5-中药的检查

LOGO第五章中药的检查本章目的要求★掌握外源性有害物质重金属、砷盐等的检查原理和方法。▲熟悉常规物质的检查原理和方法以及一些内源性有害物质的检查。●了解《中国药典》(2015年版)制剂通则的检查项目。中国药典检查项制剂通则检查纯度检查（杂质检查）安全性检查有效性检查重量差异、崩解时限、装量差异检查等重金属、砷盐检查、pH测定等异常毒性、热原检查等坎离砂的热效应检查等第一节概述一、药物的纯度要求药物的纯度，即药物的纯净程度，是反映药品质量的一项重要指标。药物的纯度主要由杂质控制。所以中药的纯度检查又可称为杂质检查。中药制剂的原料来源多种多样，处方组成、组分性质、生产过程也各不相同，因此，不可避免地会引入杂质。随着现代分析检测技术的提高，人们对药物纯度的认识和要求也在不断提高。什么是药物中的杂质？无治疗作用影响药物疗效和稳定性对人体有害氯化物、硫酸盐水分,pH砷盐、重金属杂质从哪来？杂质主要来源中药原料生产过程贮藏过程大黄药材中混有伪品大黄用劣质驴皮生产阿胶乌头未炮制好农药、化肥、砂石、泥土药材中混有非药用部位等药物不稳定水解、氧化作用贮存不当湿度（水解、吸潮、霉变）温度（分解）光照（裂解）包装破损（微生物污染）原料中结构相似成分在提取时一并被提取出来阿片提取吗啡时引入阿扑吗啡、罂粟碱、其他生物碱生产设备、管道等引入金属管道中脱落的Fe3＋、Pb2＋、As3＋杂质的种类中药中的杂质一般分为常规物质和有害物质。常规物质检查：是指在自然界中分布比较广泛，在多种中药原料的采集、收购、加工以及制剂的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如水分、氯化物、铁盐、灰分等。一般无毒，但常规物质含量的多少可反映出药物纯度的情况，对生产工艺和生产质量控制有预警作用。一般常规物质的检查方法收载在药典附录中。有害物质检查：分内源性有害物质和外源性有害物质。这些杂质是能引起不良生物作用的杂质。外源性有害物质：是在中药的生产或贮藏等过程中产生的有毒杂质，如重金属、砷盐、黄曲霉毒素等。外源性有害物质的检查方法收载在药典附录中。内源性有害物质：是对某些个别中药中存在的杂质因药物本身的特殊性而产生的杂质。如含马兜铃属植物中的马兜铃酸、乌头中的酯型生物碱等。内源性有害物质检查方法一般列在该制剂的检查项下。Eg:阿胶水不溶物大黄土大黄苷制川乌酯型生物碱桑寄生寄生于夹竹桃检查“强心苷”寄生于马桑检查“印度防己毒素”杂质的限量检查从中药制中杂质的来源考虑，完全去除其中的杂质，目前尚存在一定难度，而且成本也很高。因此，在不影响疗效、不影响制剂的稳定性和不产生毒副作用的前提下，只须控制药品中可能存在的杂质量在允许的限度内，仍然能够保证用药的安全和有效。因此，药典中的杂质检查方法多为限量检查（LimitTest）。杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。限量检查分为限量检查法和定量测定两种。限量检查法：采用对照法，以一定量与被检杂质相同的纯物质或对照品配制成标准溶液，与一定量供试品溶液，在相同处理条件下比较反应结果，从而确定杂质含量是否超过限量规定（注意“平行”原则）。不要求准确测定杂质含量只检查杂质是否超过规定限量此外，药典中杂质检查还有灵敏度法和比较法，不用标准溶液平行测定，灵敏度法是以该检测条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。比较法是利用被检杂质的某些特征参数，与规定的限量比较，不得更大，如吸光度值等。玄明粉【检查】重金属取本品1.0g，加稀醋酸2ml与适量的水溶解使成25ml，依法检查（附录ⅨE第一法），与标准铅溶液（10gPb/ml）2ml制备的对照液比较，不得更深。供试液对照液符合规定不符合规定杂质限量样品杂质量＜样品杂质量＜杂质对照液V标×C标允许杂质存在的最大量供试品供试液对照液色斑比色颜色比色浑浊比浊平行操作沉淀剂或显色剂杂质标准溶液定量测定：直接对被检杂质进行含量测定，结果不超限度规定。杂质限量通常用百分之几或百万分之几来表示。%ppm百分之几百万分之几×10－6药物中的杂质限量可用下式计算：通过一定量的供试品（S）与一定量标准溶液进行比较,杂质限量计算可写成下式：实例1黄连上清丸中重金属检查取本品水丸或水蜜丸15g，研碎，精密称定1.0g，照炽灼残渣检查法（2010年版中国药典附录ⅨJ）炽灼至完全灰化，取残渣及2.0mL标准铅溶液，依法（2010年版中国药典附录ⅨE第二法）检查重金属（标准铅溶液每1mL含10µgPb）。