光学显微镜专业知识培训资料

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0光学显微镜培训资料2010年10月1目录第一章光学显微镜的发展历史.............................................................................................................................3第一节.十六世纪的显微科学..........................................................3第二节.十七世纪的显微科学..........................................................4第三节.十八世纪的显微科学..........................................................7第四节.十九世纪的显微科学..........................................................9第五节.二十世纪的显微科学.........................................................11第六节.新型的现代光学显微镜.......................................................12第二章光学显微镜分类与概述...........................................................................................................................14第一节.光学显微镜分类与观察方法...................................................14第二节.普通生物显微镜.............................................................17第二节、荧光显微镜.................................................................19一.荧光的分类.....................................................................................................................................20二.荧光的特性.....................................................................................................................................20三.荧光显微镜的基本组成.................................................................................................................21四.荧光显微镜的光源.........................................................................................................................21五.荧光滤色片组...............................................................................................................................21六.光学成像系统...............................................................................................................................22七.荧光镜检术的注意事项.................................................................................................................22第三节、激光共聚焦扫描显微境.......................................................24第四节、暗视野显微镜...............................................................25第五节、相差显微镜.................................................................26第六节、偏光显微镜.................................................................28第七节、金相显微镜.................................................................29第八节、微分干涉差显微镜...........................................................30第九节、倒置显微镜.................................................................32第十节.双目体视显微镜.............................................................32第三章光学显微镜构造与基本光学原理...........................................................................................................34第一节.光学显微镜的构造...........................................................34第二节显微镜的基本光学原理........................................................38第三节光学显微镜的成象原理........................................................39第四节.光学显微镜的使用规程及维护.................................................43实操练习.................................................................................................................................................................452一、生物显微镜的使用(包括暗视野观察法、相衬观察法)............................45二、倒置生物显微镜的使用(包括相衬观察法)......................................45三、倒置荧光显微镜的使用.......................................................45四、倒置金相显微镜的使用.......................................................45五、偏光显微镜的使用(包括透射、透反射偏光显微镜)..............................45六、微分干涉相衬显微镜的使用...................................................45七、连续变倍体视显微镜的使用...................................................45八、数码摄影与图像分析软件操作.................................................453第一章光学显微镜的发展历史显微镜(microscope)是一种借助物理方法产生物体放大影象的仪器。最早发明于16世纪晚期。至今已有400多年的历史。现在,它已经成为了一种极为重要的科学仪器,广泛地用于生物,化学,物理,冶金,酿造等各种科研活动,对人类的发展做出了巨大而卓越的贡献。第一节.十六世纪的显微科学在3000多年以前,欧洲腓尼基人在地中海沿岸的贝鲁斯河边第一次制成了人造玻璃。大约在4世纪,罗马人开始把玻璃应用在门窗上。到1291年,意大利的玻璃制造技术已经非常发达。而玻璃是制造显微镜的基本材料。早在公元前,我国人民就发展出了透镜制造技术。当时的材料是水晶。13世纪,著名的马可.波罗将中国的眼镜传入欧洲。欧洲人学会了磨制眼镜的技术。当时,玻璃制造业已经很发达,欧洲人用廉价的玻璃来磨制眼镜,是眼镜成为了一种相对廉价的商品。眼镜制造业兴盛起来,那时戴眼镜的人大都是富翁,他们的年纪多半很大,所以他们需要老花镜,也就是凸透镜。人们很快发现,凸透镜可以产生物体的放大影象。于是,一些人开始使用凸透镜来观察细小的物体,凸透镜在科学研究中开始发挥它巨大的作用。凸透镜因其具有放大功能而被叫做放大镜,多透镜的复式显微镜发明后又称单式显微镜,意思是只有一个透镜的显微镜。单式显微镜有一个致命的缺点,那就是它的焦距与透镜直径成正比,而焦距又与放大倍数成反比。也就是说,焦距越短,放大倍数越大,而透镜直径又越小。如果放大倍数是100倍,透镜的焦距为0.25毫米,透镜直径大约为0.33毫米!这个比大头针头还小的透镜在当时根本制造不出来。因为这个缘故,当时的放大镜的放大倍数最多不过25倍。众所周知,体积较大的一些纤毛虫的长度也不过0.1毫米,放大25倍后也才2.5毫米大。而它内部的细微结构就根本看不清了。因此,为了观察更多的细微物体,人们迫切需要一种更好的放大工具。1595年,荷兰的著名磨镜师詹森(Janssen)发明了第一个简陋的复式显微镜(如图,其真品已经遗失)。这个显微镜是由三个镜筒连接而成。其中中间的镜筒较粗,是手握的地方。另外两个镜筒分别插入它的两端,可以自由伸缩,从而达到聚焦的目的。镜头两个,都是凸透镜,分别固定在镜筒的两端。物镜是一个只有一个凸面的单凸透镜。目镜是一个有两个凸面的双凸透镜。当这个显微镜的两个活动镜筒完全收拢时,它的放大倍数是3倍;当两个活动镜筒完全伸出时,它的放大倍数是10倍(其实这也是最早的变焦镜头)第一个复式显微镜:詹森显微镜关于复式显微镜的发明过程,一说是Janssen在他父亲Hans的帮助下完成的;另一种说法较为有趣:詹森有两个淘气的儿子。一天,他们溜进了爸爸的作坊里摸摸动动。哥哥顺手拿起了两个镜片放到铜管的两端,发现通过这个铜管看书时书上的字大得显吓人。詹森知道后很高兴。让他们帮助他制成了世界上的第一架复式显微镜。复式显微镜在性能上明显优于单式显微镜。一是它的放大率可以做得很高,可以把几个放大倍数较小的凸透镜组合起来获得很高的放大率。二是制造工艺较简单,不必磨制一个个极小的透镜。复式显微镜的发明,是科学史上的里程碑,人类从此开始认识微观世界。不过,由于技术条件不成熟,16世纪的显微镜放大倍数都不高,因此在16世纪人类在探索微观世界方面并没有什么激动人心的发现。第二节.十七世纪的显微科学十七世纪的单显微镜与其说是科学仪器,不如说是艺术品。似乎那时的显微镜制造者所追求的并不是高的性能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