋巴有核红细胞有核红细胞RBC/PLT通道双鞘流阻抗法浮动界标RDW-SD假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为RDW-SD。单位用fL表示。RDW-CV点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算RDW-CV=（L2-L1）/（L2+L1）红细胞报警信息意义判定项目判定方法/判定式RBCAbnormalRBCAbnDistributionDimorphicPopulation红细胞直方图异常双形性细胞群RL,RU,MP,DWFlagMP(直方图的双峰性)对分析参数进行代数计算和数量比较在高和低点有间距并成“峰形”分布AnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis红细胞大小不同小球性红细胞大球性红细胞低色素贫血红细胞增多RDW-SD,RDW-CVMCVMCVMCHCHGBRBCRDW-SD65fLorRDW-CV20%MCV70fLMCV110fLMCHC290g/LHGB100g/LRBC6.50x1012/LSuspectRBCAgglutination?Turbidity/HGBInterference?IronDeficiency?红细胞抗凝浑浊/HGB受干扰１1缺铁性贫血1MCHC,MCH,RBC,RU(%)MCHC1MCV,MCHC,RDW-CV1对分析参数进行代数计算和数量比较MCHC365g/L1对分析参数进行代数计算和数量比较HGBDefect?HGB异常RDW-CV,MCV对分析参数进行代数计算和数量比较Fragments?红细胞碎片RDW-SD,PU,PU(%),MCV,RL对分析参数进行代数计算和数量比较红细胞直方图异常•触发规则：•RL(%)10%or•RU(%)5%or•RDW-SD无法计算or•多峰or•RU225fl或WBC#50x109/L双峰•触发规则：•红细胞直方图不止出现一个峰RBC100200250fl100%5%RLRU100200250fl100%20%RLRUSL红细胞聚集?触发规则：MCHC40.0g/dL&MCH40pg&RBC3.50x1012/LorMCHC40.0g/dL&MCH40pg&RU%4%•缺铁?•触发规则：•MCHC31.0g/dL&MCV75fl&RDW-CV15,0%PLT报警信息意义判定项目判定方法/判定式PLTAbnormalPLTAbnDistribution血小板直方图异常PDW,PL(%),PU(%),PLT,P-LCR,MPV,PU对分析参数进行代数计算和数量比较ThrombocytopeniaThrombocytosis血小板减少血小板增加PLTPLTPLT60x109/LPLT600x109/LSuspectPLTClumps?PLTClumps(S)?血小板聚集血小板凝集DIFF散射图PDW,PL(%),PU(%),PMFV,PLT,PLCR,MPV,PU从DIFF散射图上来判断对分析参数进行代数计算和数量比较血小板直方图异常?触发规则：P-LCR45%&MPV13fl&PU24florPU23fl&PU20%orPL(%)10%or•PU(%)40%or•PDW-SD无法计算or•PDW20flor•RL(%)9%PLPU100%20%10fl20fl30fl40fl12fl血小板聚集?触发规则：在散点图上特定的区域，散点达到一定数量聚集血小板血小板聚集(S)？•触发规则：•PLT#60x109/L&PDW20fl&PU(%)20%or•P-LCR45%&MPV13fl&PU24flPU(%)10fl20fl30flPUPL分析思路：PLT直方图出现大幅度抬高，MCV值为53.2，并报警有红细胞碎片，从PLT直方图目测其高值鉴别线在25-30fl之间，怀疑是高值鉴别线较高原因把部分小红细胞和红细胞碎片计入了血小板里，出现PLT-I假性增高。镜检解决方案：显微镜镜检发现有红细胞大小不均，有大量红细胞碎片存在。血小板散在分布，数量正常。目录•检测原理•散点图和直方图解读•案例分析及问题解答•通过挤或刮的方式采血导致细胞聚集和破坏，散点图异常在散点图右上方有大量异常散点（非IG），引起IG假性报警解决方法：用毛细管采集末梢血采集末梢血混匀后立即上机检测，血小板会偏低是怎么回事？因为血液抗凝需要一个过程，大概放置5分钟，再次混匀检测，结果就会比较准确且稳定了1分钟5分钟10分钟直方图粗糙血小板聚集直方图光滑直方图光滑标本混匀不充分会对结果有什么影响轻轻地混匀，散点图杂乱，不分类用力混匀，散点图正常用力混匀：左手抓住试管上部，右手食指弹试管底部，让标本产生上下翻滚的效果轻轻混匀：一手抓住试管上部，通过碗关节摇动试管混匀标本。混匀不充分，抗凝效果不好标本如何混匀，检测才能得到比较好的结果？•前面讲过轻轻地混匀，往往导致抗凝不充分•用力混匀后马上检测，重复性又不太好•比较合理的混匀方式是：1.采血后，立即用力混匀，让抗凝剂与血液成分充分接触2.放置5分钟后（让标本充分抗凝），再次用力混匀，然后用手轻轻搓动试管半分钟，让细胞颗粒均匀分布（标本在大幅度运动时，其中的颗粒分布不是很均匀）。3.然后再上机检测，就可以得到较好的结果•问题有用户问：为什么有些标本在XS上面不能分类，而在一些三分类上面能分类呢？一些三分类白细胞直方图只有两个峰，在中间用两个界标硬分割出一块区域作为中间细胞，这种三分类不能敏感筛选出异常标本，容易漏检因为XS是荧光五分类，对于异常标本更加敏感，对于异常标本的筛选能力更强，有些异常标本里面异常细胞，导致散点图异常分布，仪器判断该标本为异常标本，此外仪器会有异常细胞报警，不分类是为了要求用户必须去镜检确认，从而避免异常标本的漏检有用户抱怨：为什么人家的五分类都能分类，你们的仪器有时候就是不能分类呢？•XS不分类的标本主要有抗凝不充分或白血病病人的标本。•这些异常标本在主屏没有分类结果，在研究界面是有分类结果的，但不能传输和打印，因为这些分类结果可信度的很低，要求用户去镜检确认，并且出于保护用户的考虑，这些分类结果只能在实验室内部做参考，不能报告，避免误导医生和病人。•对于不管什么标本都能做白细胞五分类的仪器，我们要说的是：五分类是成熟白细胞的五分类，如果把大量原始细胞幼稚细胞硬分成五种成熟的白细胞，那是不科学的，对用户不负责的，那样会误导医生和病人，造成漏诊硬分类不分类为什么WBC在XS上的结果经常比三分类上的结果低？聚集血小板,大血小板,难溶红细胞等大颗粒三分类仪器先将红细胞溶解，通过将检测到的大颗粒作为白细胞计数，当出现大血小板、聚集血小板、难溶红细胞等大颗粒时，WBC出现假性偏高XS采用荧光染色技术，将大血小板、聚集血小板、难溶红细胞等大颗粒排除（因为这些大颗粒荧光强度没有或很低），WBC准确度比三分类高血小板聚集引起PLT假性偏低•血小板聚集时，若干个血小板当成一个血小板计数，或者黏附在白细胞上未被当成血小板计数，从而引起血小板假性减低•原因：1.EDTA-2K依赖性对策：重新采血用其他的抗凝剂（枸掾酸钠）采血来鉴别是否由于抗凝不良