黄连上清丸中重金属限量计算如下:已知S=1.0×1000mgC=0.01mg/mlV=2.0ml第二节常规物质检查一般杂质检查方法1.杂质检查法2.水分3.灰分测定法4.铁盐5.干燥失重6.炽灼残渣7.重金属8.砷盐9.树脂残留10.农药残留11.黄曲霉素12.S0213.有害元素筛选称重ourtext取规定量样品，摊开，用肉眼或放大镜（5-10倍）观察，将杂质检出。将各类杂质分别称重，计算其在供试品中的含量（%），如丁香中杂质不得过2%，女贞子中杂质不得过3%1.外观难以鉴别时，可进行显微或理化鉴别试验，证明其为杂质后，计入杂质重量中。2.杂质检查所用的供试品量，除另有规定外，按药材和饮片取样法称取。3.需采用特殊方法进行检查的杂质，应给出具体方法。注意事项一、药材中混存杂质检查法四、干燥失重测定法干燥失重测定法1.常压加热干燥法2.减压干燥法3.干燥剂干燥法定义：药品的干燥失重，系指药品在规定的条件下干燥后所减失重量的百分率。主要指水分、结晶水及其它挥发性物质，从减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重为何需进行干燥失重或水分测定？药品中含有较大量的水分或其他挥发性物质时，使药品的含量降低，影响服药剂量；引起药品水解或发霉变质，而使药品失效；含水量可反映出制剂的生产工艺是否稳定，包装及贮存条件是否适宜等。1.常压恒温干燥法供试品置于烘箱中，在规定温度加热干燥至恒重(烘箱)(干燥器)(称量瓶)加热(烘箱)(干燥器)已恒重第二次及其后的各次加热时间应保持1小时以上干燥温度一般为105℃适用于受热较稳定的药物供试品如未达规定温度即融化时，先其于较低温度下除去大部分水分，再按规定温度干燥2.干燥剂干燥法供试品置干燥器内，利用干燥剂吸收水分至恒重适用于受热不稳定药物受热易分解药物受热易挥发药物例山楂叶提取物Ch.P.（2010）【检查】干燥失重取本品1g，精密称定，置干燥至恒重的称量瓶中，在硫酸干燥器中干燥24小时，减失重量不得过2.0%（附录ⅨG）。已恒重(干燥器)(称量瓶)干燥(干燥器)常用干燥剂A.硅胶变色硅胶含有氯化钴（CoCl2）无水氯化钴含水氯化钴105~120℃（可反复使用）B.五氧化二磷C.硫酸D.无水氯化钙3.减压干燥法适用于受热不稳定药物较难赶走水分的药物(称量瓶)(烘箱)(干燥器)例麝香Ch.P.（2010）【检查】干燥失重取本品约1g，精密称定，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，減失重量不得過35.0%（附录ⅨG）。例三七三醇皂苷Ch.P.（2010）【检查】干燥失重取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在室温减压干燥至恒重，减失重量不得过7.0%（附录ⅨG）。（二）有关说明及注意事项1.供试品的颗粒大小及用量一般情况下，取样量约1g，颗粒控制在2mm以下较为合适。2.铺设的厚度供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度一般不可超过5mm，如为疏松物质，厚度一般不可超过10mm。3.瓶盖的放置供试品放入烘箱或干燥器进行干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥；取出时，须将称量瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器内放冷至室温，然后称定重量。4.其他(1)恒重系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的重量。干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行。(2)供试品如未达到规定的干燥温度即融化时，应先将供试品于较低的温度下干燥至大部分水分除去后，再按规定条件干燥。(3)当用减压干燥器或恒温减压干燥器干燥时，除另有规定外，压力应控制在2.67kPa（20mmHg）以下，但不可太低，以免出现意外。(4)干燥器中常用的干燥剂为无水氯化钙、变色硅胶或五氧化二磷，其中恒温减压干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷。干燥剂应保持在有效状态。五、水分测定法（附录ⅨH）其中药品中的水分包括结合水和吸附水（一）常用的方法有：水分测定法烘干法甲苯法减压干燥法气相色谱法1.烘干法本法适用于不含或含少量挥发性成分的药品。测定方法:取供试品2～5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松样品不超过1Omm，精密称定，打开瓶盖在100～105℃干燥5h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30min，精密称定重量，再在上述温度干燥1h，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过3mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含有水分的百分数。2.甲苯法本法适用于含挥发性成分的药材。仪器装置:A：500ml短颈圆底烧瓶B：水分测定管C：直形冷凝管，外管长40cm。使用前，全部仪器应清洁，并置烘箱中烘干。3.减压干燥法范围：含有挥发性成分的贵重药品4.气相色谱法范围：各类型中药制剂中微量水分的精密测定测定方法：色谱条件与系统适用性试验：用直径为0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球为载体，柱温为140～150℃，热导检测器检测。注入无水乙醇，照气相色谱法测定。测定方法：色谱条件与系统适用性试验：应符合下列条件要求：1.用水峰计算的理论踏板数应大于3000，用乙醇峰计算的理论踏板数应大于200。2.水和乙醇两峰的分离度应大于23.将无水乙醇进样5次，水峰面积的相对标准偏差不得大于2.0％测定方法：标准溶液的制备：取纯化水约0.2g，置25mL量瓶中，精密称定，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备：取供试品适量（含水量约0.2g），粉碎或研细，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入无水乙醇50mL,混匀，超声处理20min，放置12h，再超声处理20min，离心，取上清液，即得。测定法：取无水乙醇、标准溶液及供试品溶液各5uL,注入GC，计算，即得（二）注意事项1.供试品一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片（破碎时不得使用高速粉碎机）。直径和长度在3mm以下者可不破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。2.甲苯法中为减少因甲苯与微量水混溶引起水分测定结果偏低，在测定前甲苯需先加少量水，充分振摇达饱和后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后方可使用。3.进行减压干燥时，不可骤然大幅度减压。4.GC法注意：对照品溶液和供试品溶液的配制需用新开启的同一瓶无水乙醇无水乙醇含水量约3％，标准溶液与供试品溶液的配置需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量应扣除。含水量的计算采用外标法。含水量扣除方法：标准溶液中水峰面积＝标准溶液中总水峰面积－K×标准溶液中乙醇峰面积供试品中水峰面积＝供试品中水峰面积－K×供试品中乙醇峰面积K＝无水乙醇中水峰面积/无水乙醇中乙醇峰面积六、炽灼残渣检查法1.原理：药物经炭化后，加硫酸湿润，先低温再高温(700~800℃)炽灼，使完全灰化，有机物分解挥发，残留的非挥发性无机杂质(多为金属的氧化物或无机盐类)成为硫酸盐，称为炽灼残渣(BP称硫酸灰分)，称重，判断是否符合限量规定。2.炽灼残渣的计算见下式。炽灼残渣=（残渣及坩埚重-空坩埚重）/（供试品重）×100%2.方法：取供试品1.0～2.0g或各药品项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温；除另有规定外，加硫酸0.5～1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700～800℃炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在700～800℃炽灼至恒重，即得。如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制在500～600℃。低温湿润除硫酸干燥器干燥器0.5h3.注意事项1.取样量可根据炽灼残渣限量来决定，取样量过多，炭化及灰化时